Kumbsa izmēģinājuma nozīmes un definīcijas. Tieša ķemmes pārbaude

- antiglobulīna tests, kura mērķis ir noteikt Rh negatīvās asinīs nepilnīgas antieritrocītu antivielas pret Rh faktoru - specifisku proteīnu, kas atrodas uz Rh pozitīvo asiņu eritrocītu virsmas. Ir divi šī testa veidi: tiešais - antivielu noteikšana uz sarkano asins šūnu virsmas, netiešā - antivielu noteikšana asins serumā. Tiešā pārbaude tiek veikta asins slimību diagnostikā un ārstēšanā: hemolītiskā anēmija, hemolītiskā slimība jaundzimušie un citi. Netiešo testu veic, lai novērtētu donora un recipienta asiņu saderību pārliešanas laikā, kā arī noteiktu Rh konflikta esamību un risku, plānojot un vadot grūtniecību. Materiāls Kumbsa testa veikšanai ir deoksigenētas asinis, pētījums tiek veikts ar metodēm, kuru pamatā ir aglutinācijas reakcija. Parasti abi testi dod negatīvu rezultātu. Analīze tiek veikta vienas dienas laikā.

Kumbsa tests - klīniskais pētījums Rh negatīvas asinis, kuru mērķis ir noteikt antivielas pret Rh faktoru. Testu izmanto, lai noteiktu rēzus konflikta un hemolītisko reakciju attīstības risku. Katram cilvēkam eritrocītu virsma satur noteiktu antigēnu jeb aglutinogēnu kopumu – dažāda rakstura savienojumus, pēc kuru esamības vai neesamības tiek spriests par asinsgrupu un Rh faktoru. Ir daudz veidu antigēnu, medicīnas praksē vislielākā praktiskā nozīme ir aglutinogēniem A un B, kas nosaka asins grupu, un aglutinogēnam D, Rh faktoram. Ar pozitīvu Rh faktoru D antigēni tiek noteikti uz eritrocītu ārējās membrānas, ar negatīvu - nē.

Kumbsa tests, ko sauc arī par antiglobulīna testu, ir vērsts uz nepilnīgu antieritrocītu antivielu noteikšanu pret Rh faktora sistēmu asinīs. Antivielas pret Rh faktoru ir specifiski imūnglobulīni, kas veidojas Rh negatīvās asinīs, kad tajās nonāk eritrocīti ar D aglutinogēniem.Tas var notikt, ja tiek sajauktas augļa un grūtnieces asinis, veicot asins pārliešanu bez iepriekšējas asinsgrupas noteikšanas. Kumbsa tests pastāv divās versijās – tiešajā un netiešajā. Veicot tiešo Kumbsa testu, tiek konstatētas antivielas, kas piestiprinātas sarkano asins šūnu virsmai. Pētījumu izmanto, lai noteiktu hemolītiskās reakcijas cēloni. Netiešā Kumbsa testa mērķis ir noteikt antieritrocītu antivielas asins plazmā. Ir nepieciešams noteikt donora un recipienta vai mātes un augļa asiņu saderību, tas palīdz novērst rēzus konflikta attīstību un tai sekojošo sarkano asins šūnu hemolīzi.

Asinis abiem Kumbsa testa variantiem tiek ņemtas no vēnas. Analīze tiek veikta ar aglutinācijas metodi, izmantojot antiglobulīna serumu. Pētījuma rezultāti tiek izmantoti hematoloģijā hemolītisko reakciju cēloņu noteikšanā, ķirurģijā un reanimācijā asins pārliešanas laikā, dzemdniecībā un ginekoloģijā grūtniecības uzraudzībā sievietēm ar Rh negatīvām asinīm.

Indikācijas

Tiešo Kumbsa testu, kas nosaka sarkano asinsķermenīšu virsmai piesaistītās antivielas, nosaka dažādas izcelsmes hemolītisko reakciju (sarkano asinsķermenīšu iznīcināšanas) gadījumos. Pētījums indicēts primārai autoimūnai hemolītiskajai anēmijai, pēctransfūzijas hemolītiskajai anēmijai, jaundzimušā hemolītiskajai slimībai, autoimūnu, neoplastisku vai infekcijas slimību izraisītai eritrocītu hemolīzei, kā arī zāles piemēram, hinidīns, metildopa, prokainamīds. Netiešo Kumbsa testu, kas nosaka antivielas asins plazmā, izmanto, lai novērstu rēzus konflikta attīstību. Tas ir indicēts pacientiem, kuri gatavojas asins pārliešanai, kā arī grūtniecēm ar negatīvu Rh faktoru, ja bērna topošajam tēvam ir pozitīvs Rh faktors.

Lai noteiktu Rh saderību, Kumbsa tests netiek ievadīts pacientiem ar Rh pozitīvām asinīm. Šajos gadījumos uz sarkano asins šūnu virsmas jau atrodas antigēni, antivielu veidošanos nevar izraisīt asins pārliešana vai augļa asiņu iekļūšana grūtnieces asinsritē. Tāpat pētījums nav indicēts grūtniecēm, ja abiem vecākiem ir negatīvs Rh faktors, iedzimta recesīvā pazīme. Bērnam šādos pāros vienmēr ir Rh-negatīvas asinis, imunoloģisks konflikts ar māti nav iespējams. Hemolītisko patoloģiju gadījumā antiglobulīna testu neizmanto, lai uzraudzītu terapijas panākumus, jo rezultāti neatspoguļo eritrocītu iznīcināšanas procesa aktivitāti.

Kumbsa testa ierobežojums ir izpētes procedūras sarežģītība – lai iegūtu ticamus rezultātus, nepieciešams ievērot temperatūras un laika nosacījumus, reaģentu un biomateriāla sagatavošanas noteikumus. Kumbsa testa priekšrocība ir tā augstā jutība. Hemolītiskās anēmijas gadījumā šī testa rezultāti paliek pozitīvi, pat ja hemoglobīns, bilirubīns un retikulocīti atgriežas normālā stāvoklī.

