PCR 12 bris na koje infekcije su uključene. PCR je najbolji način za dijagnosticiranje infekcija

Dijagnoza zaraznih bolesti - bakterijskih i virusnih - usmjerena je na rano otkrivanje patogena, što omogućava rano i maksimalno propisivanje efikasnu terapiju. Najmoderniji način dijagnosticiranja infekcija je PCR ili polimerazna lančana reakcija. Dakle, šta je ova metoda i čemu služi?

Suština reakcije polimeraze

Svaki mikroorganizam i virus u svojoj strukturi sadrže molekule DNK ili RNK. Za svaki od njih, ovi spojevi su jedinstveni, stoga, ako se nukleinske kiseline izoluju u testu krvi kod djece ili odraslih, dijagnoza se može postaviti s apsolutnom točnošću.

Nažalost, koncentracija DNK u uzorcima krvi ili drugim biološkim materijalima je prilično niska i ne može se odrediti konvencionalnim dijagnostičkim metodama. Kako bi se riješio ovaj problem, izumljena je lančana reakcija polimeraze.

Suština PCR-a leži u posebnoj obradi uzorka krvi, zbog čega se u njemu povećava koncentracija molekula DNK, čije određivanje vrste dodatno omogućuje utvrđivanje vrste patogena i postavljanje dijagnoze.

Kako donirati krv za PCR

U pripremi za analizu treba pratiti opšte preporuke: ne piti niti jesti neposredno prije analize krvi. Iako za darivanje krvi za PCR, ne možete se tako strogo pridržavati ovih zahtjeva, jer tačnost studije ne ovisi o tome da li je analiza uzeta na pun ili prazan želudac.

Koje se bolesti mogu otkriti PCR-om

Uz pomoć PCR-a mogu se otkriti gotovo sve virusne i bakterijske bolesti. Za analizu se ne koristi samo krv, već i drugi biološki materijali: sperma, pljuvačka, brisevi iz uretre i iz cerviksa. Test krvi će biti informativan ako je patogen specifična bolest ulazi u ljudsku krv. Stoga se PCR krvi propisuje za sljedeće bolesti:

• virusni hepatitis A, B, C, D i TT;
• citomegalovirus;
• herpes infekcija (herpes virusi tipovi 1, 2 i 4);
• HIV infekcija
• enterovirusna infekcija;
• šindre;
• rubeola;
• toksoplazmoza;
• Infektivna mononukleoza;
• listerioza.

Ako uzmemo u obzir mogućnost izvođenja PCR-a drugih biomaterijala, onda na listu bolesti otkrivenih PCR-om treba dodati sljedeće:

• gardnereloza;
• salmoneloze;
• (oko 100 različitih sojeva humanog papiloma virusa);
• trihomonijaza;

Trenutno je posebno relevantan PCR test krvi trudnice na tzv.: citomegalovirus, toksoplazmozu, rubeolu i. To je zbog činjenice da navedene bolesti mogu dovesti do abnormalnosti u razvoju fetusa.

Prednosti PCR-a

Nedostaci analize

PCR je visokotehnološka metoda istraživanja i postavlja visoke zahtjeve za laboratorijsku opremu. Prostorija u kojoj se radi analiza mora biti opremljena biološkim filterom, jer su čestice kože i pljuvačke koje sadrže DNK molekule stalno prisutne u zraku. Nepoštivanje tehnike rada s biomaterijalima može uzrokovati netočan rezultat.

Test krvi - transkript kod odraslih (PCR)

Tumačenje rezultata ove studije nije teško, jer ne postoji tabela normi testova krvi za PCR. U listi rezultata mogu se pojaviti samo dvije fraze:

• negativan rezultat - uzročnik za koji je izvršena analiza nije otkriven;
• pozitivan rezultat - u tijelu postoji uzročnik navedene bolesti.

Morate biti svjesni da PCR može biti pozitivan čak iu odsustvu kliničkih simptoma bolesti! Tumačenje krvnog testa za PCR kod djece ne razlikuje se od onoga kod odraslih.

