PCR에 의한 생체재료 연구. PCR에 의한 감염 진단. 감염 진단은 얼마나 정확합니까?

점점 더 의료 행위에서 사용하기 시작했습니다. 새로운 방법진단 전염병약어 PCR이 있습니다. 이 연구 방법의 본질은 무엇이며 그 덕분에 어떤 질병을 발견할 수 있는지, 다른 일반적인 진단 방법과 비교하여 PCR의 장점은 무엇이며 분석을 적절하게 준비하는 방법은 이 기사를 읽으면 알 수 있습니다. .

PCR이란 무엇입니까?

약어 PCR은 중합 효소 연쇄 반응을 나타냅니다. 이것은 DNA 세그먼트가 다음과 같은 경우 비례적으로 증식하는 능력입니다. 필요한 조건. 감염의 PCR 진단은 1980년대에 발명되었습니다. 유럽, 미국, 소련 과학자들이 이 발견을 위해 노력했기 때문에 혁신적인 진단 방법의 선구자를 결정하는 것은 불가능합니다. 또한 1983년 PCR과 같은 감염성 질환 연구방법이 공식 등록된 이후 이 방법을 지속적으로 개선해 나가고 있다. 오늘날 이 진단 방법은 필요한 최신 장비를 갖춘 거의 모든 의료 실험실에서 사용됩니다.

분석은 어떻게 이루어지나요?

PCR 분석의 경우에 따라 의학적 징후혈액, 타액, 소변, 정액, 모유 또는 생식기 분비물과 같은 물질의 의료 샘플링이 필요하며, 상피 세포. PCR에 의한 감염의 진단은 시험물질에서 병원체의 DNA를 검출하는 것이다. 화학 시약 및 장비를 사용하는 특수 실험실 조작의 도움으로 실험실 조교는 중합 효소 연쇄 반응을 수행합니다. 그것의 도움으로 현미경에서 보이지 않는 병원체 DNA의 일부가 장치에서 눈에 띄는 크기로 자랍니다. 그렇기 때문에 검사물질에 감염원인 DNA의 아주 작은 부분이 있어도 감염원인을 검출할 수 있는 것입니다.

PCR로 어떤 감염을 검출할 수 있습니까?

다수의 병원성 미생물 검출 가능 감염의 PCR 진단. 결과의 해석은 병원균의 검출과 그 유형의 결정으로 축소됩니다. 중합 효소 연쇄 반응은 진단에 사용됩니다. 각종 질병인간 : 성병에서 무증상, 소위 숨겨진 감염. PCR 발견:

• 간염 바이러스(A, B, C);
• 우레아플라즈마 우레아티쿰;
• 우레플라즈마 파붐;
• 클라미디아 트라코마티스;
• 칸디다
• 마이코플라스마 호미니스;
• 마이코플라스마 제니탈륨;
• 가르가넬라 바지날리스;
• 트리코모나스증;
• 결핵균;
• 단순 헤르페스 바이러스 1형 및 2형;
• 유두종 바이러스;
• 엡셰타인-바 바이러스;
• 헬리코박터 파일로리;
• 면역 결핍 바이러스.

위의 미생물은 간염, 결핵, STI 및 AIDS와 같은 질병을 유발합니다.

감염의 PCR 진단은 정성적(즉, 병원체의 존재 여부를 결정함) 및 정량적 분석(체내 미생물의 수를 계산함)의 형태로 수행됩니다. 예를 들어, 이 접근법은 필요합니다. HIV 감염 및 간염의 진단에서).

진단 방법의 장점

오늘날 거의 모든 실험실은 중합효소 연쇄 반응을 사용하여 인체 감염을 진단합니다. 이 방법의 장점은 무엇이며, 짧은 기간에 의사와 환자 모두에게 엄청난 인기를 얻은 이유는 무엇입니까? 이러한 혁신적인 기술의 급속한 확산은 높은 수준의 신뢰성, 효율성 및 감도로 설명됩니다. PCR 진단 방법의 장점을 더 자세히 살펴 보겠습니다.