Sagatavošanās analīzei un materiāla savākšanai

Materiāls Kumbsa testa veikšanai ir venozās asinis. Asins paraugu ņemšanas procedūras laikam un pacienta sagatavošanai nav īpašu prasību. Tāpat kā jebkurā pētījumā, pēc ēšanas ieteicams ieturēt pārtraukumu vismaz 4 stundas un pēdējo 30 minūšu laikā pārtraukt smēķēšanu, fiziskā aktivitāte izvairīties no emocionāla stresa. Ir arī vērts iepriekš apspriest ar savu ārstu nepieciešamību pārtraukt zāļu lietošanu – dažas zāles var izkropļot Kumbsa testa rezultātus. Asinis ar šļirci ņem no kubitālās vēnas, retāk no vēnas plaukstas aizmugurē. Dažu stundu laikā materiāls tiek nogādāts laboratorijā.

Veicot tiešo Kumbsa testu, pacienta asins serumam pievieno antiglobulīna serumu. Pēc kāda laika maisījums tiek pārbaudīts, lai noteiktu aglutinātu klātbūtni - tie veidojas, ja uz sarkanajām asins šūnām ir antivielas. Ar pozitīvu rezultātu tiek noteikts aglutinējošais titrs. Netiešais Kumbsa tests sastāv no vairākiem soļiem. Pirmkārt, serumā esošās antivielas tiek fiksētas uz injicētajiem eritrocītiem inkubācijas laikā. Pēc tam paraugam pievieno antiglobulīna serumu, pēc kāda laika nosaka aglutinātu klātbūtni un titru. Analīzes periods ir 1 diena.

Normāli rezultāti

Parasti tiešā Kumbsa testa rezultāts ir negatīvs (-). Tas nozīmē, ka asinīs nav antivielu, kas saistītas ar sarkanajām asins šūnām, un tās nevar būt hemolīzes cēlonis. Normāls rezultāts netiešais Kumbsa tests arī ir negatīvs (-), tas ir, asins plazmā nav antivielu pret Rh faktoru. Gatavojoties recipienta asins pārliešanai, tas nozīmē saderību ar donora asinīm, uzraugot grūtniecību - mātes Rh sensibilizācijas neesamību, zems risks imunoloģisko konfliktu attīstība. Fizioloģiskie faktori, piemēram, uztura paradumi vai fiziskā aktivitāte, nevar ietekmēt testa rezultātu. Tāpēc, ja rezultāts ir pozitīvs, nepieciešama ārsta konsultācija.

Analīzes diagnostiskā vērtība

Pozitīvu Kumbsa testa rezultātu izsaka kvalitatīvi no (+) līdz (++++) vai kvantitatīvi, titros no 1:16 līdz 1:256. Antivielu koncentrācijas noteikšana eritrocītos un asins serumā tiek veikta abu veidu paraugos. Ar pozitīvu tiešā Kumbsa testa rezultātu uz sarkano asins šūnu ārējās membrānas tiek noteiktas antivielas, kas izraisa šo asins šūnu iznīcināšanu. Cēlonis var būt asins pārliešana bez iepriekšējas mašīnrakstīšanas - hemolītiskā reakcija pēc pārliešanas, kā arī jaundzimušā eritroblastoze, hemolītiska reakcija zāļu lietošanas dēļ, primāra vai sekundāra autoimūna hemolītiskā anēmija. Sekundāro eritrocītu iznīcināšanu var izraisīt sistēmiskā sarkanā vilkēde, Evansa sindroms, Valdenstrema makroglobulinēmija, paroksizmāla aukstā hemoglobinūrija, hroniska limfoleikoze, limfoma, infekciozā mononukleoze, sifiliss, mikoplazmas pneimonija.

Pozitīvs netiešā Kumbsa testa rezultāts norāda uz antivielu klātbūtni plazmā pret Rh faktoru. Praksē tas nozīmē, ka ir notikusi Rh sensibilizācija, pēc donoru asiņu infūzijas grūtniecības laikā ir iespējama Rh konflikta attīstība. Lai novērstu grūtniecības komplikācijas, sievietes ar pozitīvu Kumbsa testa rezultātu tiek ievietotas īpašos ierakstos.

Noviržu no normas ārstēšana

Kumbsa tests attiecas uz izoseroloģiskiem pētījumiem. Tās rezultāti ļauj identificēt hemolītisko reakciju, kā arī noteikt donora un recipienta, mātes un augļa asiņu saderību, lai novērstu rēzus konflikta attīstību. Ja testa rezultāts ir pozitīvs, tad jāmeklē padoms pie ārstējošā ārsta – akušiera-ginekologa, hematologa, ķirurga.

Tiešais Kumbsa tests. Ar šī testa palīdzību tiek pierādīta bērna eritrocītu fiksēto bloķējošo antivielu klātbūtne. Pozitīvs tiešais tests norāda uz sensibilizāciju un ir spēcīga jaundzimušā hemolītiskās slimības pazīme pat pirms citu parādīšanās. klīniskās pazīmes. Izņēmuma kārtā un tikai ļoti smagi gadījumi tiešais Kumbsa tests var būt negatīvs jau sākušās, gandrīz pilnīgas sensibilizēto eritrocītu hemolīzes dēļ.

Tiešo Kumbsa testu veic šādi: mēģenē ievieto 5 pilienus asiņu, kas ņemtas no bērna papēža un pievieno 5 ml fizioloģiskā šķīduma. Labi samaisa un centrifugē 10 minūtes. No eritrocītu nogulsnēm tiek atdalīts dzidrs šķidrums. Pēc tam atkal pievieno 5 ml fizioloģiskā šķīduma, samaisa un centrifugē. Pēc trīs reizes sajaucot ar fizioloģisko šķīdumu, eritrocīti ir labi nomazgāti. Pēc pēdējās supernatanta atdalīšanas eritrocītu nogulsnes 0,1 ml apjomā sajauc ar 0,9 ml fizioloģiskā šķīduma. Uzklājiet 2-3 pilienus šī maisījuma uz stikla priekšmetstikliņa un pievienojiet vienu pilienu Kumbsa seruma. Aglutinācijas klātbūtne norāda, ka reakcija ir pozitīva (pozitīvs tiešais Kumbsa tests). Pētījums jāveic istabas temperatūrā virs 16°C, lai izvairītos no aukstu aglutinīnu iedarbības.