Ko treba da uradi PCR test

Svako može dati krv za istraživanje. Direktna indikacija za studiju je sumnja na spolno prenosive infekcije (gardnereloza, HIV infekcija). U slučaju slučajnog nezaštićenog seksualnog kontakta, samo PCR će pomoći u dijagnostici rana faza ako je osoba oboljela. Trudnice obavezno daju krv za kompleks TORCH. Kao i žene koje tek planiraju trudnoću

ekspresno- PCR dijagnostika u realnom vremenu je dizajniran za primanje brzi rezultati analize. PCR u realnom vremenu se često koristi za otkrivanje urogenitalnih infekcija. Za sveobuhvatnu dijagnozu skrivene infekcije koje se mogu prenijeti spolno (SPI), pruža se sveobuhvatna analiza PCR 12. Razmotrimo prvo šta je ovo metoda, koliko dugo traje dijagnoza i koje složene analize se njome rade. Takođe, koje infekcije su uključene u PCR studiju 12?

Više o PCR metodi

PCR dijagnostika se zasniva na proučavanju DNK ili RNK komponenti. Lančana reakcija polimeraze (PCR) je moderna metoda istraživanja visoke preciznosti, nastala na razvoju molekularne biologije. Zahvaljujući ovoj tehnici, postalo je moguće otkriti prisustvo patogena brojnih bolesti zbog ponovljenog udvostručavanja nekih dijelova DNK pod utjecajem umjetno stvorenih enzima. Da bi se dijagnosticirala patologija, dovoljno je otkriti samo nekoliko molekula DNK specifičnog infektivnog agensa u uzorku testa. Virološki odgovor se prati korišćenjem dijagnostičkih sistema sa dovoljno osetljivosti, od kojih je jedan RealBest HCV PCR.

PCR metoda se dijeli na kvalitativnu i kvantitativnu. Prva opcija omogućava otkrivanje patogena u tijelu. Drugi tip vam omogućava da dobijete detaljnu sliku, zahvaljujući određivanju kvantitativnog nivoa agresivnih mikroorganizama, takozvanog virusnog opterećenja.

PCR analiza za 12 infekcija uključuje sljedeće vrste studija za najčešće bolesti kao što su:

• Ureaplazmoza.
• mikoplazmoza.
• klamidija.
• trihomonijaza.
• Tuberkuloza.
• Hepatitis C i B.
• Kandidijaza (drozd).
• Gardnereloza (bakterijska vaginoza).
• Mononukleoza je zarazna.
• Humani papiloma virus (HPV).
• Virus humane imunodeficijencije (HIV) ili sindrom stečene imunodeficijencije (AIDS).

Spisak infekcija koje se mogu otkriti lančanom reakcijom polimeraze je nešto duži. Dakle, patologije koje se istražuju PCR-om u realnom vremenu također uključuju: listeriozu, Helicobacter pylori, citomegalovirus, hepatitis svih oblika, a to nisu sve bolesti.

Stoga laboratorije pružaju sveobuhvatne analize koje se sastoje od:

• PCR 12 infekcije.
• PCR 13 infekcije.
• PCR za 15 infekcija.

Analiza polimerazom se uspješno koristi u većini područja medicine, kao što su:

• Onkologija.
• Urologija.
• Hematologija.
• Gastroenterologija.
• pulmologija.
• Fiziologija i druge medicinske grane.

PCR metoda u realnom vremenu omogućava vam da otkrijete i identifikujete genetski materijal infektivnog agensa u tijelu u roku od 20 do 60 minuta.

Mogućnost da se skrati vrijeme ispitivanja dobijena je eliminacijom faze elektroforeze, koja dodatno djeluje kao garancija za sprječavanje lažno pozitivnih rezultata.

Suština PCR-a u realnom vremenu je da kvantifikuje akumulaciju proizvoda lančane reakcije polimeraze tokom automatskog vezivanja i interpretacije rezultata. Metoda omogućava otkrivanje čak i pojedinačnih molekula patogena u uzorku. Zbog ovog svojstva, PCR analiza na infekcije omogućava njihovo otkrivanje čak i prije pojave početnih simptoma patologije.

Detekcija latentnih infekcija PCR-om

PCR ispitivanjem na SPI može otkriti sve latentne urogenitalne infekcije. Bolesti genitourinarnog sistema koje se javljaju bez simptoma više se ne mogu utvrditi, zbog odsustva kliničke slike.