1. 분석 프로세스는 가능한 한 자동화되어 연구 및 결과 해석 중에 인적 요소를 제거합니다.
2. 덕분에 현대 기술배양은 4~6시간 이내에 이루어지기 때문에 연구용으로 인계되는 날 분석 결과를 얻을 수 있습니다.
3. 감염의 PCR 진단은 매우 민감하여 작은 DNA 조각이 있는 경우에도 병원체를 감지할 수 있습니다. 예를 들어 부진하고 무증상 인 질병의 경우 다른 방법으로 작물을 파종하는 것이 어렵거나 완전히 불가능합니다.
4. PCR 연구를 위한 재료는 혈액, 타액, 비뇨생식기 분비물, 상피세포, 소변, 정액 등이 될 수 있어 분석을 위한 특정 물질을 채취할 수 없을 때 매우 편리합니다. 전염병 진단에 흔히 사용되는 정맥혈및 비뇨 생식기 도말.
5. 중합 효소 연쇄 반응 방법은 동일한 물질에서 여러 병원체를 식별할 수 있습니다. 이 접근 방식은 해결 시간을 단축할 뿐만 아니라 정확한 진단뿐만 아니라 연구 비용도 절약됩니다.
6. PCR 방법은 위음성 결과가 적기 때문에 신뢰할 수 있는 것으로 간주됩니다. 현재까지 기록된 오탐 응답은 없습니다.

PCR 진단은 언제 사용됩니까?

감염에 대한 PCR 진단의 이점이 무엇이든 간에 이 방법이 항상 사용되는 것은 아닙니다. 예를 들어, 톡소플라즈마증을 진단할 때 ELISA 분석 결과가 의심스럽거나 논란의 여지가 있는 경우에만 중합효소연쇄반응을 시행합니다. PCR 방법을 사용하면 질병의 역학을 추적하는 것이 불가능합니다. 메모 다음과 같은 경우이 연구 방법이 신뢰할 수 있고 효과적인 결과를 가져올 때:

• 기사의 관련 섹션에서 위에서 언급한 전염병을 결정하기 위해;
• 비뇨 생식기 감염의 광범위한 PCR 진단;
• 임신 중 STI를 결정하기 위해;
• HIV 진단을 위해;
• 논쟁의 여지가 있는 의학적 상황에서 예비 진단을 확인하거나 반박하기 위해
• 친자 관계 및 가족 관계를 결정하기 위해
• 유전적 소인을 검출하기 위해 유전자형 분석에 사용;
• PCR 방법은 법의학 부서 직원이 유전 물질을 식별하는 데 도움이 됩니다.

임신 중 PCR

목적으로 등록시 임산부는 PCR 법에 의한 검사가 의무화됩니다. 조기진단성병. 그러한 질병은 아이를 낳는 정상적인 과정에서 매우 위험하기 때문입니다. STI는 태아 발달 퇴색, 유산, 자궁 내 기형, 사산, 선천성 병리를 유발합니다. 적시에 감염을 발견하고 치료하면 유리한 임신 결과와 건강한 아기의 탄생 가능성이 크게 높아집니다.

대개 출산을 앞둔 엄마정해진 종합심사, 이름은 "PCR 6"입니다. 이러한 연구에는 6가지 다른 감염에 대한 분석이 포함됩니다. PCR 진단은 공립 및 사립 기관 모두에서 수행됩니다. Invitro, Happy Family, Uro-Pro 및 기타 실험실에서 이 서비스를 제공합니다. 이 문제는 아래에서 자세히 설명합니다.

따라서 분석을 위해 자료를 한 번만 가져가면 됩니다. 임신 중 PCR 진단을 수행 할 때 부인과 브러시로 자궁 경관에서 채취 한 비뇨 생식기 면봉이 필요합니다. 이 절차는 통증임산부에게 어떤 식으로든 태아에게 영향을 미치지 않습니다.