Netiešais Kumbsa tests kalpo par pierādījumu brīvo antivielu klātbūtnei mātes serumā un tiek veikta ar mātes serumu.

Hemolītiskā slimība jaundzimušajam ar Rh nesaderību parasti izpaužas pēc otrās grūtniecības. Pirmais bērniņš piedzimst vesels, otrais ar vieglas anēmijas pazīmēm, un tikai pēc trešās grūtniecības piedzimst bērni ar skaidras pazīmes hemolītiskā slimība. Tikai iepriekš sensibilizētām sievietēm pirmās grūtniecības laikā bērns var piedzimt ar hemolītiskās slimības simptomiem. Dažos gadījumos imunizācija izraisa abortus un nedzīvi dzimušus bērnus. Slimības sākumam un smagumam ir svarīgs placentas stāvoklis un mātes aglutinīna iedarbības ilgums uz augli. Ar aglutinīnu parādīšanos 10-14 nedēļas pirms dzimšanas bērnam parasti ir subklīniskas formas. Aglutinīnu agrīna parādīšanās, 15-26 nedēļas pirms piegādes, izraisa smagas slimības formas. Visās slimības formās galvenais process ir hemolīze. Antigēna-antivielu reakcijas sekas ir hemolīze, aknu un smadzeņu kapilāru bojājumi. Atkarībā no tā, kurš bojājums dominē, ir arī dažādas formas slimības. Bīstamas ir arī dažas anafilaktiskas parādības. Tie izraisa histamīnam līdzīgu vielu veidošanos, kas izraisa nopietnus aknu šūnu bojājumus un jo īpaši bazālo kodolu gangliju šūnas, amonja ragu, iegarenās smadzenes un pat smadzeņu garozu. Ar aknu šūnu bojājumiem aknu dzelte tiek pievienota ekstrahepatālajai dzeltei. Bērni mirst ar smagiem kodoldzeltes simptomiem. Ja viņi izdzīvo, bojājumu simptomi saglabājas. nervu sistēma(ekstrapiramidālās sistēmas pārkāpumi ar horeoātiskām kustībām, sava veida dejojoša gaita, piespiedu galvas kustības, dažreiz patvaļīgu kustību koordinācijas traucējumi ar biežiem kritieniem, paaugstināts tonis muskuļi, garīga atpalicība, t.i., ar pazīmēm t.s. encephalopathia posticteria infantum).

Antiglobulīna testu, kas paredzēts nepilnīgu antieritrocītu antivielu noteikšanai, ierosināja Kumbss, Morants, Reiss 1945. gadā, un vēlāk to sauca par Kumbsa testu. Šīs metodes būtība ir tāda, ka antiglobulīnu serums, kas satur cilvēka imūnglobulīnu antivielas, reaģējot ar eritrocītiem, kas sensibilizēti ar nepilnīgām antivielām, izraisa to aglutināciju.

Atkarībā no tā, vai antivielas ir fiksētas uz sarkano asins šūnu virsmas vai ir brīvas asins plazmā, tiek izmantots tiešs vai netiešs Kumbsa tests.

Tiešo Kumbsa testu veic gadījumos, kad ir pamats uzskatīt, ka pētāmās sarkanās asins šūnas jau ir in vivo ir sensibilizēti ar atbilstošām antivielām, t.i. pirmā reakcijas fāze - antivielu fiksācija uz eritrocītu virsmas - notika organismā un sekojošā antiglobulīna seruma pievienošana izraisa sensibilizēto šūnu aglutināciju.

Izmantojot netiešo Kumbsa testu, tiek noteiktas nepilnīgas antivielas, kas atrodas testa serumā. Šajā gadījumā reakcija notiek divos posmos. Pirmais posms ir testa eritrocītu inkubācija ar testa serumu, kuras laikā uz eritrocītu virsmas tiek fiksētas testa seruma paraugā esošās antivielas. Otrais posms ir antiglobulīna seruma pievienošana.

Līdz šim Kumbsa tests ir plaši izmantots laboratorijas praksē imūnpatoloģisku stāvokļu diagnosticēšanai, jo īpaši autoimūnu hemolītisko anēmiju gadījumā, ko raksturo eritrocītu iznīcināšana, jo šūnu membrāna saistās ar antivielām un (vai) komponentiem. komplementa sistēma. Ar tās palīdzību tiek konstatēta Ig G (parasti Ig G1 un Ig G3) klātbūtne uz eritrocītu membrānas, kas var aktivizēt komplementu un dažreiz arī komplementu (C3d). Tomēr akūtā slimības periodā eritrocītu iznīcināšanas dēļ, uz kuriem liels skaits antivielas, ar hemolītisko krīzi, kā arī ar nepietiekamu antivielu daudzumu hroniskā slimības gaitā, var konstatēt negatīvu tiešo Kumbsa testu.

Jāuzsver, ka paliek netiešais Kumbsa tests labākā metode individuāla transfūzijas līdzekļa atlase, jo tā ļauj visprecīzāk noteikt donora un saņēmēja individuālo saderību ar eritrocītu antigēniem.

Visu orgānu un audu recipientu izmeklēšanā pirmstransplantācijas periodā un asinsrades cilmes šūnu recipientiem arī pēc transplantācijas ieteicams veikt papildus tiešo antiglobulīna testu autoantivielu klātbūtnei.

Papildus imūnhematoloģijai un transfuzioloģijai antiglobulīna testus plaši izmanto vairāku patoloģisku stāvokļu diagnostikā: hematoloģisku slimību, tostarp limfoproliferatīvo, sistēmiskas slimības saistaudi, Šegrena slimība, hronisks aktīvs hepatīts u.c.

