Proučavanje biomaterijala PCR-om. Dijagnoza infekcija PCR-om. Koliko je tačna dijagnoza infekcija?
Sve više se počeo koristiti u medicinskoj praksi nova metoda dijagnostika zarazne bolesti, koji ima skraćenicu PCR. Koja je suština ove metode istraživanja i koje se bolesti mogu otkriti zahvaljujući njoj, kao i koje su prednosti PCR-a u odnosu na druge uobičajene dijagnostičke metode i kako se pravilno pripremiti za analizu, možete saznati čitajući ovaj članak .
Međutim, u nekim slučajevima koncentracija uzorka se radi kako bi se povećala osjetljivost testa. Komercijalni kompleti imaju prednost što su homologirani. Međutim, karakteristike ovih setova se često opisuju sažeto, a redoslijed korištenih prajmera se uglavnom ne spominje. Ovaj nedostatak informacija može biti kritičan kada novi sojevi postanu epidemijski, a poznavanje granica specifičnosti testa je također važno. Utvrdili smo i analitičku specifičnost, odnosno sposobnost novog testa da otkrije samo ciljni patogen, kao i intra- i inter-site varijabilnost.
Šta je PCR?
Skraćenica PCR označava lančanu reakciju polimeraze. Ovo je sposobnost segmenta DNK da se proporcionalno razmnožava kada neophodni uslovi. PCR-dijagnostika infekcija izmišljena je još 1980-ih. Na otkriću su radili evropski, američki i sovjetski naučnici, tako da nije moguće odrediti pionira inovativne dijagnostičke metode. Osim toga, od 1983. godine, kada je službeno registrirana takva metoda za proučavanje zaraznih bolesti kao što je PCR, nastavljen je rad na poboljšanju ove metode. Danas se ova dijagnostička metoda koristi u gotovo svakoj medicinskoj laboratoriji koja ima neophodnu savremenu opremu.
Osim toga, ovi testovi su potvrđeni kliničkim uzorcima. Klinička interpretacija mora uzeti u obzir. Dakle, za svaku ekstrakciju, negativna kontrola ekstrakcije se podvrgava istim postupcima kao i uzorak. Specifičnost testa zavisi od ciljnog gena i prajmera, koji se smatraju univerzalnim jer su u stanju da pojačaju visoko očuvanu zonu. Bez obzira na ovo visok stepen očuvanja, neke vrste čiji je ribosomski gen veoma divergentan ne mogu se amplificirati.
S obzirom na vremenska ograničenja i broj molekularno-bioloških analiza koje se obavljaju u laboratoriji poput naše, izuzetno je korisno imati kliničke podatke uz zahtjeve za ekspertizu. Osim toga, svaki poseban zahtjev za analizu bi idealno trebao biti predmet prethodnog telefonskog kontakta.
Kako se radi analiza?
Za PCR analizu, u zavisnosti od medicinske indikacije potrebno je medicinsko uzorkovanje materijala kao što su krv, pljuvačka, urin, sperma, majčino mlijeko ili genitalni sekret, epitelne ćelije. Dijagnoza infekcija pomoću PCR-a je otkrivanje DNK patogena u test materijalu. Uz pomoć posebnih laboratorijskih manipulacija pomoću kemijskih reagensa i opreme, laboratorijski asistenti izvode lančanu reakciju polimeraze. Uz njegovu pomoć, dio DNK patogena koji je nevidljiv u mikroskopu raste do veličina koje su uočljive u uređaju. Zbog toga je moguće otkriti uzročnika infekcije čak i ako u testnom materijalu postoji neznatan dio njegove DNK.
Dijagnoza infektivnog endokarditisa kod pacijenata koji su podvrgnuti operaciji zalistaka.
- Molekularno genetske metode za dijagnosticiranje budnih mikroorganizama.
- Hlamidija: dijagnoza i liječenje.
Zašto su cijene niske?
Možemo prakticirati niske cijene jer smo i proizvođači dijagnostičkih kompleta. Proizvodimo vlastite sirovine i vršimo analize u našoj laboratoriji. Na ovaj način možemo kontrolirati sve naše troškove od prijema vašeg uzorka do slanja našeg rezultata.
