Proučavanje biomaterijala pomoću PCR. Dijagnostika infekcija metodom PCR. Koliko je točna dijagnoza infekcija?
Sve se više počeo koristiti u medicinskoj praksi nova metoda dijagnostika zarazne bolesti, koji ima kraticu PCR. Što je bit ove metode istraživanja i koje se bolesti mogu otkriti zahvaljujući njoj, kao i koje su prednosti PCR-a u usporedbi s drugim uobičajenim dijagnostičkim metodama i kako se pravilno pripremiti za analizu, možete saznati čitajući ovaj članak .
Međutim, u nekim slučajevima radi se koncentracija uzorka kako bi se povećala osjetljivost testa. Komercijalni kompleti imaju prednost jer su homologirani. Međutim, karakteristike ovih skupova često se opisuju jezgrovito, a redoslijed korištenih početnica uglavnom se ne spominje. Taj nedostatak informacija može biti kritičan kada novi sojevi postanu epidemija, a također je važno poznavanje granica specifičnosti testa. Također smo utvrdili analitičku specifičnost, odnosno sposobnost novog testa da otkrije samo ciljni patogen, kao i intra- i inter-site varijabilnost.
Što je PCR?
Skraćenica PCR označava lančanu reakciju polimerazom. Ovo je sposobnost segmenta DNK da se proporcionalno umnožava kada potrebne uvjete. PCR-dijagnostika infekcija izumljena je 1980-ih. Na otkriću su radili europski, američki i sovjetski znanstvenici, tako da nije moguće odrediti pionira inovativne dijagnostičke metode. Osim toga, od 1983. godine, kada je službeno registrirana takva metoda za proučavanje zaraznih bolesti kao PCR, nastavio se rad na poboljšanju ove metode. Danas se ova dijagnostička metoda koristi u gotovo svakom medicinskom laboratoriju koji ima potrebnu suvremenu opremu.
Osim toga, ti su testovi potvrđeni kliničkim uzorcima. Klinička interpretacija mora uzeti u obzir. Stoga se za svaku ekstrakciju negativna ekstrakcijska kontrola podvrgava istim postupcima kao i uzorak. Specifičnost testa ovisi o ciljnom genu i početnicama, koje se smatraju univerzalnima jer mogu amplificirati visoko očuvanu zonu. Usprkos ovome visok stupanj očuvanja, neke vrste čiji je ribosomski gen jako divergentan ne mogu se umnožiti.
S obzirom na vremenska ograničenja i broj analiza molekularne biologije koje se izvode u laboratoriju poput našeg, izuzetno je korisno imati kliničke podatke popraćene zahtjevima za ekspertizom. Nadalje, svaki poseban zahtjev za analizu trebao bi biti podložan prethodnom telefonskom kontaktu.
Kako se radi analiza?
Za PCR analizu, ovisno o medicinske indikacije potrebno je medicinsko uzorkovanje materijala kao što su krv, slina, urin, sjemena tekućina, majčino mlijeko ili genitalni sekret, epitelne stanice. Dijagnoza infekcija PCR-om je otkrivanje DNK patogena u ispitivanom materijalu. Uz pomoć posebnih laboratorijskih manipulacija pomoću kemijskih reagensa i opreme, laboratorijski pomoćnici provode lančanu reakciju polimeraze. Uz njegovu pomoć, dio DNK patogena koji je nevidljiv u mikroskopu raste do veličina koje su uočljive u uređaju. Zbog toga je moguće otkriti uzročnika infekcije čak i ako u ispitivanom materijalu postoji beznačajan dio njegove DNK.
Dijagnoza infektivnog endokarditisa u pacijenata koji su podvrgnuti operaciji valvule.
- Molekularno genetičke metode za dijagnosticiranje vigilantnih mikroorganizama.
- Klamidija: dijagnoza i liječenje.
Zašto su cijene niske?
Možemo prakticirati niske cijene jer smo također proizvođači dijagnostičkih setova. Sami proizvodimo sirovine i vršimo analize u našem laboratoriju. Na taj način možemo kontrolirati sve svoje troškove od primitka vašeg uzorka do slanja našeg rezultata.