Kumbsa testi tiek aktīvi izmantoti medicīnas ģenētikā un tiesu medicīnā, lai noteiktu virsmas eritrocītu antigēnus.

Kumbsa tests ir diezgan laikietilpīga izpētes metode, kuras ieviešanā nepieciešama īpaša piesardzība. Lietojot to, rodas dažas grūtības, jo īpaši ar vāji pozitīvu reakciju interpretāciju. Ir zināms, ka viltus vājas pozitīvas vai negatīvas reakcijas, veicot Kumbsa testus, var būt nepietiekami efektīvas eritrocītu mazgāšanas, antiglobulīna reaģenta neitralizēšanas ar seruma pēdām un saskares ar neattaukotu virsmu, uz kuras var fiksēt antiglobulīnu, rezultāts. zaudē savu aktivitāti. Vēl viens Kumbsa testa trūkums ir antiglobulīna reaģenta nestabilitāte, kura sagatavošanai un uzglabāšanai ir noteiktas iezīmes, kas arī apgrūtina hemaglutinācijas reakcijas kvantitatīvo noteikšanu ar antiglobulīna serumu.

Turklāt pētījumi, ko veica A. Holburn, D. Voak et al. , parādīja, ka pārmērīga kratīšana eritrocītu suspensijas atkārtotas suspensijas laikā var izraisīt kļūdaini negatīvus rezultātus. Kļūdaini rezultāti, veicot antiglobulīna testus, var būt saistīti arī ar anti-komplementāru antivielu piejaukumu antiglobulīna reaģentā, jo īpaši C3d, C3c, C4c un C4d komplementa komponentiem, kas inkubācijas laikā adsorbējas uz testa eritrocītu virsmas un rada. pozitīva rezultāta parādīšanās.

Šos trūkumus var viegli novērst, rūpīgi mazgājot testa paraugus un kontrolējot reakcijas apstākļus.

Pēdējā desmitgadē zemas jonu stipruma izotoniskais sāls šķīdums (LISS) ir izmantots, lai samazinātu netiešā Kumbsa testa laiku un jutīgumu.

Antiglobulīna testu neapstrīdama priekšrocība, pēc vairāku autoru domām, ir to augstā jutība, kas ievērojami pārsniedz izšķirtspēju. alternatīvas metodes testi, ko izmanto, lai noteiktu neaglutinējošas antivielas.

Mēs salīdzinājām asins serumu izpētes metožu izšķirtspēju nepilnīgu antivielu klātbūtnei, izmantojot poliglucīnu, želatīnu un antiglobulīna serumu. Pētījuma gaitā 140 izoimūno donoru asins seruma paraugos tika kontrolēti nepilnīgo anti-D antivielu titri, izmantojot želatīna, poliglucīna un netiešos antiglobulīna testus. Šo metožu izklāsts tika veikts saskaņā ar vispārpieņemtām metodēm.

Tika konstatēts, ka pēc to izšķirtspējas metodes eritrocītu sensibilizācijas noteikšanai ar anti-D antivielām ir sakārtotas šādi: visjutīgākais ir netiešais Kumbsa tests, pēc tam želatīna tests, bet vismazāk informatīvais ir poliglucīna tests. Šajā eksperimentu sērijā iegūtie rezultāti pilnībā atbilst literatūras datiem, kas ļauj secināt, ka Kumbsa testu jutība ir pietiekami augsta, kas ļauj ar augstu noteiktības pakāpi identificēt antieritrocītu antivielu klātbūtni. organismā, kas neizraisa sarkano asins šūnu aglutināciju.

Tomēr Kumbsa testu praksē ir gadījumi, kad nepilnīgas antivielas netiek atklātas, lai gan slimības klīniskā aina vai iepriekšējā imunizācija liecina par to iespējamu klātbūtni. Šādos gadījumos var pieņemt, ka antivielu daudzums nav pietiekams, lai tās izgulsnētu antiglobulīna seruma antivielas.

Šo secinājumu apstiprināja mūsu pašu eksperiments, kurā, izmantojot šūnu analītiskās mikroelektroforēzes metodi, tika konstatēta anti-D antivielu klātbūtne uz testa eritrocītiem, kuras netika atklātas netiešajā Kumbsa testā. Šajā eksperimentu sērijā antiglobulīna serums tika pievienots eritrocītiem, kas iepriekš tika inkubēti ar serumiem, kas iegūti no imunizētu donoru asinīm, antivielu ģenēzes periodā, atrodoties ceļā, t.i. periodā, kad zināmās metodes, tostarp Kumbsa tests, tajās nekonstatēja antivielas.

Veiktajos pētījumos statistiski pierādīja nepilnīgu antivielu klātbūtni uz eritrocītu virsmas. būtiskas izmaiņas sensibilizēto sarkano asins šūnu elektroforētiskās mobilitātes vērtības pēc antiglobulīna seruma pievienošanas. Jāatzīmē, ka pēc tam netiešajā Kumbsa testā visu imunizēto donoru asins serumā tika konstatētas anti-D antivielas.

Gillerand et al. arī parādīja, ka antiglobulīna testiem ir raksturīgs noteikts jutības slieksnis: pozitīvs rezultāts tiek atzīmēts tikai tad, ja uz viena eritrocīta virsmas ir fiksētas vismaz 500 Ig G molekulas.

Turklāt literatūrā ir pierādījumi, ka iespējamais negatīvais Kumbsa rezultāts var būt saistīts ar sarkano asins šūnu sensibilizējošo antivielu zemo afinitāti, kā rezultātā tās mazgāšanas laikā viegli eluējas no sarkano asins šūnu virsmas.

Ņemot vērā iepriekš minēto, var secināt, ka dažos gadījumos negatīvs Kumbsa testa rezultāts vēl nav pierādījums tam, ka uz eritrocītu virsmas nav fiksētas antivielas.