Koje infekcije se mogu otkriti PCR-om?
Može otkriti niz patogenih mikroorganizama PCR dijagnostika infekcija. Tumačenje rezultata svodi se na otkrivanje patogena i određivanje njegovog tipa. Za dijagnozu se koristi lančana reakcija polimeraze razne bolesti ljudski: od spolno prenosivih do asimptomatskih, tzv skrivene infekcije. PCR nalazi:
Zapravo, situacija je prilično jednostavna i može se razložiti na sljedeći način. Moguće je koristiti filtere od staklenih mikrovlakana ako uzimanje krvi nije moguće ili je teško izdržati nekoliko kapi krvi na nosaču; bez pamuka ili gaze ili mrlja za ovu vrstu uzorkovanja.
Infekcije urinarnog trakta: Urin je odličan uzorak, u mnogim slučajevima, za pijelonefritis, ali i za opšte infekcije; urina za sumnju na leptospirozu. kožne lezije: lokalni uzorak, na rubu ili periferiji lezije, treba ukloniti ili struganjem oštricom skalpela i čuvati u suhoj epruveti ili tamponom; kosa, a posebno dlaka, su koristan dodatak kvaliteti uzorka; za uklanjanje sa ivice rane. Biopsije tkiva ili organa su odlični uzorci, savršeno opravdani kada je napad lokaliziran. Svoj uzorak možete poslati u jednom pismu, ali je važno da se pridržavate važećih propisa o "transportu uzoraka" jer ste sami odgovorni za svoj paket i probleme koji mogu nastati ako se split otvori ili zatvori.
- virus hepatitisa (A, B, C);
- ureplasma urealiticum;
- ureplasma parvum;
- chlamydia trachomatis;
- candida
- mycoplasma hominis;
- mycoplasma genitalium;
- garganella vaginalis;
- trihomonijaza;
- mycobacterium tuberculosis;
- herpes simplex virus tip 1 i 2;
- papiloma virus;
- Epshetain-Barr virus;
- helicobacter pylori;
- virus imunodeficijencije.
Gore navedeni mikroorganizmi uzrokuju bolesti kao što su hepatitis, tuberkuloza, SPI i AIDS.
Dostupni su svi načini dostave. Slobodno birate svoja vozila: paket možete ostaviti u pošti, na releju, izabrati svog operatera ili uzeti uzorak u laboratoriju odmah tokom radnog vremena. Ovo rješenje vam omogućava da unaprijed popunite svoje otpremne etikete, a posebno koristite siguran transport uz garanciju isporuke sljedećeg dana do 13:00 sati. Također imate mogućnost da zatražite brisanje na svom radnom mjestu.
Tumačenje rezultata PCR kod muškaraca
Sva ova rješenja garantuju Vaš paket, njegov dolazak i dobar prijem da ti dam brz rezultat. Naš asortiman stalno proširujemo na druge vrste. Kako bismo izbjegli preopterećenje uzoraka i zahtjeva za analizom, radije nudimo ove usluge na progresivan način. S tim u vezi, pozivamo vas da se pretplatite na naš newsletter, gdje ćemo vas obavještavati o novim dostupnim ciljevima.
PCR dijagnostika infekcija provodi se u obliku kvalitativne (odnosno, utvrđuje se prisutnost ili odsutnost patogena) i kvantitativne analize (izračunava se broj mikroba u tijelu - ovaj pristup je neophodan, npr. u dijagnostici HIV infekcija i hepatitisa).
Prednosti dijagnostičke metode
Gotovo svaki laboratorij danas dijagnosticira ljudske infekcije pomoću lančane reakcije polimeraze. Koje su prednosti ove metode, zašto je za tako kratko vrijeme postala nevjerovatno popularna i među ljekarima i među pacijentima? Tako brzo širenje inovativne tehnologije objašnjava se visokim nivoom pouzdanosti, efikasnosti i osjetljivosti. Razmotrimo detaljnije prednosti PCR dijagnostičke metode:
Biomaterijal za istraživanje
Ako se ne liječi, ova infekcija može postati kronična i proširiti kožu po cijelom tijelu. Tada će doći do ozbiljnih komplikacija koje mogu utjecati na nekoliko organa. Komplikacije je lako spriječiti jer se lajmska bolest liječi ako se rano otkrije, ali dijagnoza nije laka.