간염을 결정하기 위한 PCR

PCR 진단은 종종 간염의 원인 물질을 감지하기 위해 처방됩니다. 이것은 그러한 질병이 종종 무증상이며 만성 중증 난치병 단계로 진행된다는 사실에 의해 설명됩니다. PCR의 도움으로 간염이 가장 빠른 단계에서 감지되어 최단 시간 내에 유리한 치료에 기여합니다. 이러한 감염의 PCR 진단은 대부분의 개인 실험실에서 수행됩니다. 가격은 결정되는 바이러스 유형과 분석 유형에 따라 다릅니다. 따라서 혈액에서 병원체 DNA의 존재 여부를 간단히 결정하는 데 400-600 루블이 소요됩니다. 정량적 방법은 1200-1500 루블입니다.

PCR에 의한 종합 연구

감염성 질환의 진단에서 PCR 방법의 보다 효과적인 효과를 위해 널리 사용됩니다. 종합 연구, 진단 및 적시 치료 시간을 줄이는 데 도움이됩니다. 따라서 실험실에서는 "PCR-6" 및 "PCR-12" 분석을 제공합니다. 첫 번째 복합물에는 다음과 같은 생식기 감염의 PCR 진단이 포함됩니다.

• 우레아플라즈마증;
• 클라미디아;
• 마이코플라스마증;
• 인유두종 바이러스;
• 단순 헤르페스;
• 거대 세포 바이러스.

그러한 연구는 종종 여성에게 할당됩니다. 초기 날짜임신, 임신 계획 중.

"PCR-12" 동안 위의 질병 외에도 다음이 진단됩니다.

• 임질;
• 칸디다 증;
• 세균성 질염;
• 트리코모나스증;
• 우레아플라즈마증;
• 헤르페스 1형과 2형.

연구실에 따라 단지에 포함된 연구 질병 목록이 다를 수 있습니다. 의사는 각각 선택합니다 특정한 경우가장 적절한 검사. 어쨌든 PCR에 의한 포괄적인 분석은 시간, 노력 및 재료 비용이 훨씬 적게 듭니다.

감염의 PCR 진단 : 통과 방법?

PCR 분석을 위한 준비는 특정 유형의 물질을 수집하기 위한 권장 사항을 따르는 것으로 구성됩니다.

1. 비뇨 생식기 스미어를 통과 할 때 의도 된 분석 3 일 전에 성적 접촉을 삼가하고 항균제 복용을 중단하고 국소 연고, 크림, 좌약, 물기를 수행해서는 안됩니다. 월경 중에는 재료 샘플링이 수행되지 않습니다. 월경이 끝난 후 3일 이내에 분석을 수행해야 합니다. 분석 3시간 전에는 소변을 보는 것을 삼가야 합니다.
2. 아침에 빈속에 정맥혈을 기증하는 것이 좋습니다 (규칙은 아니지만). 전날에는 술과 지방이 많은 음식의 섭취를 제한해야 합니다.
3. 정자 기증 시 3일간은 성접촉을 삼가야 합니다. 음주, 사우나 방문, 뜨거운 목욕을 제한하는 것이 좋습니다.
4. 소변은 생식기를 철저히 배변한 후 아침에 채취해야 합니다. 특수 멸균 용기에 재료를 수집하는 것이 좋습니다. 재료는 몇 시간 내에 실험실로 배달되어야 합니다.

결과를 해독하는 방법?

감염에 대한 PCR 진단을 수행한 후 결과를 해석하는 것은 어렵지 않습니다. 정성적 방법을 해독하는 것은 시험 물질에서 병원균의 존재 여부를 평가하고 병원성 미생물의 유형을 결정하는 것입니다. 시험 물질에서 미생물 DNA의 일부가 발견되면 양성 결과가 해당 양식에 기록되고 어떤 유형의 미생물이 결정되었는지도 표시됩니다. 재료에 병원성 미생물이 없으면 결과는 음성입니다.