Ir zināms, ka Kumbsa reakcijas ir ļoti specifiskas un ļauj noteikt lielāko daļu nepilnīgo antivielu. Tomēr, kā liecina daži eksperimentālie dati, antiglobulīna testi var būt pozitīvi arī neimunoloģiskos apstākļos. E. Muirhead et al. otrajā dienā pēc fenilhidrazīna ievadīšanas suņiem tika novērots pozitīvs Kumbsa tests. Tik strauja pozitīvas reakcijas parādīšanās liecina par tās imunoloģisko raksturu un drīzāk ir saistīta ar nespecifisku proteīna adsorbciju uz eritrocītu virsmas.

M. Viljamss u.c. atklāja, ka klavulānskābe var izraisīt arī pozitīvu reakciju, kas, pēc autoru domām, ir saistīta ar nespecifisku plazmas olbaltumvielu adsorbciju uz eritrocītu virsmas. Līdzīgs efekts tika novērots arī ārstēšanā ar cefalosporīna antibiotikām.

Iepriekš minēto pētījumu autori uzsver Kumbsa testu pozitīvo rezultātu neimunoloģisko raksturu un uzstāj, ka šīs vielas spēj izraisīt sarkano asins šūnu membrānu modifikācijas, kā rezultātā eritrocīti var adsorbēt olbaltumvielas (jo īpaši, albumīns), kas parasti atrodas asins plazmā un kuriem nepiemīt antivielu īpašības. Turklāt ir iespējams, ka tieši uz šūnas virsmas adsorbēts ksenobiotisks līdzeklis kalpo kā saikne starp šūnas membrānu un plazmas olbaltumvielām.

Lai pareizi interpretētu antiglobulīna testu rezultātus, jāņem vērā arī jauno un nobriedušo eritrocītu kvantitatīva attiecība perifērajās asinīs. Tika konstatēts, ka retikulocīti, kas izolēti no organisma pastiprinātas eritrona reģenerācijas periodā, var tikt aglutinēti ar antiglobulīna serumu.

Pozitīvs tiešā antiglobulīna testa rezultāts To lieto arī dažādos patoloģiskos stāvokļos, ko pavada traucējumi imūnsistēma, iekaisuma procesi izraisot dažādas specifiskuma antivielu nespecifisku adsorbciju uz eritrocītu membrānām. Tas liecina, ka Ig G molekulas nesadarbojas ar specifiski antigēni eritrocīti, bet tikai fiksēti uz pētāmo šūnu virsmas.

Jāpatur prātā, ka, nosakot Kumbsa testu slimību gadījumos, kam raksturīga disproteinēmijas attīstība vai paraproteīnu parādīšanās, pozitīvs rezultāts ir saistīts ar to, ka uz eritrocītu virsmas ir proteīni, kuriem nav antivielas, kas liecina arī par antiglobulīna testu nepietiekamu specifiskumu attiecībā uz ar to palīdzību konstatētā proteīna raksturu.

Tādējādi, kā liecina daudzi pētījumi, tiešo un netiešo antiglobulīna testu pozitīvie rezultāti nav absolūts pierādījums antivielu klātbūtnei, jo pozitīvas reakcijas var novērot arī dažādos patoloģiskos apstākļos, kas nav saistīti ar ķermeņa izosensibilizāciju vai autosensibilizāciju. Tāpēc tikai vairāku imūnseroloģisko metožu rezultātu salīdzinājums ar klīniskā aina slimība ļauj pilnībā spriest par jaunattīstības patoloģisko procesu.

Pozitīvs netiešais antiglobulīna tests ar negatīvu tiešo testu parasti norāda uz brīvu alloantivielu klātbūtni testa serumā, kas saistīts ar iepriekšējām asins pārliešanām vai grūtniecību.

Kumbsa tests bieži ir pozitīvs paroksizmālas nakts hemoglobinūrijas saasināšanās laikā; pozitīvs Kumbsa tests ar anti-C3 un anti-C3dg ir aukstās aglutinīna slimības marķieris.

Gadījumos, kad ir augsts jaundzimušā hemolītiskās slimības attīstības risks, liela nozīme diagnozei (visbiežāk grūtniecības laikā) un, ja nepieciešams, dinamiskai antivielu titra izskata un izmaiņu uzraudzībai, ir tiešo un netiešo antiglobulīna testu rezultāti. Visbiežāk jaundzimušā hemolītiskā slimība ir saistīta ar mātes un augļa nesaderību D antigēnam, retāk AB0 sistēmas antigēniem un vēl retāk citiem antigēniem (C, c, K utt.). Iegūtās antivielas la, kas, kā likums, ir nepilnīgas Ig G klases antivielas, ir skaidri noteiktas netiešā antiglobulīna testā. Šajā slimībā liela nozīme ir pareizi noteiktam titram un atklāto antivielu specifiskumam, jo ​​pastāv zināma korelācija starp antieritrocītu antivielu līmeni grūtnieces asinīs un iespējamo hemolītiskās slimības smaguma prognozi.

Ir nepieciešams arī netiešais Kumbsa tests klīniskā prakse lai nodrošinātu drošu transfūzijas terapiju. Tās īstenošana ir obligāta donoru un dažādu kategoriju recipientu imūnhematoloģisko pētījumu, kā arī visu ārstniecības iestāžu pacientu kārtējās apskates, kurām var būt nepieciešama asins un to sastāvdaļu pārliešana, sastāvdaļa.

Netiešo antiglobulīna testu izmanto šādos gadījumos:

Precīzākai Rh piederības noteikšanai (antigēns D) ar neskaidriem Rh faktora noteikšanas rezultātiem ar citām metodēm (poliglucīns, želatīns utt.);

Lai noteiktu vājus eritrocītu antigēnus (Kell, Duffy, Kidd, Lewis u.c. sistēmas) un antivielas pret šiem antigēniem;

Alloimūno antieritrocītu antivielu, tostarp antivielu, kas izraisa hemolītiskas pēctransfūzijas reakcijas, noteikšanai un identificēšanai;

Noteikt AB0 sistēmas imūno antivielu klātbūtni transfūzijas hemolītisko komplikāciju gadījumā;

Kā saderības tests pārlieto asiņu un to sastāvdaļu individuālai atlasei.