Postoji rizik od infekcije za medicinske sestre sa oboljelim životinjama; ali se galopom najčešće može zaraziti hodajući po travnatim površinama, a simptomi koji se najčešće uočavaju su veliki opći umor, neobične glavobolje, praćene bolovima u zglobovima; ubod krpelja uzrokuje blagu lokalnu upalu; ne možete govoriti o simptomima karakterističnim za lajmsku bolest.
- Proces analize je maksimalno automatizovan, čime se eliminiše ljudski faktor tokom proučavanja i interpretacije rezultata.
- Hvala za moderne tehnologije kulture se uzgajaju u roku od 4-6 sati, a shodno tome, rezultat analize možete dobiti na dan kada se materijal preda na istraživanje.
- PCR dijagnostika infekcija je vrlo osjetljiva, što omogućava otkrivanje patogena čak i u prisustvu malog dijela DNK. U nekim slučajevima, na primjer, kod sporih i asimptomatskih bolesti, sjetva usjeva drugom metodom je teška ili potpuno nemoguća.
- Materijal za PCR istraživanje može biti krv, pljuvačka, urogenitalni sekret, epitelne ćelije, urin, sperma, što je izuzetno zgodno kada je nemoguće uzeti određeni materijal za analizu. Obično se koristi za dijagnosticiranje zaraznih bolesti venska krv i urogenitalni bris.
- Metoda lančane reakcije polimerazom može identificirati nekoliko patogena iz istog materijala. Ovaj pristup ne samo da smanjuje vrijeme za rješavanje problema tačna dijagnoza ali i štedi troškove istraživanja.
- PCR metoda se smatra pouzdanom, jer je zabilježen samo mali broj lažno negativnih rezultata. Do danas nisu zabilježeni lažno pozitivni odgovori.
Među patogenim ljudskim vrstama, samo 6 uzrokuje lajmsku bolest. Čuvanje uzorka: na sobnoj temperaturi. Otkrivanje ispod granice ne znači da meta nedostaje. U ovom slučaju nudi se nekoliko mogućnosti. Molekularna dijagnoza toksoplazmoze. Odgovorni doktor.
Dijagnoza kongenitalne toksoplazmoze. Kod imunokompromitovanog fetusa, toksoplazmoza, obično benigna, može imati dramatične posljedice; a otkrivanje specifičnih antitijela različitim serološkim metodama može biti teško i dugotrajno. Dijagnoza i molekularna identifikacija lajšmanijaze. Prednosti ovog testa su, s jedne strane, njegova ekstremna osjetljivost, koja može omogućiti jednostavnu analizu krvi za postavljanje dijagnoze, i, s druge strane, činjenica da omogućava brži odgovor od kulture.
Kada se koristi PCR dijagnostika?
Bez obzira na prednosti PCR dijagnostike infekcija, ova metoda se ne koristi uvijek. Na primjer, prilikom dijagnosticiranja toksoplazmoze, polimerazna lančana reakcija se provodi samo ako je ELISA analiza pokazala sumnjiv ili kontroverzan rezultat. Koristeći PCR metodu, nemoguće je pratiti dinamiku bolesti. Bilješka sledećim slučajevima kada će ova metoda istraživanja donijeti pouzdane i učinkovite rezultate:
Molekularna identifikacija lajšmanijaze. Molekularna identifikacija se provodi od kraja 2006. godine. Ovaj rad je pokazao da postoji nukleotidni polimorfizam regije koja se proučava, što omogućava da se svaka od ovih vrsta razlikuje jedna od druge. Ova metoda se trenutno koristi sistematski paralelno sa izoenzimatskom identifikacijom.
Saznajte više o PCR analizi
Ovaj molekularni pristup ima dvije glavne prednosti: praktikuje se direktno na biološkim uzorcima s boljom osjetljivošću od kulture, a vrijeme odgovora je brzo. Često ovo dijagnostička studija odgovornost je veterinara koji je povezan s operacijom.