Koje se infekcije mogu otkriti PCR-om?
Sposoban detektirati niz patogenih mikroorganizama PCR dijagnostikom infekcija. Tumačenje rezultata svodi se na otkrivanje uzročnika i određivanje njegove vrste. Za dijagnozu se koristi lančana reakcija polimeraze razne bolesti ljudski: od spolno prenosivih do asimptomatskih, tzv skrivene infekcije. PCR nalazi:
Zapravo, situacija je prilično jednostavna i može se raščlaniti na sljedeći način. Moguće je koristiti filtere od staklenih mikrovlakana ako uzimanje krvi nije moguće ili je teško uzeti nekoliko kapi krvi na nosaču; bez pamuka ili gaze ili mrlja za ovu vrstu uzorkovanja.
Infekcije mokraćnog sustava: Urin je odličan uzorak, u mnogim slučajevima, za pijelonefritis, ali i za opće infekcije; urina za sumnju na leptospirozu. kožne lezije: lokalni uzorak, na rubu ili periferiji lezije, treba ukloniti ili struganjem oštricom skalpela i čuvati u suhoj epruveti ili tamponom; kosa, a posebno dlaka, koristan je dodatak kvaliteti uzorka; ukloniti s ruba rane. biopsije tkiva ili organa izvrsni su uzorci, savršeno opravdani kada je napad lokaliziran. Možete poslati svoj uzorak u jednom pismu, ali važno je slijediti trenutne propise o "prijevozu uzoraka" jer ste odgovorni za svoj paket i probleme koji mogu nastati ako se razdvajanje otvori ili zatvori.
- virus hepatitisa (A, B, C);
- ureplasma urealiticum;
- ureplasma parvum;
- klamidija trahomatis;
- kandida
- mikoplazma hominis;
- mikoplazma genitalium;
- garganella vaginalis;
- trihomonijaza;
- Mycobacterium tuberculosis;
- herpes simplex virus tipa 1 i 2;
- papiloma virus;
- Epshetain-Barr virus;
- Helicobacter pylori;
- virus imunodeficijencije.
Navedeni mikroorganizmi uzrokuju bolesti kao što su hepatitis, tuberkuloza, SPI i AIDS.
Dostupni su svi načini dostave. Slobodni ste odabrati svoja vozila: svoj paket možete predati u pošti, na releju, odabrati svog operatera ili odnijeti uzorak u laboratorij odmah tijekom radnog vremena. Ovo rješenje vam omogućuje da unaprijed ispunite svoje naljepnice za otpremu, a posebno koristite siguran transport uz jamstvo isporuke sljedeći dan do 13 sati. Također imate mogućnost zatražiti brisanje na svom radnom mjestu.
Tumačenje rezultata PCR-a kod muškaraca
Sva ova rješenja jamče vaš paket, njegov dolazak i dobar prijem da ti dam brz rezultat. Naš asortiman stalno proširujemo na druge vrste. Kako bismo izbjegli preopterećenje uzoraka i zahtjeva za analizu, radije nudimo ove usluge na progresivan način. U tom smislu, pozivamo vas da se pretplatite na naš newsletter, gdje ćemo vas obavijestiti o novim dostupnim ciljevima.
PCR dijagnostika infekcija provodi se u obliku kvalitativne (odnosno, utvrđuje se prisutnost ili odsutnost patogena) i kvantitativne analize (izračunava se broj mikroba u tijelu - ovaj pristup je neophodan, na primjer, u dijagnostici HIV infekcija i hepatitisa).
Prednosti dijagnostičke metode
Gotovo svaki laboratorij danas dijagnosticira ljudske infekcije pomoću lančane reakcije polimerazom. Koje su prednosti ove metode, zašto je u tako kratkom vremenu postala nevjerojatno popularna i među liječnicima i među pacijentima? Tako brzo širenje inovativne tehnologije objašnjava se visokom razinom pouzdanosti, učinkovitosti i osjetljivosti. Razmotrimo detaljnije prednosti PCR dijagnostičke metode:
Biomaterijal za istraživanje
Ako se ne liječi, ova infekcija može postati kronična i proširiti se kožom po cijelom tijelu. Tada će izazvati ozbiljne komplikacije koje mogu utjecati na nekoliko organa. Lako je spriječiti komplikacije jer se lajmska bolest liječi ako se rano otkrije, ali dijagnoza nije laka.