Tādējādi Kumbsa tests ir svarīgs diagnostikas tests, ko izmanto dažādās medicīnas jomās (hematoloģijā, dzemdniecībā, reimatoloģijā, transfuzioloģijā, klīniskajā un laboratoriskajā diagnostikā utt.). Zināšanas par Kumbsa testa īpašībām palīdzēs palielināt rezultātu ticamību un veicinās pareizu laboratorijas datu interpretāciju.

Literatūra

1. Antivielas. Metodes / red. D. Ketija. - M.: Mir, 1991.

2. Bayramalibeyli I.E., Rahimovs A.A., Gadžijevs A.B.. // Anēmijas transfūzijas terapija: mācību grāmata. rokasgrāmata ārstiem. - M .: Prakt. medicīna, 2005. - S. 105-106.

3. Volkova O.Ya., Fregatova L.M., Ļevčenko L.B.// Transfuzioloģija. - 2006. - Nr.2. - S. 39-62.

4. Donskovs S.I.// Rēzus sistēmas asinsgrupas: teorija un prakse. - M.: VINITI RAN, 2005. - S. 180-186, 195.

5.Imunoseroloģija (normatīvie dokumenti) / sast. A.G. Bašlejs, S.I. Donskovs. — M.: VINITI RAN, 1998. gads.

6.Asins sistēmas pētījumi klīniskajā praksē / red. G.I. Kozintsa, V.A. Makarovs. — M.: Triāda-X, 1997. gads.

7. Levins V.I. Par eritrodiēzes un eritropoēzes mehānismu akūtas posthemorāģiskās anēmijas periodā: Ph.D. dis. …kande. medus. Zinātnes. - Minska, 1968. gads.

8. Rahimovs A.A., Bairamalibeyli I.E.. // Anēmijas diagnostikas, profilakses un ārstēšanas pamati. - M .: Krievijas Federācijas Veselības ministrijas GOU VUNMTs, 2002. - S. 204-209.

9. Čumakova E.D.. // Reālas problēmas hematoloģija un transfuzioloģija: Baltkrievijas Republikas VI hematologu un transfuziologu kongresa materiāli, Minska, 2007. gada 24.-25. maijs / red. A.I. Svirnovskis, M.P. Potapņevs. - Minska: Republikāņu hematoloģijas un transfuzioloģijas zinātniskais un praktiskais centrs, 2007. - 50. lpp.

10. Coombs R., Mourant A., Race R. // Lancete. - 1945. - Sēj. 2. - 15. lpp.

11. Frīdmens Dž. // Dž.Klins. Pathol. - 1979. - Sēj. 32. - P. 1014-1018.

12. Holburns A.M. kvalitātes kontrole. Metodes hematoloģijā / red. I. Kavils. - Edinburga: Čērčils Livingstons, 1982. - Vol. 4. - P. 34-50.

13. Khans S.// CMAJ. - 2006. - Sēj. 175, Nr. 8. - 919. lpp.

14. Komatsu F.// Nipons Rinšo. - 2005. - Sēj. 63 (7. papildinājums). - 719.-721. lpp.

15. Komatsu F.// Nipons Rinšo. - 2005. - Sēj. 63 (7. papildinājums). - P. 716-718.

16. Molthan L., Reidenberg M.M., Eihman M.F.// Jaunā angļu valoda. J. Med. — 1976. gads. — Vol. 277. - 123.-125.lpp.

17. Muirhead E.E., GrovesM., Braiens S. // J. Lab. Clin. Med. — 1954. gads. — Vol. 44. - P. 902-903.

18. Rosse W.F.//Hosp. Prac. - 1995. - N 105.

19. Voaks D., Daunijs D., Mūrsb. un citi. //Biotests Bull. - 1986. - Sēj. 1. - P. 41-52.

20. Voaks D., Haigs T., Daunijs D. un citi. Šūnu mazgāšanas mašīnas antiglobulīna testiem. Atkārtota pārbaude — jauna metode, kas parāda vienas plaši izmantotas iekārtas — Sorvall CW1-AF2 — neefektivitāti: ziņojums DHSS tehniskajai nodaļai, 1991. gada februāris.

21. Viljamss M.E., Tomass D., Hārmens C.P. un citi. //Pretmikrobu līdzekļi un ķīmijterapija. -1985. - 125.-127. lpp.

22. Zarandona J.M., Yazer M.H. // CMAJ. - 2006. - Sēj. 174, Nr.3. - P. 305-307.

Medicīnas ziņas. - 2008. - Nr.3. - S. 33-36.

Uzmanību! Raksts ir adresēts medicīnas speciālistiem. Šī raksta vai tā fragmentu pārpublicēšana internetā bez hipersaites uz oriģinālo avotu tiek uzskatīta par autortiesību pārkāpumu.

Kumbsa tests- analīze, lai noteiktu virsmai pievienotās vai plazmā izšķīdušās antivielas. Ar tās palīdzību tiek noteikta imunizācija un antivielas pret sarkanajām asins šūnām. Otrais nosaukums ir antiglobulīna tests. Tas notiek tieši un netieši.

Plkst tiešais antiglobulīna tests nosaka uz eritrocītu virsmas fiksētās antivielas. To veic ar aizdomām par citām autoimūnām slimībām, pēc medikamentu (metildopa, penicilīna, hinīna) lietošanas un.

Eritrocīti ir sensibilizēti in vivo – tiem jau ir stingri piestiprinātas antivielas, un antiglobulīna seruma (anti-IgG) pievienošana izraisa sensibilizēto šūnu salipšanu, kas ir redzama ar neapbruņotu aci.

Netiešais Kumbsa tests nosaka antieritrocītu antivielas asins plazmā, to veic pirms asins pārliešanas un laikā.

Antieritrocītu antivielas – autoantivielu veids, t.i. antivielas pret saviem audiem. Autoantiviela rodas, ja imūnsistēma neparasti reaģē uz noteiktām zālēm, piemēram, lielām penicilīna devām.