- za utvrđivanje zaraznih bolesti navedenih u odgovarajućem dijelu članka;
- rasprostranjena PCR dijagnostika urogenitalnih infekcija;
- za utvrđivanje SPI tokom trudnoće;
- za dijagnozu HIV-a;
- u kontroverznim medicinskim situacijama potvrditi ili opovrgnuti preliminarnu dijagnozu;
- utvrđivanje očinstva i porodičnih veza;
- koristi se u genotipizaciji za otkrivanje nasljednih predispozicija;
- PCR metoda pomaže zaposlenima na odjelu sudske medicine da identifikuju genetski materijal.
PCR tokom trudnoće
Pregled PCR metodom je obavezan za trudnicu prilikom prijave u tu svrhu rana dijagnoza spolno prenosivih infekcija. Budući da su takve bolesti izuzetno opasne za normalan tok perioda rađanja djeteta. SPI izazivaju blijedi razvoj fetusa, pobačaje, intrauterine deformitete, mrtvorođenost, kongenitalne patologije. Pravovremeno otkrivanje i liječenje infekcije značajno povećavaju šanse za povoljan ishod trudnoće i rođenje zdrave bebe.
Serologija ne otkriva sam virus. Kao i kod svih bolesti, omogućava vam da otkrijete tragove njegovog prolaska, odnosno antitela koja telo proizvodi kao odgovor na njegov "napad". Rezultirajuća antitijela su specifična za svaku bolest: serološki test otkriva antitijela samo za bolest koju bi trebalo otkriti.
Traju nekoliko mjeseci: 6 mjeseci nakon infekcije životinja će uvijek biti pozitivna, ali se ne zna kada će doći do infekcije. Postojanost virusa u životinji će biti manje ili više duga ovisno o organu u pitanju, na primjer, može se otkriti nekoliko mjeseci nakon infekcije krajnika, ali samo nekoliko dana ili ne duže od nekoliko sedmica u krv.
Obično buduca majka imenovan sveobuhvatan pregled, koji nosi naziv "PCR 6". Takva studija uključuje analizu 6 različitih infekcija. PCR dijagnostika se obavlja u javnim i privatnim ustanovama: Invitro, Happy Family, Uro-Pro i druge laboratorije nude ovu uslugu. Ovaj problem je detaljnije opisan u nastavku.
Sekvenciranje ima nekoliko interesa. Obratite se specifičnoj ustanovi za gniježđenje, bilo da je soj odgovoran za zdravstveni problem isti onaj koji je pronađen prije mjeseci ili godina, ili ako više sojeva cirkulira u istom razrijeđenju. - Prilikom praćenja efikasnosti, uverite se da je soj pronađen na uzorcima soj divljeg tipa, a ne soj vakcine. Pravila upotrebe, prednosti, nedostaci i cijena svakog testa.
Kliničar postavlja dijagnozu na osnovu proučavanja anamneze pacijenta, kliničkih manifestacija i laboratorijskih dijagnostičkih podataka.
Donja tabela prikazuje karakteristike performansi svakog testa. Što se tiče serologije, samo puna krv u suvoj epruveti dozvoljava analizu. Epruvete se tada moraju pokriti radi dobrog odvajanja seruma. Odabir pravog kompleta može uštedjeti vrijeme na optimizaciji kompleta i eksperimentiranju.
Stoga će biti potrebno samo jednom uzeti materijal na analizu. Prilikom provođenja PCR dijagnostike u trudnoći potreban je urogenitalni bris koji se ginekološkom četkicom uzima iz cervikalnog kanala. Ova procedura nije bol kod trudnice i ni na koji način ne utiče na fetus.