Postoji rizik od infekcije za medicinske sestre s oboljelim životinjama; no galopom se najčešće može zaraziti tijekom hodanja po travnatim površinama, a simptomi koji se najčešće uočavaju su veliki opći umor, neobične glavobolje, popraćene bolovima u zglobovima; ugriz krpelja uzrokuje blagu lokalnu upalu; ne možete govoriti o simptomima karakterističnim za lajmsku bolest.
- Proces analize je maksimalno automatiziran, što eliminira ljudski faktor tijekom proučavanja i tumačenja rezultata.
- Zahvaljujući moderne tehnologije kulture se uzgajaju u roku od 4-6 sati, i sukladno tome, rezultat analize možete dobiti na dan kada je materijal predan na istraživanje.
- PCR dijagnostika infekcija je vrlo osjetljiva, što omogućuje otkrivanje uzročnika čak iu prisutnosti malog dijela DNK. U nekim slučajevima, na primjer, s sporim i asimptomatskim bolestima, sjetva usjeva drugom metodom je teška ili potpuno nemoguća.
- Materijal za PCR istraživanje može biti krv, slina, urogenitalni sekret, epitelne stanice, urin, sperma, što je izuzetno zgodno kada je nemoguće uzeti određeni materijal za analizu. Obično se koristi za dijagnosticiranje zaraznih bolesti venske krvi i urogenitalni bris.
- Metoda lančane reakcije polimerazom može identificirati nekoliko patogena iz istog materijala. Ovaj pristup ne samo da smanjuje vrijeme rješavanja ispravna dijagnoza ali i štedi troškove istraživanja.
- PCR metoda se smatra pouzdanom, jer je zabilježen samo mali broj lažno negativnih rezultata. Do danas nije zabilježen nijedan lažno pozitivan odgovor.
Među patogenim ljudskim vrstama samo 6 uzrokuje lajmsku bolest. Čuvanje uzorka: na sobnoj temperaturi. Otkrivanje ispod granice ne znači da meta nedostaje. U ovom slučaju nudi se nekoliko mogućnosti. Molekularna dijagnostika toksoplazmoze. Odgovorni doktor.
Dijagnoza kongenitalne toksoplazmoze. Kod imunokompromitiranog fetusa toksoplazmoza, obično benigna, može imati dramatične posljedice; a otkrivanje specifičnih protutijela raznim serološkim metodama može biti teško i dugotrajno. Dijagnostika i molekularna identifikacija lišmanioze. Prednosti ovog testa su, s jedne strane, njegova izuzetna osjetljivost, koja može omogućiti jednostavnu analizu krvi za postavljanje dijagnoze, as druge strane, činjenica da omogućuje brži odgovor od kulture.
Kada se koristi PCR dijagnostika?
Bez obzira na prednosti PCR dijagnostike infekcija, ova se metoda ne koristi uvijek. Na primjer, kada se dijagnosticira toksoplazmoza, lančana reakcija polimeraze provodi se samo ako je ELISA analiza pokazala sumnjiv ili kontroverzan rezultat. Pomoću PCR metode nemoguće je pratiti dinamiku bolesti. Bilješka sljedećim slučajevima kada će ova metoda istraživanja donijeti pouzdane i učinkovite rezultate:
Molekularna identifikacija lišmanioze. Molekularna identifikacija provodi se od kraja 2006. Ovaj je rad pokazao da postoji nukleotidni polimorfizam regije koja se proučava, što omogućuje specifično razlikovanje svake od ovih vrsta jedna od druge. Ova se metoda trenutno sustavno koristi paralelno s izoenzimskom identifikacijom.
Saznajte više o PCR analizi
Ovaj molekularni pristup ima dvije glavne prednosti: primjenjuje se izravno na biološkim uzorcima s boljom osjetljivošću od kulture, a vrijeme odgovora je brzo. Često ovo dijagnostička studija odgovornost je veterinara povezanog s operacijom.