Eritrocīti uz to virsmas satur dažādas ķīmiskas struktūras (glikolipīdus, saharīdus, glikoproteīnus un olbaltumvielas), ko medicīnā sauc par antigēniem. Cilvēks manto no saviem vecākiem noteiktu antigēnu karti uz katras sarkanās asins šūnas.

Antigēni tiek apvienoti grupās un blakus tam asinis tiek sadalītas vairākās grupās - pēc AB0 sistēmas, Rh, Kell, Lewis, Kidd, Duffy. Slavenākie un nozīmīgākie ārsta darbā ir AB0 un Rh faktors (Rh).

AB0 sistēma

Cilvēka Rh piederību nosaka šo antigēnu klātbūtne. Īpaši svarīgs eritrocītu antigēns ir antigēns D. Ja tas ir klāt, tad viņi runā par Rh pozitīvas asinis RhD, un ja tā nav - par Rh negatīvs Rhd.

Ja atbilstošā antiviela pievienojas eritrocītu antigēniem, tad eritrocīts tiek iznīcināts – būs hemolīze.

Indikācijas

Galvenā indikācija par tiešā veidāantiglobulīna tests- Aizdomas par hemolītisko anēmiju. Visbiežāk to veic ar primāru autoimūnu hemolītisko anēmiju, hemolīzi ar reimatisko, audzēju, infekcijas slimības zāļu izraisīta hemolīze.

Ja anēmija parādās dažas dienas vai mēnešus pēc asins pārliešanas vai ar ilgstošu dzelti jaundzimušajam, tiek veikts arī tiešs Kumbsa tests.

Netiešsveikts antiglobulīna tests pirms asins pārliešanas un Rh negatīvas sievietes grūtniecības laikā.

Autoimūna hemolītiskā anēmija

Autoimūna hemolītiskā anēmija (primārā) ir klasiska autoimūna slimība ar nezināmiem cēloņiem. Tiek traucēta mijiedarbība imūnsistēmā, kā rezultātā tiek uztverti savi eritrocīti kā sveši. Limfmezglos tiek sintezētas IgG klases (reaģē pie t 37 ° C) un/vai IgM (pie t 40 ° C) antivielas, kuras, pievienojoties eritrocīta virsmai, sāk darboties virkne enzīmu ( komplementa sistēma) un "perforēt" eritrocītu sieniņu, kas noved pie tā iznīcināšanas - hemolīzes.

Pirmie simptomi rodas gan sarkano asins šūnu iznīcināšanas, gan hemoglobīna līmeņa pazemināšanās dēļ. Starp viņiem:

• nogurums, vispārējs vājums, aizkaitināmība
• aizdusa
• sāpes vēderā un krūtīs, slikta dūša
• tumša urīna krāsa
• muguras sāpes
• ādas un gļotādu ikterisks krāsojums
• eritrocītu skaita samazināšanās un

pozitīvs tiešais rezultāts Kumbsa tests 100% apstiprina autoimūnas hemolītiskās anēmijas diagnozi, pierādot tās autoimūno izcelsmi. Tajā pašā laikā negatīvs rezultāts neļauj noņemt diagnozi.

Sekundārā hemolītiskā anēmija

Sekundārā autoimūna hemolītiskā anēmija un pozitīvs Kumbsa tests var būt ar šādām slimībām:

• Evansa sindroms
• pneimonijas infekcija

Pozitīvs antiglobulīna tests šo slimību gadījumā ir viens no simptomiem, nevis diagnostikas kritērijs.

Jaundzimušā hemolītiskā slimība

Cēlonis jaundzimušā hemolītiskā slimība asinsgrupas nesaderība mātei un auglim, vairumā gadījumu pēc Rh sistēmas, atsevišķos gadījumos - pēc AB0 sistēmas, kazuistiski - pēc citiem antigēniem.

Rh-konflikts attīstās, ja Rh-negatīvai sievietei auglis ir mantojis Rh-pozitīvas asinis no viņas tēva.

Jaundzimušā slimība attīstās tikai tad, ja mātei jau ir izveidojušās antivielas pret attiecīgajiem antigēniem, kas notiek pēc iepriekšējām grūtniecībām, abortiem, nesaderīgu asiņu pārliešanas. Lielākā daļa kopīgs cēlonis antivielu sintēzes uzsākšana pret eritrocītu membrānas antigēniem - dzemdības (augļa un mātes asiņošana). Pirmās dzemdības parasti paiet bez komplikācijām, bet turpmākās dzemdības ir pilnas ar jaundzimušā hemolītisko slimību pirmajās dienās pēc piedzimšanas.

Jaundzimušā hemolītiskās slimības simptomi:

• ādas dzeltenums
• , un gļotādas
• aknu un liesas palielināšanās
• elpošanas traucējumi
• visa ķermeņa pietūkums
• centrālās nervu sistēmas uzbudinājums un pakāpeniska nomākšana

Anēmija pēc asins pārliešanas

Netiešais Kumbsa tests veic pirms asins pārliešanas, lai novērtētu saderību, un tiešo Kumbsa testu – pēc tā, ja ir aizdomas par pēctransfūzijas hemolīzi, t.i. ja Jums ir tādi simptomi kā drudzis, laistīšana (lasiet tālāk). Testa mērķis ir noteikt antivielas pret pārlietiem eritrocītiem, kas ir saistījušies ar recipienta eritrocītiem un ir cēlonis pēctransfūzijas hemolīzei, kā arī priekšlaicīgai donoru eritrocītu izņemšanai no recipienta (uztvērēja) asinsrites.

Simptomi:

• ķermeņa temperatūras paaugstināšanās
• izsitumi uz ādas
• muguras sāpes
• sarkans
• slikta dūša
• reibonis

Atšifrēšana

Ir vērts atgādināt, ka tiešo un netiešo antiglobulīna testu dekodēšanas pamatnoteikumi ir vienādi. Atšķiras tikai antivielu atrašanās vieta – asinīs vai jau uz eritrocīta.