예를 들어 간염 진단과 같은 정량 분석 ​​결과는 실험실에서 지정한 표준을 사용하여 해독해야 합니다. 측정 단위와 정량적 요소는 의료 진단 기관마다 크게 다릅니다. 수반되는 모든 요인을 고려하여 확실하게 의사 만이 그러한 분석을 해독 할 수 있습니다.

최근에는 신뢰할 수 있고 매우 민감하며 빠른 방법다양한 인간 전염병 진단. 이 방법을 "PCR 분석"이라고 합니다. 그 본질, 그것이 밝힐 수있는 미생물 및 그것을 올바르게 취하는 방법은 우리 기사에서 알려줄 것입니다.

발견 역사

중합효소 연쇄반응(PCR) 방법은 1983년 미국 과학자 Kary Mullis에 의해 발명되었습니다. 이 방법은 원래 제작자가 일했던 Cetus Corporation에서 특허를 받았습니다. 그러나 1992년에 모든 권리와 특허권이 Hoffman-La Roche에 매각되었습니다. 그 후 유사한 연구가 병렬로 수행되었으며 Alice Chen, David Edgar, John Trell과 같은 다른 미국 생물 학자에 의해 기록되었습니다. 1980년 소련 과학자 A. Slyusarenko, A. Kaledin도 이 문제를 다루었기 때문에 단독 저작권 보유자를 결정하는 것이 불가능한 것으로 판명되었습니다. 많은 저명한 생화학자들이 중합효소 반응의 발전에 어느 정도 기여했으며 그들의 혁신에 대한 특허를 받았습니다. 현재 PCR 분석은 특수 장비를 갖춘 실험실 어디에서나 수행됩니다.

PCR 진단법의 본질

PCR 분석: 그것이 무엇이며 어떻게 작동합니까? 이 방법의 본질은 특별한 DNA 중합 효소를 사용하여 인위적인 조건에서 특정 미생물 환경의 부피를 증가시키는 것입니다. 이를 위해 기존 DNA 소재를 여러 번 곱한다. 따라서 샘플에 병원성 미생물이 존재하는 경우 생화학 실험실 조작으로 인해 그 수가 증가하고 현미경으로 박테리아를 감지하는 것이 어렵지 않습니다.

재료 연구는 어떻게 수행됩니까?

분석에는 다음이 필요합니다.

PCR을 수행하기 위해 denaturation, annealing 및 elongation의 세 단계로 구성된 25-30 반복이 수행됩니다.

폴리머 연쇄 반응 분석을 위해 특수 장치 인 증폭기가 사용됩니다. 최신 장비를 사용하면 테스트 튜브 가열 및 냉각에 필요한 프로그램을 설정하여 진단 중 오류를 제거할 수 있습니다.

진단은 어디에 사용됩니까?

폴리머 연쇄 반응 방법은 다양한 의학 분야에서 사용됩니다.

• 법의학 과학자들은 머리카락, 타액 또는 혈액과 같은 유전 물질을 식별하는 데 사용합니다.
• PCR 혈액 검사는 예를 들어 특정 약물에 대한 개인의 유전적 내재적 반응을 감지하기 위해 유전형 분석에 도움이 됩니다.
• 이 방법의 도움으로 사람들 간의 가족 관계가 확립됩니다.
• 가장 널리 사용되는 PCR 방법은 의료 진단다양한 전염병을 식별하기 위해

PCR로 검출되는 감염은?

따라서 의학에서는 PCR 분석을 오랫동안 성공적으로 사용해 왔습니다. 그것이 무엇인지, 우리는 이미 알고 있습니다. 그리고 어떤 병원균을 검출할 수 있습니까? 다음은 PCR로 진단됩니다.