- utvrditi gore navedene zarazne bolesti u odgovarajućem odjeljku članka;
- raširena PCR dijagnostika urogenitalnih infekcija;
- odrediti STI tijekom trudnoće;
- za dijagnozu HIV-a;
- u kontroverznim medicinskim situacijama za potvrdu ili opovrgavanje preliminarne dijagnoze;
- utvrditi očinstvo i rodbinske veze;
- koristi se u genotipizaciji za otkrivanje nasljednih predispozicija;
- PCR metoda pomaže zaposlenicima sudske medicine u identifikaciji genetskog materijala.
PCR tijekom trudnoće
Pregled PCR metodom obvezan je za trudnicu prilikom upisa u tu svrhu rana dijagnoza spolno prenosive infekcije. Budući da su takve bolesti izuzetno opasne za normalan tijek razdoblja rađanja djeteta. SPI izazivaju zastoj u razvoju fetusa, pobačaje, intrauterine deformacije, mrtvorođenče, kongenitalne patologije. Pravovremeno otkrivanje i liječenje infekcije značajno povećava šanse za povoljan ishod trudnoće i rađanje zdravog djeteta.
Serologija ne otkriva sam virus. Kao i kod svih bolesti, omogućuje otkrivanje tragova njegovog prolaska, odnosno antitijela koja proizvodi tijelo kao odgovor na njegov "napad". Dobivena protutijela specifična su za svaku bolest: serološki test otkriva protutijela samo za bolest koju bi trebao otkriti.
Traju nekoliko mjeseci: 6 mjeseci nakon infekcije životinja će uvijek biti pozitivna, ali se ne zna kada će doći do infekcije. Perzistencija virusa u životinji bit će više ili kraće, ovisno o organu u pitanju, na primjer, može se otkriti nekoliko mjeseci nakon infekcije krajnika, ali samo nekoliko dana ili ne više od nekoliko tjedana u krv.
Obično trudnica imenovani sveobuhvatan pregled, koji ima naziv "PCR 6". Takva studija uključuje analizu 6 različitih infekcija. PCR dijagnostika se provodi u javnim i privatnim ustanovama: Invitro, Happy Family, Uro-Pro i drugi laboratoriji nude ovu uslugu. Ovaj problem je detaljnije opisan u nastavku.
Sekvenciranje ima nekoliko interesa. Obratite se određenoj instituciji za gniježđenje, bez obzira je li soj odgovoran za zdravstveni problem isti onaj pronađen prije nekoliko mjeseci ili godina ili ako nekoliko sojeva cirkulira u istom razrjeđenju. - Prilikom praćenja učinkovitosti, osigurajte da je soj pronađen u uzorcima soj divljeg tipa, a ne soj cjepiva. Pravila korištenja, prednosti, nedostaci i cijena svakog testa.
Kliničar postavlja dijagnozu na temelju proučavanja povijesti pacijenta, kliničkih manifestacija i laboratorijskih dijagnostičkih podataka.
Donja tablica prikazuje karakteristike izvedbe svakog testa. Što se tiče serologije, samo puna krv u suhoj epruveti omogućuje analizu. Zatim se epruvete moraju pokriti radi dobrog odvajanja seruma. Odabir pravog kompleta može uštedjeti vrijeme na optimizaciji kompleta i eksperimentiranju.
Dakle, samo jednom će biti potrebno uzeti materijal na analizu. Prilikom provođenja PCR dijagnostike tijekom trudnoće potreban je urogenitalni bris koji se uzima iz cervikalnog kanala ginekološkom četkicom. Ovaj postupak ne bol kod trudnice i ni na koji način ne utječe na plod.