Faktori koje treba uzeti u obzir pri odabiru kompleta. Porijeklo uzorka: Za uzorke iz različitih izvora koriste se različiti kompleti jer ih treba različito obraditi. Izvori uzoraka koje treba uzeti u obzir pri odabiru kompleta za ekstrakciju uključuju izvore, krv, kosu, glodare, lišće, bakterije, kvasac, gljivice, insekte, izmet, tjelesne tekućine, spore, zemlju, kliničke uzorke, forenzičke uzorke i otiske prstiju. Metoda pripreme uzorka: Komplet mora biti kompatibilan sa metodom pripreme uzorka. Omjer ispod 8 ukazuje da je uzorak kontaminiran proteinima ili organskim rastvaračem kao što je fenol. Uklanjanje ili odvajanje membranskih lipida i staničnih ostataka obično se provodi pomoću deterdženata kao što je natrijum dodecil sulfat i centrifugiranja. Budući da organski rastvarači precipitiraju proteine, ostavljajući polinukleotide u otopini, proteinski precipitat se zatim odvaja centrifugiranjem. Ograničenja ove metode su sljedeća: upotreba opasnih organskih rastvarača i vrijeme potrebno za završetak ekstrakcije. Ćelijski zagađivači se uklanjaju razne faze ispiranje. Prednost ove tehnologije je što se može ugraditi u kolone centrifuge ili mikronizove, isplativa je, ima jednostavniju i bržu proceduru od organske ekstrakcije i pogodna je za automatizaciju. Setovi zasnovani na ovoj metodi uključuju itd. magnetna separacija. Glavna prednost ove metode je što je brza i prilagodljiva automatizaciji. Međutim, može biti skuplji u poređenju sa drugim metodologijama predstavljenim u ovom pregledu. Ova metoda se zasniva na specifičnoj interakciji između negativno nabijenih fosfata nukleinske kiseline i pozitivno nabijenih površinskih molekula supstrata.
- Na primjer, uzorak krvi će se tretirati drugačije od mrlje osušene krvi.
- To se može postići fizičkim ili hemijskim metodama.
- eliminacija lipida.
- Uklanjanje proteina iz ćelijskog ekstrakta.
- U prvoj fazi, ćelije se liziraju, a ćelijski sediment se uklanja centrifugiranjem.
- U drugom koraku, proteini se denaturiraju pomoću proteaze.
- Ovo je široko korištena metoda u općim skupovima.
PCR za određivanje hepatitisa
PCR dijagnostika se često propisuje za otkrivanje uzročnika hepatitisa. To se objašnjava činjenicom da je takva bolest često asimptomatska i prelazi u kroničnu tešku neizlječivu fazu. Uz pomoć PCR-a, hepatitis se otkriva u najranijim fazama, što doprinosi povoljnom izlječenju u najkraćem mogućem roku. Takva PCR dijagnostika infekcija provodi se u većini privatnih laboratorija. Cijena ovisi o vrsti virusa koji se utvrđuje i vrsti analize. Dakle, jednostavno određivanje prisustva ili odsustva DNK patogena u krvi košta 400-600 rubalja. Kvantitativna metoda koštat će 1200-1500 rubalja.
Sveobuhvatna studija PCR-om
Za još efikasniju efikasnost PCR metode u dijagnostici zaraznih bolesti, široko se koristi sveobuhvatna studija, što pomaže da se skrati vrijeme postavljanja dijagnoze i pravovremenog liječenja. Dakle, laboratorije nude analizu "PCR-6" i "PCR-12". Prvi kompleks uključuje PCR dijagnostiku genitalnih infekcija, kao što su:
- ureplasmosis;
- klamidija;
- mikoplazmoza;
- humani papiloma virus;
- jednostavan herpes;
- citomegalovirus.
Takva studija se često dodjeljuje ženama na ranih datuma trudnoće, kao i tokom planiranja začeća.
Tokom "PCR-12", pored navedenih bolesti, dijagnostikuju se i:
- gonoreja;
- kandidijaza;
- bakterijska vaginoza;
- trihomonijaza;
- ureplasmosis;
- herpes 1 i 2 tipa.
Ovisno o laboratoriji, lista proučavanih bolesti uključenih u kompleks može varirati. Doktor će odabrati svaki konkretan slučaj najprikladniji pregled. U svakom slučaju, sveobuhvatna analiza PCR-om će oduzeti mnogo manje vremena, truda i materijalnih troškova.
PCR dijagnostika infekcija: kako proći?