Najčešće postoji latentni tok infekcija koje se prenose spolnim putem, kao što su:

• ureaplazmoza;
• gardnereloza;
• klamidija;
• mikoplazma;
• gonoreja;
• herpes.

Zbog neodgovornog seksualnog života, urogenitalne infekcije su u ovom trenutku prilično česta pojava. Imaju podmuklu osobinu - to su blagi simptomi ili njihovo potpuno odsustvo do prelaska bolesti u tešku fazu, kada su njene posljedice već prisutne.

Zato je pravovremeno PCR testiranje na SPI toliko važno.

U kombinaciji sa vađenjem krvi uzima se bris iz uretre i cervikalni kanal cerviksa. Scraping from uretra nastaje dva sata nakon mokrenja. Prije uzimanja mrlja potrebno je suzdržati se od seksualnih odnosa jedan dan, koristiti vaginalne supozitorije, ispiranje.

Pravila za isporuku PCR analize

Pravilna priprema za PCR testiranje na SPI osigurava pouzdane rezultate testa. Lista obaveznih pravila je jednostavna, glavna stvar je da ne zanemarite nijednu stavku kako ne biste morali ponavljati postupak. Usklađenost sa svim uvjetima za pravilnu pripremu za dijagnozu uštedjet će trud, vrijeme i novac.

Lista preduslova za isporuku PCR-a u realnom vremenu:

1. Nekoliko dana prije uzimanja krvi potrebno je ograničiti konzumaciju masne, pržene, začinjene, slane, dimljene i druge teške, nezdrave hrane.
2. Na dan analize krvi potrebno je doći na prazan stomak, pije vodu dozvoljeno.
3. Tokom sedmice ne smijete uzimati alkohol, a nekoliko sati prije uzimanja krvi nemojte pušiti.
4. O uzimanju lijekova morate obavijestiti ljekara koji ispisuje uputnicu za pregled. Možda će ih trebati otkazati ili ograničiti.
5. Fizioterapeutske procedure (rentgen, fluorografija, ultrazvuk i sl.) utiču na promjenu sastava krvi. Najbolje ih je raditi u vrijeme koje se ne poklapa s analizom.
6. Fizička aktivnost i emocionalni stres direktno utječu na stanje tijela i formiranih komponenti krvi, uključujući. Stoga, kako ovi faktori ne bi uticali na performanse, treba ih ograničiti.
7. Potrebno je uzeti struganje sa genitalnih organa bez prisustva vanjskih vanjskih komponenti kao što su preparati za lokalnu primjenu, prisustvo sjemene tekućine. A uz očuvanje mikroflore - to znači da ispiranje i pranje treba isključiti na određeno vrijeme koje preporučuje liječnik.
8. Da bi ženi prenijela analizu, morat će se pridržavati faza menstrualnog ciklusa. Obično je studija dozvoljena prije menstruacije i 1-5 dana nakon njenog završetka.

Za provođenje složenih PCR analiza za 12, 13, 14, 15 infekcija ili više vrsta, potrebno je uzeti u obzir dodatne karakteristike bolesti koje treba otkriti. Na primjer, kada je u pitanju PCR testiranje na 15 infekcija, uključujući hepatitis, koji se prenosi kontaktom s krvlju. Zatim, pored gore navedenih pravila, neposredno prije pregleda morat ćete iz prehrane isključiti žuto povrće i voće koje sadrži karoten.

PCR testovi 13 i 12 su posebno česti zbog standardnog skupa infekcija.

PCR analiza infekcije ima neosporne prednosti u odnosu na mnoge vrste laboratorijska istraživanja, zbog tačnosti rezultata i brzine kojom se oni dobijaju. Zbog mogućnosti utvrđivanja bolesti, ne samo u akutnoj fazi, već iu latentnom obliku, studija polimeraznom lančanom reakcijom postala je jedna od glavnih dijagnostičkih metoda. Ali glavna prednost univerzalne PCR dijagnostike je mogućnost otkrivanja gotovo svakog virusa koji se prenosi spolnim i drugim putem.