Čimbenici koje treba uzeti u obzir pri odabiru kompleta. Podrijetlo uzorka: Za uzorke iz različitih izvora koriste se različiti setovi jer ih je potrebno drugačije obrađivati. Izvori uzoraka koje treba uzeti u obzir pri odabiru kompleta za ekstrakciju uključuju izvore, krv, kosu, glodavce, lišće, bakterije, kvasce, gljivice, insekte, izmet, tjelesne tekućine, spore, zemlju, kliničke uzorke, forenzičke uzorke i otiske prstiju. Metoda pripreme uzorka: pribor mora biti kompatibilan s metodom pripreme uzorka. Omjer ispod 8 znači da je uzorak kontaminiran proteinima ili organskim otapalom kao što je fenol. Uklanjanje ili odvajanje membranskih lipida i staničnih ostataka obično se provodi pomoću deterdženata kao što je natrijev dodecil sulfat i centrifugiranja. Budući da organska otapala talože proteine, ostavljajući polinukleotide u otopini, talog proteina se zatim odvaja centrifugiranjem. Ograničenja ove metode su sljedeća: upotreba opasnih organskih otapala i vrijeme potrebno za završetak ekstrakcije. Stanični kontaminanti se uklanjaju razne faze ispiranje. Prednost ove tehnologije je što se može ugraditi u kolone centrifuge ili mikronizove, isplativa je, ima jednostavniji i brži postupak od organske ekstrakcije i prikladna je za automatizaciju. Skupovi temeljeni na ovoj metodi uključuju itd. magnetska separacija. Glavna prednost ove metode je što je brza i prilagodljiva automatizaciji. Međutim, to može biti skuplje u usporedbi s drugim metodologijama predstavljenim u ovom pregledu. Ova se metoda temelji na specifičnoj interakciji između negativno nabijenih fosfata nukleinske kiseline i pozitivno nabijenih površinskih molekula supstrata.
- Na primjer, uzorak krvi će se tretirati drugačije od osušene mrlje krvi.
- To se može postići fizikalnim ili kemijskim metodama.
- eliminacija lipida.
- Uklanjanje proteina iz ekstrakta stanica.
- U prvoj fazi stanice se liziraju, a stanični sediment uklanja centrifugiranjem.
- U drugom koraku, proteini se denaturiraju pomoću proteaze.
- Ovo je široko korištena metoda u općim skupovima.
PCR za određivanje hepatitisa
Često se propisuje PCR dijagnostika za otkrivanje uzročnika hepatitisa. To se objašnjava činjenicom da je takva bolest često asimptomatska i prelazi u kroničnu tešku neizlječivu fazu. Uz pomoć PCR-a, hepatitis se otkriva u najranijim fazama, što doprinosi povoljnom izlječenju u najkraćem mogućem vremenu. Takva PCR dijagnostika infekcija provodi se u većini privatnih laboratorija. Cijena ovisi o vrsti virusa koji se utvrđuje i vrsti analize. Dakle, jednostavno određivanje prisutnosti ili odsutnosti DNK patogena u krvi košta 400-600 rubalja. Kvantitativna metoda koštat će 1200-1500 rubalja.
Sveobuhvatna studija pomoću PCR-a
Za još učinkovitiju učinkovitost PCR metode u dijagnostici zaraznih bolesti, naširoko se koristi sveobuhvatna studija, što pomaže smanjiti vrijeme dijagnoze i pravodobnog liječenja. Dakle, laboratoriji nude analizu "PCR-6" i "PCR-12". Prvi kompleks uključuje PCR dijagnostiku genitalnih infekcija, kao što su:
- ureplasmosis;
- klamidija;
- mikoplazmoza;
- ljudski papiloma virus;
- jednostavan herpes;
- citomegalovirus.
Takva studija često se dodjeljuje ženama na rani datumi trudnoće, kao i tijekom planiranja začeća.
Tijekom "PCR-12", osim gore navedenih bolesti, dijagnosticiraju se:
- gonoreja;
- kandidijaza;
- bakterijska vaginoza;
- trihomonijaza;
- ureplasmosis;
- herpes 1 i 2 vrste.
Ovisno o laboratoriju, popis proučavanih bolesti uključenih u kompleks može varirati. Liječnik će odabrati u svakom konkretan slučaj najprikladniji pregled. U svakom slučaju, sveobuhvatna analiza PCR-om će oduzeti mnogo manje vremena, truda i materijalnih troškova.
PCR dijagnostika infekcija: kako proći?