Priprema za PCR analizu sastoji se u pridržavanju preporuka za prikupljanje određene vrste materijala:
- Prilikom davanja urogenitalnog brisa, treba se suzdržati od seksualnog kontakta tri dana prije namjeravane analize, prestati uzimati antibakterijske lijekove i ne smije se izvoditi lokalne masti, kreme, čepići, ispiranje. Tokom menstrualnog toka, uzorkovanje materijala se ne vrši - potrebno je izvršiti analizu ne ranije od 3 dana nakon završetka menstruacije. Treba se suzdržati od mokrenja 3 sata prije analize.
- Vensku krv je bolje darovati ujutro, na prazan želudac (iako to nije pravilo). Dan ranije treba ograničiti konzumaciju alkohola i masne hrane.
- Prilikom doniranja sperme morate se suzdržati od seksualnog kontakta tri dana. Preporučljivo je ograničiti upotrebu alkohola, odlazak u saunu, uzimanje tople kupke.
- Urin treba uzimati ujutro, nakon temeljnog toaleta genitalija. Bolje je prikupiti materijal u posebnu sterilnu posudu. Materijal treba dostaviti u laboratoriju u roku od nekoliko sati.
Kako dekodirati rezultat?
Nije teško protumačiti rezultate nakon provedene PCR dijagnoze infekcija. Dešifrovanje kvalitativne metode sastoji se u proceni prisustva ili odsustva patogena u ispitivanom materijalu, kao i u određivanju vrste patogenog mikroorganizma. Ako je u ispitivanom materijalu pronađen dio DNK mikroba, tada se na odgovarajućem obrascu upisuje pozitivan rezultat, a također se navodi koja je vrsta mikroba određena. U nedostatku patogenog mikroorganizma u materijalu, rezultat će biti negativan.
Rezultati kvantitativne analize, na primjer, u dijagnozi hepatitisa, moraju se dešifrirati korištenjem standarda koje je odredila laboratorija. Budući da se mjerne jedinice i kvantitativni faktor značajno razlikuju u različitim medicinskim dijagnostičkim ustanovama. Pouzdano, uzimajući u obzir sve popratne faktore, samo liječnik može dešifrirati takvu analizu.
Nedavno, pouzdan, vrlo osjetljiv i brza metoda dijagnostika raznih zaraznih bolesti ljudi. Ova metoda se zove "PCR analiza". njegovu suštinu, koje mikroorganizme može otkriti i kako ga pravilno uzeti, reći ćemo u našem članku.
Istorija otkrića
Metodu lančane reakcije polimeraze (PCR) izumio je američki naučnik Kary Mullis 1983. godine. Prvobitno ju je patentirala Cetus Corporation, u kojoj je radio njen tvorac. Ali 1992. sva prava i patenti su prodati Hoffman-La Rocheu. Nakon toga se ispostavilo da su slične studije rađene paralelno i da su ih snimili i drugi američki biolozi, poput Alice Chen, Davida Edgara, Johna Trella. Godine 1980. sovjetski naučnici A. Slyusarenko, A. Kaledin također su se bavili ovim problemom, pa se pokazalo da je nemoguće odrediti jedinog nositelja autorskih prava. Mnogi eminentni biohemičari dali su određeni doprinos razvoju reakcije polimeraze i patentirali svoje inovacije. Trenutno se PCR analiza provodi svuda u posebno opremljenim laboratorijama.
Suština PCR dijagnostičke metode
PCR analiza: šta je to i kako radi? Suština metode je povećanje volumena određene mikrobne sredine u umjetnim uvjetima pomoću posebnog enzima DNK polimeraze. Za to se postojeći DNK materijal višestruko umnožava. Dakle, u prisustvu patogenog mikroorganizma u uzorku, njegov broj će biti povećan zbog biohemijskih laboratorijskih manipulacija, a bakteriju neće biti teško otkriti pod mikroskopom.
Kako se vrši istraživanje materijala?
Analiza zahtijeva:
Za izvođenje PCR-a izvodi se 25-30 ponavljanja, koje se sastoje od tri faze: denaturacija, žarenje i elongacija.