Danas se PCR analiza smatra jednom od najpouzdanijih metoda za dijagnosticiranje različitih zaraznih bolesti. Osim toga, metoda postaje sve dostupnija. Zbog visokog stepena specifičnosti, mogućnost dobijanja lažnih rezultata je isključena.

Metodologija analize

Tokom analize ispitni materijal se stavlja u poseban uređaj. Dodajte enzime koji su uključeni u formiranje genetskog materijala. Nadalje, dolazi do ponovnog kopiranja DNK ili RNK patogena. Iz ciklusa u ciklus, broj kopija DNK raste do količine pri kojoj je lako identificirati patogen.

PCR test krvi se najčešće koristi u kliničku praksu kako bi se utvrdio zarazni uzrok bolesti. Također je moguće proučavati urin, bris iz ždrijela i druge biološke materijale. Kod žena se za PCR analizu koriste sekreti iz genitalnih organa i cervikalnog kanala. Istovremeno, važno je znati kako se pripremiti za PCR analizu kod žena kako bi rezultat bio što pouzdaniji. Glavna stvar je da se pridržavate sljedećih pravila:

• apstinencija od seksualnih odnosa tri dana prije testiranja;
• večina bakterije se mogu "isprati" u urinu, tako da ne biste trebali mokriti prije studije;
• ne provodite istraživanje odmah nakon menstruacije, morate pričekati 3-5 dana nakon završetka.

Ne postoji posebna priprema prije analize krvi.

PCR - šta pokazuje analiza?

Poznato je da PCR analiza pokazuje prisustvo različitih virusnih i bakterijske infekcije. Ova metoda je također učinkovita za otkrivanje latentnih, kroničnih infekcija. PCR analiza na SPI omogućava izolaciju patogena čak iu prisustvu pojedinačnih ćelija virusa i bakterija. Vrijedi napomenuti koji su PCR testovi uključeni u blok genitalnih infekcija, a to su:

• klamidija;
• ureaplazme (parvum i urealiticum);
• uzročnik gonoreje;
• Razne vrste humani papiloma virus;
• trichomonas;
• gardnerella;
• candida.

Kod infektivnih bolesti genitalnih organa materijal za PCR je bris iz cervikalnog kanala, uretre i vagine. Pripremi za začeće treba pristupiti s velikom odgovornošću. Prilikom planiranja trudnoće, PCR testovi su neophodni u slučaju kada postoje sumnje na najčešće zarazne bolesti. A u prisustvu infekcije, bolje je odgoditi trudnoću. Vrijedi napomenuti da se testovi za identifikaciju gore navedenih patogena moraju proći ne samo na ženu, već i na muškarca.

Također, PCR metoda vam omogućava da identificirate sljedeće patogene:

• virusi hepatitisa B i C;
• mycobacterium tuberculosis;
• virusi porodice herpesa, uključujući Epstein-Barr virus i citomegalovirus;
• infekcija helikobakterom.

Interpretacija rezultata

Dešifriranje PCR analize nije teško. Obično se rezultati PCR analiza mogu dobiti na sljedeći način:

U nekim slučajevima se provodi kvantitativno određivanje mikroorganizama. Ovo se posebno odnosi na bolesti uzrokovane oportunističkim patogenima. Budući da ove bakterije pokazuju svoje negativno djelovanje samo kada su u višku. Takođe, kvantitativna PCR analiza je važna za izbor terapijske taktike i u svrhu praćenja tretmana takvih virusne infekcije poput virusa HIV-a i hepatitisa.

PCR studija: šta je to? Savremeni svijet je ispunjen ogromnim brojem infekcija koje je sve teže otkriti. Razlog je taj što imaju vremena da se prilagode i evoluiraju. Postoje tradicionalni imunološki, morfološki i biohemijske metode dijagnostička studija. Inovativna metoda za otkrivanje zaraznih bolesti danas je PCR studija, zahvaljujući kojoj možete dobiti vrlo precizne rezultate.

Takva dijagnostika je moderna metoda molekularne biologije. Ima sljedeće dekodiranje - poliznaya lančana reakcija. Pogledajmo pobliže šta je to.

Šta pokazuje studija?

Zaustavimo se detaljnije na pitanju - analiza pomoću PCR-a: šta je to? Ovom studijom moguće je identificirati različite virusne i bakterijske infekcije.