Priprema za PCR analizu sastoji se u pridržavanju preporuka za prikupljanje određene vrste materijala:
- Prilikom uzimanja urogenitalnog brisa treba se suzdržati od seksualnog kontakta tri dana prije planirane analize, prestati uzimati antibakterijske lijekove i ne smiju se provoditi lokalne masti, kreme, čepići, ispiranje. Tijekom menstrualnog protoka, uzorkovanje materijala se ne provodi - potrebno je provesti analizu ne prije 3 dana nakon završetka menstruacije. Trebali biste se suzdržati od mokrenja 3 sata prije analize.
- Bolje je vensku krv dati ujutro, natašte (iako to nije pravilo). Dan ranije trebali biste ograničiti konzumaciju alkohola i masne hrane.
- Prilikom davanja sperme morate se suzdržati od seksualnog kontakta tri dana. Preporuča se ograničiti upotrebu alkohola, posjet sauni, uzimanje vruće kupke.
- Urin treba uzimati ujutro, nakon temeljite toalete spolnih organa. Bolje je prikupiti materijal u posebnom sterilnom spremniku. Materijal treba dostaviti u laboratorij u roku od nekoliko sati.
Kako dekodirati rezultat?
Nije teško interpretirati rezultate nakon provedene PCR dijagnostike infekcija. Dešifriranje kvalitativne metode sastoji se u procjeni prisutnosti ili odsutnosti patogena u ispitivanom materijalu, kao iu određivanju vrste patogenog mikroorganizma. Ako je u ispitivanom materijalu pronađen dio DNA mikroba, tada se na odgovarajućem obrascu upisuje pozitivan rezultat, te se navodi koja je vrsta mikroba određena. U nedostatku patogenog mikroorganizma u materijalu, rezultat će biti negativan.
Rezultati kvantitativne analize, na primjer, u dijagnozi hepatitisa, moraju se dešifrirati pomoću standarda koje je odredio laboratorij. Budući da se mjerne jedinice i kvantitativni faktor značajno razlikuju u različitim medicinskim dijagnostičkim ustanovama. Pouzdano, uzimajući u obzir sve popratne čimbenike, samo liječnik može dešifrirati takvu analizu.
Nedavno je pouzdan, vrlo osjetljiv i brza metoda dijagnoza raznih ljudskih zaraznih bolesti. Ova metoda se naziva "PCR analiza". njegovu suštinu, koje mikroorganizme može otkriti i kako ga pravilno uzeti, reći ćemo u našem članku.
Povijest otkrića
Metodu lančane reakcije polimerazom (PCR) izumio je američki znanstvenik Kary Mullis 1983. godine. Izvorno ju je patentirala tvrtka Cetus Corporation u kojoj je radio njen tvorac. Ali 1992. sva prava i patenti prodani su Hoffman-La Rocheu. Nakon toga se pokazalo da su slična istraživanja paralelno provodili i snimali i drugi američki biolozi, poput Alice Chen, Davida Edgara, Johna Trella. Godine 1980. tim su se problemom bavili i sovjetski znanstvenici A. Slyusarenko, A. Kaledin, pa se pokazalo da je nemoguće odrediti jedinog nositelja autorskog prava. Mnogi eminentni biokemičari dali su određeni doprinos razvoju reakcije polimeraze i patentirali svoje inovacije. Trenutno se PCR analiza provodi posvuda u posebno opremljenim laboratorijima.
Bit PCR dijagnostičke metode
PCR analiza: što je to i kako radi? Bit metode je povećanje volumena određene mikrobne sredine u umjetnim uvjetima pomoću posebnog enzima DNA polimeraze. Za to se postojeći DNK materijal višestruko umnožava. Dakle, u prisutnosti patogenog mikroorganizma u uzorku, njegov broj će biti povećan zbog biokemijskih laboratorijskih manipulacija, a neće biti teško detektirati bakteriju pod mikroskopom.
Kako se provodi istraživanje materijala?
Za analizu je potrebno:
Za izvođenje PCR-a provodi se 25-30 ponavljanja, koja se sastoje od tri faze: denaturacije, žarenja i elongacije.