Za analizu polimerne lančane reakcije koristi se poseban uređaj - pojačalo. Savremena oprema omogućava postavljanje potrebnog programa za grijanje i hlađenje epruveta kako bi se eliminisale greške tokom dijagnostike.
Gdje se koristi dijagnostika?
Metoda polimerne lančane reakcije koristi se u različitim oblastima medicine:
- forenzičari ga koriste za identifikaciju genetskog materijala, kao što su kosa, pljuvačka ili krv;
- PCR test krvi pomaže kod genotipizacije, na primjer, da se otkrije individualna genetski inherentna reakcija na određeni lijek;
- uz pomoć ove metode utvrđuje se prisustvo porodičnih veza među ljudima;
- Najpopularnija PCR metoda je postala in medicinska dijagnostika za identifikaciju raznih zaraznih bolesti.
Koje infekcije se otkrivaju PCR-om?
Dakle, medicina dugo i uspješno koristi PCR analizu. Šta je to, već znamo. I koji se patogeni mogu otkriti s njim? PCR-om se dijagnosticira sljedeće:
Također, PCR metode se koriste u dijagnostici karcinoma.
Prednosti metode
PCR dijagnostika ima nekoliko prednosti:
Da bi rezultati bili pouzdani PCR studije, morate proći analizu, slijedeći preporuke za preliminarnu pripremu za dijagnozu:
- Prije doniranja pljuvačke treba se suzdržati od jela i uzimanja lijekova 4 sata prije uzimanja materijala. Neposredno prije postupka isperite usta prokuhanom vodom.
- Navedena pravila treba se pridržavati i prilikom uzimanja uzorka sa unutrašnje površine obraza. Nakon ispiranja, preporučuje se lagana masaža kože kako bi se istakla tajna žlijezde.
- Urin se obično sakuplja kod kuće. Da biste to učinili, morate obaviti temeljit toalet genitalija. Sakupite 50-60 ml urina u sterilnu plastičnu posudu. Da bi se osigurala čistoća materijala, ženama se preporučuje umetanje tampona u vaginu, a muškarcima da povuku kožni nabor što je više moguće. Ne možete uzimati materijal tokom menstruacije.
- Da biste donirali spermu, morate se suzdržati od seksualnih odnosa 3 dana prije uzimanja materijala. Lekari takođe savetuju odlazak u saunu i toplu kupku, konzumiranje alkohola i začinjenu hranu. 3 sata prije analize potrebno je suzdržati se od mokrenja.
- Za isporuku urogenitalnog brisa, na primjer, ako se radi PCR test na klamidiju, ženama i muškarcima se preporučuje seksualni odmor 3 dana. 2 sedmice prije analize ne može se uzeti antibakterijski lijekovi. Prestanite da koristite u roku od nedelju dana intimni gelovi, masti, vaginalne čepiće, ispiranje. 3 sata prije pregleda morate se suzdržati od mokrenja. Tokom menstruacije, uzorkovanje materijala se ne vrši, samo 3 dana nakon prestanka menstruacije krvne sekrecije možete uzeti urogenitalni bris.
PCR tokom trudnoće
Dok se čeka beba, mnoge polno prenosive infekcije su izuzetno opasne za normalan razvoj fetusa. Polno prenosive bolesti mogu izazvati intrauterino usporavanje rasta, pobačaj ili prijevremeni porod, kongenitalne malformacije djeteta. Stoga je izuzetno važno podvrgnuti se PCR pregledu u ranoj trudnoći. Prilikom registracije potrebno je položiti analizu - do 12 sedmica.
Materijal se uzima iz cervikalnog kanala posebnom četkom. Postupak je bezbolan i ne predstavlja opasnost za bebu. Obično se tijekom trudnoće provodi analiza na klamidiju PCR metodom, kao i na ureaplazmozu, mikoplazmozu, citomegalovirus, herpes, papiloma virus. Takav kompleks ispitivanja naziva se PCR-6.
PCR za dijagnozu HIV-a
Zbog činjenice da je metoda lančane reakcije polimerazom vrlo osjetljiva na promjene u tijelu i na uslove dijagnoze, na rezultat mogu utjecati mnogi faktori. Stoga PCR analiza na HIV infekciju nije pouzdana metoda, njena efikasnost je 96-98%. U preostalih 2-4% slučajeva test daje lažno pozitivne rezultate.