Takva dijagnostika je vrlo učinkovita u otkrivanju latentnih, kroničnih infekcija. Šta pokazuje PCR analiza? Ispitivanje ovom metodom omogućava vam da odredite patogeni agens u prisustvu pojedinačnih ćelija bakterija i virusa.

Razmotrite koji su testovi uključeni u PCR:
. klamidija;
. mikoplazme;
. ureaplazma (urealiticum i parvum);
. uzročnik gonoreje;
. razne vrste humanog papiloma virusa;
. trichomonas;
. gardnerella;
. candida.

Ako je potrebno otkriti zarazne bolesti genitalnih organa, onda je odgovor na pitanje, šta je PCR studija, šta je to, uzimanje biomaterijala iz cervikalnog kanala, vagine i uretre.

Priprema za začeće je veoma važan događaj koji zahteva veliku odgovornost. Kada planirate da postanete roditelji, obavezno je položiti PCR test ako postoji sumnja na zaraznu bolest.

Ako je trudnoća već prisutna, takvu dijagnozu treba odgoditi. Važno je napomenuti: znati šta znači PCR analiza i proći je ne treba samo buduća mama ali i tata.

Šta otkriva PCR? Postoje sljedeće vrste patogena:

• virus hepatitisa B i C;
• uzročnici tuberkuloze;
• virusi iz porodice herpesa;
• infekcija helikobakterom.

Dijagnostički proces

Kako se radi PCR analiza? Takva dijagnostika se može izvesti pomoću različitih bioloških materijala, čiji sastav uključuje mikrobe.

Uostalom, točnost PCR analize ovisi o tome kako je materijal pravilno sakupljen i kako je odabrana priprema uzorka:

1. Detekcija genitalnih infekcija kao materijal za analizu su iscjedak iz genitalnih organa: iz cerviksa, uretre i urina.
2. Važno je shvatiti da je krv za PCR biološki materijal potrebna za određivanje hepatitisa C i HIV infekcije. Zahvaljujući upotrebi modernih vakuum sistema, proces uzimanja uzoraka krvi postao je minimalno traumatičan i maksimalno izolovan od okoline.
3. Analiza pljuvačke za PCR omogućava vam dijagnosticiranje infektivne mononukleoze. Vrlo je važno znati kako se biološki materijal uzima PCR-om i koji su biomaterijali potrebni za otkrivanje željene bolesti. Podatke o tome šta je uključeno u PCR analizu treba razjasniti sa doktorom prije postavljanja dijagnoze.

Proces interpretacije prikazane studije ističe se svojom jednostavnošću.

Rezultati PCR analize mogu se dobiti već sljedećeg jutra, a ovo mogu značiti:

1. Negativan rezultat ukazuje da materijal koji treba dijagnosticirati ne sadrži infektivni agens od interesa.
2. PCR pozitivan znači da je DNK ili RNK patogena prisutna u ljudskom tijelu.

Da bismo razumjeli šta znači PCR analiza, potrebno je kvantificirati mikroorganizme. Ovo je preporučljivo provoditi kod bolesti uzrokovanih oportunističkim mikroorganizmima. Razlog je taj što takvi patogeni pokazuju svoje negativno djelovanje samo kada su u višku.

Kada shvatite šta znači PCR metoda, možemo zaključiti da je ovakva dijagnoza najbolji način da se dobije informacija o prisutnosti određene vrste infekcije.

Jedna od ultrapreciznih modernih medicinskih studija zasnovana na proučavanju molekularno-genetskih odnosa u krvnoj plazmi je PCR analiza (PCR) - lančana reakcija polimeraze. PCR metoda vam omogućava da u tijelu pacijenta otkrijete određene bolesti uzrokovane infekcijama i virusima, ili povezane s genetskim bolestima koje su naslijeđene. PCR analiza pomaže u identifikaciji bolesti koje se javljaju u akutnoj i kroničnoj, asimptomatskoj fazi. Takva studija je vrlo važna za prevenciju razvoja bolesti: otkrivanjem bolesti na samom početku njenog razvoja, moguće je izliječiti bolest sve dok ne počne uništavati tijelo pacijenta ili minimizirati svoje posljedice.