Za analizu lančane reakcije polimera koristi se poseban uređaj - pojačivač. Moderna oprema omogućuje vam postavljanje potrebnog programa za grijanje i hlađenje epruveta kako biste uklonili pogreške tijekom dijagnostike.
Gdje se koristi dijagnostika?
Metoda polimerne lančane reakcije koristi se u raznim područjima medicine:
- forenzičari ga koriste za identifikaciju genetskog materijala, poput kose, sline ili krvi;
- PCR test krvi pomaže kod genotipizacije, na primjer, za otkrivanje individualne genetski inherentne reakcije na određeni lijek;
- uz pomoć ove metode utvrđuje se prisutnost obiteljskih veza među ljudima;
- Najpopularnija PCR metoda postala je in medicinska dijagnostika identificirati razne zarazne bolesti.
Koje se infekcije otkrivaju PCR-om?
Dakle, medicina već dugo i uspješno koristi PCR analizu. Što je to, već znamo. I koji se uzročnici mogu njime otkriti? PCR-om se dijagnosticira:
Također, PCR metode se koriste u dijagnostici raka.
Prednosti metode
PCR dijagnostika ima nekoliko prednosti:
Da bi rezultati bili pouzdani PCR studije, morate proći analizu, slijedeći preporuke za preliminarnu pripremu za dijagnozu:
- Prije doniranja sline, trebate se suzdržati od jela i uzimanja lijekova 4 sata prije uzimanja materijala. Neposredno prije postupka isperite usta prokuhanom vodom.
- Gornja pravila treba se pridržavati i prilikom uzimanja uzorka s unutarnje površine obraza. Nakon ispiranja preporuča se lagana masaža kože kako bi se istaknula tajna žlijezde.
- Urin se obično prikuplja kod kuće. Da biste to učinili, morate provesti temeljitu toaletu genitalija. Sakupite 50-60 ml urina u sterilnu plastičnu posudu. Kako bi se osigurala čistoća materijala, ženama se preporuča staviti tampon u rodnicu, a muškarcima povući kožni nabor što je više moguće. Ne možete uzimati materijal tijekom menstruacije.
- Da biste donirali spermu, morate se suzdržati od spolnog odnosa 3 dana prije prikupljanja materijala. Liječnici također savjetuju odlazak u saunu i vruću kupku, pijenje alkohola i začinjenu hranu. 3 sata prije analize morate se suzdržati od mokrenja.
- Za davanje urogenitalnog brisa, primjerice, ako se radi PCR test na klamidiju, i ženama i muškarcima preporuča se seksualni mir 3 dana. 2 tjedna prije nego što se analiza ne može uzeti antibakterijski lijekovi. Prestanite koristiti unutar tjedan dana intimni gelovi, masti, vaginalni čepići, ispiranje. 3 sata prije pregleda morate se suzdržati od mokrenja. Tijekom menstruacije uzorkovanje materijala se ne provodi, samo 3 dana nakon prestanka krvne izlučevine možete uzeti urogenitalni bris.
PCR tijekom trudnoće
Dok čekate bebu, mnoge spolno prenosive infekcije izuzetno su opasne za normalan razvoj fetusa. STD mogu izazvati intrauterini zastoj u rastu, pobačaj ili prerano rođenje, kongenitalne malformacije djeteta. Stoga je iznimno važno podvrgnuti se PCR pregledu u ranoj trudnoći. Potrebno je proći analizu prilikom registracije - do 12 tjedana.
Materijal se uzima iz cervikalnog kanala posebnom četkicom. Postupak je bezbolan i ne predstavlja opasnost za bebu. Obično se tijekom trudnoće provodi analiza na klamidiju metodom PCR, kao i na ureaplazmozu, mikoplazmozu, citomegalovirus, herpes, papiloma virus. Takav kompleks ispitivanja naziva se PCR-6.
PCR za dijagnostiku HIV-a
Zbog činjenice da je metoda lančane reakcije polimeraze vrlo osjetljiva na promjene u tijelu i uvjete dijagnoze, mnogi čimbenici mogu utjecati na rezultat. Stoga PCR analiza za HIV infekciju nije pouzdana metoda, njegova učinkovitost je 96-98%. U preostalih 2-4% slučajeva test daje lažno pozitivne rezultate.