Ali u nekim situacijama ne može se bez PCR dijagnostike HIV-a. Obično se daje osobama sa lažno negativnim ELISA rezultatom. Takvi pokazatelji ukazuju da osoba još nije razvila antitijela na virus i da se ne mogu otkriti bez višestrukog povećanja broja. Upravo to se može postići provođenjem krvnog testa PCR metodom.
Takva dijagnostika je neophodna i za djecu prve godine života rođenu od HIV pozitivne majke. Metoda je jedini način da se pouzdano utvrdi status djeteta.
PCR za dijagnozu hepatitisa
Metoda lančane reakcije polimeraze omogućava otkrivanje DNK virusa hepatitisa A, B, C mnogo prije stvaranja antitijela na infekciju ili pojave simptoma bolesti. Analiza PCR-a na hepatitis C je posebno efikasna, jer je u 85% slučajeva ova bolest asimptomatska i bez pravovremenog liječenja prelazi u hroničnu fazu.
Pravovremeno otkrivanje patogena pomoći će u izbjegavanju komplikacija i dugotrajnom liječenju.
Sveobuhvatan PCR pregled
Sveobuhvatna PCR analiza: ispitivanje metodom polimerne lančane reakcije, koje uključuje istovremeno određivanje više vrsta infekcija: mycoplasma genitalium, mycoplasma hominis, gardnerella vaginalis, candida, trichomonas, citomegalovirus, herpes tip 1 i 2, papilloreja. Cijena takve dijagnostike kreće se od 2000 do 3500 rubalja. u zavisnosti od klinike, materijala i opreme koja se koristi, kao i od vrste analize: kvalitativne ili kvantitativne. Šta je neophodno u Vašem slučaju - odlučiće lekar. U nekim slučajevima dovoljno je samo utvrditi prisutnost patogena, u drugima, na primjer, kod HIV infekcije, kvantitativni titar igra važnu ulogu. Prilikom dijagnosticiranja svih gore navedenih patogena, pregled se naziva "PCR-12 analiza".
Dešifrovanje rezultata analize
Dešifriranje PCR analize nije teško. Postoje samo 2 skale indikatora - "pozitivan rezultat" i "negativan rezultat". Kada se otkrije patogen, liječnici mogu potvrditi prisutnost bolesti sa sigurnošću od 99% i započeti liječenje pacijenta. Kod kvantitativne metode za određivanje infekcije, odgovarajuća kolona će ukazati na numerički indikator otkrivenih bakterija. Samo ljekar može odrediti stepen bolesti i propisati neophodan tretman.
U nekim slučajevima, na primjer, prilikom utvrđivanja HIV infekcije PCR-om, s negativnim rezultatom, postaje potrebno provesti dodatna ispitivanja kako bi se potvrdili dobiveni pokazatelji.
Gdje uzeti analizu?
Gdje uzeti PCR analizu: u državna poliklinika Ili u privatnoj laboratoriji? Nažalost, u opštinskim zdravstvenim ustanovama oprema i metode su često zastarele. Stoga je bolje dati prednost privatnim laboratorijama sa modernom opremom i visokokvalificiranim osobljem. Osim toga, u privatna klinika dobićete rezultate mnogo brže.
U Moskvi mnoge privatne laboratorije nude PCR analizu za različite infekcije. Na primjer, u takvim klinikama kao što su Vita, Complex Clinic, Happy Family, Uro-Pro, provodi se PCR analiza. Cena pregleda je od 200 rubalja. za identifikaciju jednog patogena.
Može se zaključiti da je dijagnoza zaraznih bolesti PCR-om u većini slučajeva brz i pouzdan način otkrivanja patogena u organizmu u ranim fazama infekcije. Ali ipak, u određenim slučajevima vrijedi odabrati druge dijagnostičke metode. Samo stručnjak može odrediti potrebu za takvom studijom. Dešifrovanje PCR analize takođe zahteva profesionalan pristup. Pridržavajte se uputstava svog ljekara i nemojte raditi testove koji vam nisu potrebni.