Danas je PCR dijagnostika „zlatni standard“ u određivanju većine zaraznih bolesti. U svakoj klinici ili laboratoriju takva se studija provodi svakodnevno, njeni rezultati čine osnovu mnogih dijagnoza, a u nekim slučajevima upravo je dekodiranje podataka lančane reakcije polimeraze osnova za određivanje određene bolesti.

PCR metoda često pomaže liječnicima u slučajevima kada su druge studije i dijagnostika nemoćne, ili zbog ranog stadijuma razvoja bolesti ne mogu utvrditi prisustvo patogene mikroflore u tijelu pacijenta. Dijagnoza PCR metodom je preciznija analiza od bilo koje druge metode povezane sa proučavanjem prisutnosti bakterija, virusa i imunoloških abnormalnosti u ljudskom tijelu.

Prednosti PCR metode uključuju visoku preciznost - u toku proučavanja dijela DNK ili RNK detektuje 100% ili ne otkriva patogenu mikrofloru koja može uzrokovati ozbiljna bolest. Ova metoda nema lažno pozitivne rezultate - ima visoku specifičnost, što omogućava da se u strukturi DNK i RNK identificira određeni dio lanca koji sadrži specifični uzročnik bolesti. Štaviše, PCR test je toliko osjetljiv da od milijardi ćelija može identificirati jednu zaraženu virusom i precizno identificirati virus i njegov patogen. U poređenju sa drugim poznatim studijama koje imaju osetljivost ne veću od 100-105 ćelija u uzorku uzetom tokom pregleda, PCR dijagnostika vam omogućava da pregledate od 10 do 1000 ćelija.

Ne ispituje se sam serum ili plazma, već deoksiribonukleinske ili ribonukleinske kiseline (DNK i RNA), odnosno genetski materijal onih bakterija i virusa koji su prisutni u tijelu pacijenta i mogu izazvati razvoj bolesti. Svaki virus ima svoju jedinstvenu metodu detekcije, zbog čega su rezultati studije uvijek tačni.

U jednoj studiji može se otkriti jedan do nekoliko štetnih mikroorganizama.

Dijagnoza PCR-a, za razliku od drugih bakterioloških i imunoloških studija, obavlja se vrlo brzo. Ako je potrebno od jednog do deset dana da se provede manje od t, tada se PCR studija izvodi u roku od 5-7 sati.

Vrlo često se PCR bris izvodi kao pretklinička ili retrospektivna studija. Prva metoda je identifikacija potencijalno opasnih patogenih mikroorganizama koji su već započeli svoju destruktivnu aktivnost u tijelu, ali se bolesti još uvijek ne manifestiraju. Druga studija je otkrivanje virusa i infekcija nakon tretmana, kada se prema standardnim testovima pacijent smatra zdravim, nema simptoma bolesti, ali neke stanice mogu i dalje sadržavati opasne patogene. Takve jedinstvene dijagnostičke mogućnosti omogućavaju identifikaciju zaraznih bolesti tokom perioda inkubacije, kada su tek ušle u ljudski organizam, ali nije bilo pogoršanja dobrobiti, kao ni tokom latentnog toka bolesti, ako se pacijent osjeća zdravim. , ali virus je prisutan u tijelu, iako ne daje nikakve naznake da poznajete sebe.

PCR dijagnostika se koristi ne samo za identifikaciju virusa i bakterija, već i za identifikaciju osobe po fragmentima njene DNK, kao i za utvrđivanje krvnog srodstva (očinstvo, majčinstvo itd.).

Tokom proteklih decenija, PCR dijagnostika je, kao i druge grane medicine i nauke, daleko napredovala. Danas je poboljšana oprema koja se koristi u procesu istraživanja biomaterijala, pojavile su se nove vrste polimerazne lančane reakcije, novi testni sistemi koji smanjuju troškove analize i povećavaju njenu točnost. Zahvaljujući tome, PCR analiza je postala dostupnija općoj populaciji, ali i broju ljudi koji rana dijagnoza bolesti pomoću PCR metode spasio je živote - povećao se hiljadama puta.