또한 PCR 방법은 암 진단에 사용됩니다.

방법의 장점

PCR 진단에는 몇 가지 장점이 있습니다.

신뢰할 수 있는 결과를 위해 PCR 연구, 진단 예비 준비를 위한 권장 사항에 따라 분석을 통과해야 합니다.

1. 타액 기증 전 재료 복용 4시간 전부터는 음식물 섭취 및 약 복용을 삼가야 합니다. 절차 직전에 끓인 물로 입을 헹굽니다.
2. 볼 안쪽 표면에서 샘플을 채취할 때도 위의 규칙을 따라야 합니다. 헹굼 후에는 선의 비밀을 강조하기 위해 가벼운 피부 마사지를하는 것이 좋습니다.
3. 소변은 보통 집에서 수집합니다. 이렇게하려면 생식기의 철저한 화장실을 수행해야합니다. 멸균 플라스틱 용기에 50-60ml의 소변을 수집합니다. 재료의 순도를 확보하기 위해 여성의 경우 탐폰을 질에 삽입하고 남성의 경우 피부 주름을 최대한 당기는 것이 좋습니다. 생리 중에는 재료를 복용할 수 없습니다.
4. 정자를 기증하기 위해서는 채취 전 3일간 성관계를 금해야 합니다. 의사는 또한 사우나 방문과 뜨거운 목욕, 술과 매운 음식을 마시지 말라고 조언합니다. 검사 3시간 전부터는 소변을 삼가야 합니다.
5. 예를 들어 비뇨생식기 도말 전달의 경우 클라미디아에 대한 PCR 검사를 시행하는 경우 남녀 모두 3일 동안 성적인 휴식을 취하는 것이 좋습니다. 분석을 할 수 없는 2주 전 항균 약물. 일주일 이내에 사용 중지 친밀한 젤, 연고, 질 좌약, douching. 검사 3시간 전부터는 소변을 삼가야 합니다. 월경 중에는 재료의 샘플링을 하지 않고, 중단 후 3일만 혈액 분비물비뇨 생식기 도말 검사를 할 수 있습니다.

임신 중 PCR

아기를 기다리는 동안 많은 성병은 태아의 정상적인 발달에 매우 위험합니다. 성병은 자궁 내 성장 지연, 유산 또는 조산, 어린이의 선천성 기형을 유발할 수 있습니다. 따라서 임신 초기에 PCR 검사를 받는 것이 매우 중요합니다. 등록시 분석을 통과해야합니다-최대 12주.

특수 브러시를 사용하여 자궁 경관에서 재료를 채취합니다. 절차는 고통스럽지 않으며 아기에게 위험하지 않습니다. 일반적으로 임신 중에는 우레아 플라스마 증, 마이코 플라스마 증, 거대 세포 바이러스, 헤르페스, 유두종 바이러스뿐만 아니라 PCR 방법으로 클라미디아에 대한 분석이 수행됩니다. 이러한 복잡한 검사를 PCR-6이라고합니다.

HIV 진단용 PCR

중합 효소 연쇄 반응 방법은 신체의 변화와 진단 조건에 매우 민감하기 때문에 많은 요인이 결과에 영향을 미칠 수 있습니다. 따라서 HIV 감염에 대한 PCR 분석은 신뢰할 수 있는 방법이 아니며 효율성은 96-98%입니다. 나머지 2-4%의 사례에서 테스트는 위양성 결과를 제공합니다.

그러나 어떤 상황에서는 HIV의 PCR 진단 없이는 할 수 없습니다. 일반적으로 위음성 ELISA 결과를 가진 사람들에게 제공됩니다. 이러한 지표는 사람이 아직 바이러스에 대한 항체를 개발하지 않았으며 여러 번 증가하지 않으면 감지할 수 없음을 나타냅니다. 이것이 바로 PCR 방법을 사용하여 혈액 검사를 수행함으로써 얻을 수 있는 것입니다.