Ali u nekim situacijama ne može se bez PCR dijagnostike HIV-a. Obično se daje osobama s lažno negativnim ELISA rezultatom. Takvi pokazatelji pokazuju da osoba još nije razvila antitijela na virus i ne mogu se otkriti bez višestrukog povećanja broja. Upravo se to može postići provođenjem analize krvi PCR metodom.
Takva dijagnostika je također potrebna za djecu prve godine života rođenu od HIV pozitivne majke. Metoda je jedini način da se pouzdano utvrdi status djeteta.
PCR za dijagnostiku hepatitisa
Metoda lančane reakcije polimerazom omogućuje otkrivanje DNK virusa hepatitisa A, B, C puno prije stvaranja protutijela na infekciju ili pojave simptoma bolesti. PCR analiza za hepatitis C je posebno učinkovita, budući da je u 85% slučajeva ova bolest asimptomatska i, bez pravodobnog liječenja, prelazi u kronični stadij.
Pravovremeno otkrivanje patogena pomoći će u izbjegavanju komplikacija i dugotrajnom liječenju.
Sveobuhvatni PCR pregled
Sveobuhvatna PCR analiza: ispitivanje metodom polimerne lančane reakcije, koja uključuje određivanje više vrsta infekcija istovremeno: mycoplasma genitalium, mycoplasma hominis, gardnerella vaginalis, candida, trichomonas, citomegalovirus, herpes tipa 1 i 2, gonoreja, papiloma virus. Cijena takve dijagnostike kreće se od 2000 do 3500 rubalja. ovisno o klinici, korištenim materijalima i opremi, kao io vrsti analize: kvalitativnoj ili kvantitativnoj. Što je potrebno u vašem slučaju - liječnik će odlučiti. U nekim slučajevima dovoljno je samo utvrditi prisutnost patogena, u drugima, na primjer, s HIV infekcijom, kvantitativni titar igra važnu ulogu. Kod dijagnosticiranja svih navedenih uzročnika, pregled se naziva "PCR-12 analiza".
Dešifriranje rezultata analize
Dešifriranje PCR analize nije teško. Postoje samo 2 ljestvice indikatora - "pozitivan rezultat" i "negativan rezultat". Kada se otkrije patogen, liječnici mogu potvrditi prisutnost bolesti s 99% sigurnošću i započeti liječenje pacijenta. Kod kvantitativne metode određivanja infekcije, u odgovarajućem stupcu bit će naznačen brojčani pokazatelj otkrivenih bakterija. Samo liječnik može odrediti stupanj bolesti i propisati potrebno liječenje.
U nekim slučajevima, na primjer, pri određivanju HIV infekcije PCR-om, s negativnim rezultatom, postaje potrebno provesti dodatne preglede kako bi se potvrdili dobiveni pokazatelji.
Gdje uzeti analizu?
Gdje uzeti PCR analizu: u državna poliklinika Ili u privatnom laboratoriju? Nažalost, u općinskim zdravstvenim ustanovama oprema i metode često su zastarjele. Stoga je bolje dati prednost privatnim laboratorijima s modernom opremom i visokokvalificiranim osobljem. Osim toga, u privatna klinika puno brže ćete postići rezultate.
U Moskvi mnogi privatni laboratoriji nude PCR analizu za razne infekcije. Na primjer, u takvim klinikama kao što su Vita, Complex Clinic, Happy Family, Uro-Pro, provodi se PCR analiza. Cijena pregleda je od 200 rubalja. za identifikaciju jednog patogena.
Može se zaključiti da je dijagnoza zaraznih bolesti PCR-om u većini slučajeva brz i pouzdan način otkrivanja uzročnika u tijelu u ranim fazama infekcije. Ali ipak, u određenim slučajevima, vrijedi odabrati druge dijagnostičke metode. Samo stručnjak može odrediti potrebu za takvom studijom. Dešifriranje PCR analize također zahtijeva profesionalni pristup. Pridržavajte se uputa liječnika i nemojte uzimati pretrage koje vam nisu potrebne.