Šta je u osnovi ove studije

Šta ovu studiju čini tako tačnom? To je amplifikacija, odnosno ponovljeno udvostručavanje dijela lanca deoksiribonukleinskih ili ribonukleinskih kiselina, za što se koriste posebni enzimi i oprema. Uvećanjem dijela DNK ili RNK za nekoliko stotina puta, postaje moguće vizualno ih proučavati.

Ali prije povećanja i proučavanja jednog ili drugog dijela lanca, struktura se podvrgava preliminarnoj studiji na prisutnost područja potencijalno zahvaćenih virusom. Kada se pronađu takve regije, one se podvrgavaju amplifikaciji.

Dijagnostika se provodi na sljedeći način. Prvo se od pacijenta uzima biološka tekućina prisutna u tijelu za analizu. To može biti krv, urin, pljuvačka, suze ili genitalna sluz. Prikupljeni biomaterijal se stavlja direktno u pojačalo, gdje se uvode enzimski reagensi, dizajnirani da se direktno kombinuju sa DNK i RNK dijelovima virusa i infekcija. Čim se reagens i virus vežu, uređaj fiksira ovu oblast i počinje da pravi kopije ovog područja, povećavajući ga nekoliko puta. Takvo kopiranje se odvija kontinuirano, "duž lanca", što omogućava dobijanje nekoliko stotina, a ponekad i hiljada uzoraka za istraživanje.

Sljedeći korak je poređenje rezultirajućih dijagrama sa podacima o virusima i infekcijama dostupnim u bazi podataka. Na taj način se direktno otkrivaju patogeni mikroorganizmi, utvrđuje njihov broj i vrijeme prisutnosti u organizmu (koliko su davno ušli u organizam).

PCR dijagnostika danas omogućava ne samo usporedbu otkrivenih virusa s već poznatim, već i identifikaciju mutacija, kao i sugeriranje do čega te mutacije mogu dovesti.

Naučnici - genetičari široko koriste ovu metodu PCR studije za ukrštanje pojedinačnih delova DNK i proučavanje novih tipova gena i mutacija.

Virusi i infekcije određene lančanom reakcijom polimeraze

Prilikom provođenja PCR-a možete otkriti mnoge bakterije i infekcije koje uzrokuju teške, a ponekad i neizlječive bolesti. Prije svega, radi se o virusu ljudske imunodeficijencije, a u latentnom odn period inkubacije kada njeni efekti još nisu očigledni. Ovo je veoma važno u slučajevima kada drugi testovi na HIV još nisu dali rezultate: u prvih šest meseci nakon moguće infekcije ili kod novorođenčadi rođene od HIV pozitivne majke.

Takođe, PCR studija otkriva hepatitis svih oblika, infektivnu mononukleozu, infekcije citomegalovirusom, herpes, sve infekcije koje se prenose seksualnim kontaktom (ureaplazma, klamidija, mikoplazma, trihomonas, gardnerela i dr.).

Utvrđuju se i uzročnici tuberkuloze, kao i infekcije koje pripadaju onkogenoj klasi, odnosno one koje kasnije mogu uzrokovati rast. malignih tumora(humani papiloma virus). Na lakši, ali ne manje opasne infekcije utvrđene PCR studijama uključuju boreliozu, krpeljni encefalitis, gljivične infekcije(Candida) i Helicobacter pylori.

Svi ovi predstavnici patogene mikroflore mogu uzrokovati opasne bolesti u različitim dijelovima tijela pacijenta, pa se PCR tehnika koristi u gotovo svim industrijama. moderne medicine. Uz njegovu pomoć dijagnosticiraju se ginekološke i urološke bolesti, a termin za PCR studiju može se dobiti od infektologa, pulmologa i ftizijatra. Nije neuobičajena upotreba lančane reakcije polimeraze u oblasti gastroenterologije, hematologije, onkologije itd.

Kako prikupiti biomaterijal za dijagnostiku

Za dijagnostiku, pacijent će morati dati biomaterijal u kojem mogu biti prisutni patogeni predstavnici mikroflore. Kao materijal pogodan za istraživanje, uzimaju se tekućine prisutne u određenom organu.