이러한 진단은 HIV 양성인 어머니에게서 태어난 생후 첫 해의 어린이에게도 필요합니다. 이 방법은 자녀의 상태를 안정적으로 결정하는 유일한 방법입니다.

간염 진단용 PCR

중합 효소 연쇄 반응 방법을 사용하면 감염에 대한 항체가 형성되거나 질병의 증상이 시작되기 오래 전에 A, B, C 형 간염 바이러스의 DNA를 감지 할 수 있습니다. C 형 간염에 대한 PCR 분석은 85 %의 경우이 질병이 무증상이며 적시에 치료하지 않으면 만성 단계로 진행되기 때문에 특히 효과적입니다.

병원체를 적시에 감지하면 합병증과 장기 치료를 피하는 데 도움이 됩니다.

종합 PCR 검사

포괄적인 PCR 분석: 마이코플라스마 제니탈륨, 마이코플라스마 호미니스, 가드네렐라 질, 칸디다, 트리코모나스, 사이토메갈로바이러스, 헤르페스 1형 및 2형, 임질, 유두종바이러스와 같은 여러 유형의 감염을 동시에 결정하는 것을 포함하는 고분자 연쇄 반응 방법에 의한 검사. 이러한 진단의 가격은 2000 ~ 3500 루블입니다. 클리닉, 사용되는 재료 및 장비, 분석 유형(정성적 또는 정량적)에 따라 다릅니다. 귀하의 경우에 필요한 사항 - 의사가 결정할 것입니다. 어떤 경우에는 병원균의 존재를 확인하는 것만으로도 충분하며, 예를 들어 HIV 감염의 경우 정량 역가가 중요한 역할을 합니다. 위의 병원체를 모두 진단할 때 검사를 "PCR-12 분석"이라고 합니다.

분석 결과 해독

PCR 분석을 해독하는 것은 어렵지 않습니다. 지표에는 "긍정적인 결과"와 "부정적인 결과"의 2가지 척도만 있습니다. 병원체가 발견되면 의사는 99% 확실하게 질병의 존재를 확인하고 환자 치료를 시작할 수 있습니다. 감염을 결정하는 정량적 방법으로 해당 열은 검출된 박테리아의 수치 지표를 나타냅니다. 의사만이 질병의 정도를 판단하고 필요한 치료를 처방할 수 있습니다.

예를 들어 어떤 경우에는 PCR로 HIV 감염을 결정할 때 음성 결과가 나오면 얻은 지표를 확인하기 위해 추가 검사를 수행해야 합니다.

어디에서 분석을 수행해야 합니까?

PCR 분석을 할 곳: in 주립 종합병원아니면 개인 연구실에서? 안타깝게도 시립 의료기관에서는 장비와 방법이 낙후된 경우가 많습니다. 따라서 최신 장비와 우수한 인력을 갖춘 개인 실험실을 선호하는 것이 좋습니다. 게다가, 개인 클리닉결과를 훨씬 빠르게 얻을 수 있습니다.

모스크바에서는 많은 개인 실험실에서 다양한 감염에 대한 PCR 분석을 제공합니다. 예를 들어 Vita, Complex Clinic, Happy Family, Uro-Pro와 같은 클리닉에서는 PCR 분석을 수행합니다. 시험 가격은 200 루블입니다. 단일 병원체를 식별하기 위해.

대부분의 경우 PCR을 통한 감염성 질환의 진단은 감염 초기 단계에서 체내의 병원체를 검출하는 빠르고 신뢰할 수 있는 방법이라고 결론지을 수 있습니다. 그러나 여전히 어떤 경우에는 다른 진단 방법을 선택하는 것이 좋습니다. 전문가 만이 그러한 연구의 필요성을 결정할 수 있습니다. PCR 분석을 해독하는 것도 전문적인 접근이 필요합니다. 의사의 지시를 따르고 필요하지 않은 검사는 받지 마십시오.