Dakle, virusi i infekcije, DNK i RNK, koje se mogu otkriti analizom, žive u krvi pacijenta, njegovom urinu i pljuvački, kao i sluzokože iz nosa, genitalija. U više rijetki slučajevi kada je potrebna dubinska dijagnoza nerođenog djeteta, na analizu se uzima plodna voda ili placentno tkivo. Za dijagnosticiranje virusa koji uzrokuju tuberkulozu potreban je sputum, a za otkrivanje virusa koji je uzrokovao papilome (bradavice), struganje s epitela.

Ako je analiza usmjerena na dijagnosticiranje spolno prenosivih infekcija koje se prenose seksualnim kontaktom ili kućnim putem, liječnik uzima bris ili struganje vaginalni iscjedak, sluz iz uretre kod muškaraca i cervikalnog kanala kod žena. Također, u nekim slučajevima mogu biti potrebni ne samo sluzni sekreti genitalnih organa, već i pacijentov urin.

Prilikom dijagnosticiranja herpesa, infektivne mononukleoze, svih vrsta hepatitisa i virusa humane imunodeficijencije bit će potreban krvni serum, kao dodatni biomaterijal može biti: pacijentov urin (sa infekcija citomegalovirusom), kao i bris grla.

Ako je zadatak lančane reakcije polimeraze da dijagnostikuje infekcije koje utiču na rad centralnog i perifernog nervni sistem, za studiju se uzima tečnost kičmene moždine.

Kako se pripremiti za studij

Kako bi rezultati lančane reakcije polimeraze bili što precizniji, a dijagnoza ispravna i odražavala sliku bolesti, potrebno je pažljivo pripremiti se za isporuku biomaterijala na analizu.

Rezultati pregleda u većoj mjeri zavise od profesionalnosti laboratorijskog asistenta, opreme i kvalifikacije doktora koji dešifruje dobijene podatke. Ali mnogo ovisi o pacijentu koji je dobio termin za ovu dijagnozu.

Prvo pravilo koje se mora pridržavati prilikom predaje materijala je potpuna sterilnost i čistoća nastale biološke tekućine. Ako se prilikom uzimanja krvi, likvora ili amnionska tečnost ništa ne zavisi od pacijenta, tada uzimanje urina, sputuma i razmaza treba pažljivo pripremiti. Ukoliko strani mikroorganizmi dođu u ispitni materijal, značajno će utjecati na konačne podatke analize i dovesti do izbora pogrešne taktike liječenja.

I to je ispunjeno ne samo prijemom nepotrebnog lijekovi, ali i pogoršanje rada drugih organa i sistema organizma.

Da bi se izbjegle takve posljedice, pacijent bi trebao izvršiti nekoliko jednostavna pravila koji će vam pomoći da pravilno položite testove.

1. Uzimanje uzoraka svih unutrašnjih tečnosti vrši se striktno na prazan želudac, dozvoljeno je piti samo čistu negaziranu vodu;
2. Prilikom uzimanja brisa sa genitalnih organa zabranjen je svaki seksualni kontakt 24 sata prije uzimanja biomaterijala;
3. Urin i sputum se predaju u posebne sterilne posude koje se izdaju u laboratoriji ili se za tu svrhu kupuju u ljekarni. Prije sakupljanja urina, vanjske genitalije treba dobro oprati sapunom za pranje rublja, prvi dio urina ocijediti, a srednji dio skupiti u posudu.

Ova jednostavna pravila pripreme pomoći će vam da dobijete najtočnije podatke o istraživanju i brže započnete. pravilan tretman. Obično su rezultati studije gotovi u roku od nekoliko sati, ali najčešće u laboratorijama rezultati se izdaju sljedeći dan nakon uzorkovanja biomaterijala. Pacijent u ruke dobiva laboratorijski obrazac koji sadrži lične podatke pacijenta i viruse koji se nalaze u njegovom tijelu.

Kompletan transkript dobijenih rezultata vrši lekar koji je izdao uputstvo za studiju, on takođe utvrđuje konačna dijagnoza. Ponekad se, na osnovu rezultata dijagnoze, može preporučiti provođenje dodatnih testova i pregleda i konsultacija uskih specijalista. Ali najčešće su rezultati lančane reakcije polimeraze osnova za konačnu dijagnozu.