• Ja tiešais Kumbsa tests ir negatīvs- tas nozīmē, ka antiviela “nesēž” uz eritrocītiem un simptomu cēlonis ir jāmeklē tālāk un jāveic netiešais paraugs Kumbsa
• ja tiek konstatēts pozitīvs Kumbsa testa rezultāts pēc asins pārliešanas, infekcijām, medikamentiem - pozitivitāte saglabājas līdz 3 mēnešiem (eritrocītu dzīves ilgums 120 dienas - 3 mēneši)
• pozitīvs antiglobulīna testa rezultāts autoimūna slimība ilgst mēnešus un pat gadus

Norm

• tiešais Kumbsa tests - negatīvs
• netiešais Kumbsa tests - negatīvs

Kvalitatīvi pozitīvs rezultāts mērāms plusu skaitā no viena līdz četriem (+, ++, +++, ++++), un kvantitatīvi digitālā formā - 1:16, 1:256 utt.

Jā. Tas, ka saņēmāt asins pārliešanu, ir jāzina ārstam, jo ​​tas tagad ietekmē pareizu testa rezultātu interpretāciju. Saņemot kāda cita (lai gan daudzkārt pārbaudītas asinis), vienmēr pastāv iespēja, ka jūsu organismā tiks izstrādātas antivielas pret pārlietajām asinīm. Tieši šīs antivielas negatīvi ietekmēs veselību. Ar turpmāko asins pārliešanu ārstam jāzina, ka esat jau saņēmis pārliešanu, kas nozīmē, ka ir bijis laiks antivielu sintēzei. Grūtniecēm šī informācija ir vēl svarīgāka.

3. Ja ir Rh faktora neatbilstība starp māti un bērnu, vai visi bērni būs slimi?

Atkarīgs no tā, vai bērnam ir Rh pozitīvs vai negatīvs (RhD). I, II, III un IV asinsgrupas nesēji var būt gan Rh pozitīvi, gan negatīvi. Situācijā, kad mātei ir Rh negatīvs un bērnam ir Rh pozitīvs, antivielas tiks ražotas jau ar pirmo grūtniecību, bet tikai pēc pirmajām dzemdībām (vai grūtniecības pārtraukšanas) notiks tiešs kontakts starp bērna asinīm. māte un bērns. Antivielu hemolītiskā efekta īstenošana būs tikai otrajā un turpmākajās dzemdībās, kas jaundzimušajam novedīs pie hemolītiskās slimības.

Katra sieviete ar negatīvu Rh faktoru rūpīgi jāpārbauda grūtniecības laikā un pēc dzemdībām, profilaktiska ārstēšana lai novērstu antivielu parādīšanos un turpmākas komplikācijas.

4. Vai grūtniecības laikā pirms Kumbsa testa veikšanas ir jāzina vīra asinsgrupa?

Nepieciešams ne tikai zināt, bet arī pārbaudīt bērna bioloģiskā tēva asinsgrupu grūtniecības laikā.

Dati

• pirmo reizi tika ierosināts Kembridžā 1945
• jutības slieksnis - vismaz 300 fiksētas antivielu molekulas uz viena eritrocīta
• antivielu skaits, kas izraisa hemolīzi - katram cilvēkam individuāli (no 16-30 līdz 300)
• citu hemolītiskās anēmijas laboratorisko rādītāju (hemoglobīna, bilirubīna, retikulocītu) dinamika var normalizēties, un Kumbsa tests paliks tajā pašā līmenī

Kumbsa testu pēdējo reizi modificēja: 2018. gada 16. martā Marija Bodjana

Uz šķīvja vai stikla priekšmetstikliņa uzklāj ar pipetēm (dažādi!) 1 lielu pilienu O (I), A (II), B (III) seruma. Pamanot laiku, ar tīru stikla stienīti vai tīru stikla priekšmetstikliņa leņķi seruma pilieni tiek apvienoti ar asins pilieniem. Noteikšana ilgst 5 minūtes, kratot plāksni, tad katram pilienu maisījumam pievieno 1 pilienu sāls šķīduma un novērtē rezultātus. Labāk, ja serumam ir 2 dažādas sērijas. Asins grupu rezultātiem ir jāsakrīt abās seruma sērijās.

Izohemaglutinācijas rezultātu novērtējums:

izohemaglutinācija. Ar pozitīvu reakciju maisījumā parādās sīki sarkani sarkano asinsķermenīšu graudiņi. Graudi saplūst lielākos graudos, bet pēdējie pārslās. Serums ir gandrīz mainījis krāsu;

ar negatīvu reakciju maisījums 5 minūtes paliek vienmērīgi rozā krāsā un graudi netiek atklāti;

strādājot ar 3 O(I), A(II), B(III) grupu serumiem, iespējamas 4 reakciju kombinācijas:

1. ja visi 3 serumi sniedza negatīvu reakciju, tas ir, maisījums ir vienmērīgi rozā krāsā - tā ir O (I) asinsgrupa;

   ja tikai A (II) grupas serums sniedza negatīvu reakciju, bet serums O (I) un B (III) - pozitīvu reakciju, tas ir, parādījās graudi - tā ir A (II) asins grupa;

   B(II) grupas serums deva negatīvu reakciju, bet O(I) un A(II) grupas serums deva pozitīvu reakciju - tā ir B(III) asins grupa.

visi 3 serumi deva pozitīvas reakcijas - pārbaudītās AB (IV) grupas asinis. Šajā gadījumā tiek veikts pētījums ar AB (IV) grupas serumu.

Piezīme! Pētīto asiņu pilieniem jābūt 5-10 reizes mazākiem par seruma pilieniem.

Izohemaglutinācijas kļūdas.

Neaglutinācija tur, kur tai vajadzētu būt, un aglutinācija tur, kur tai nevajadzētu būt. Tas var būt saistīts ar zemu seruma titru un sliktu eritrocītu aglutināciju.

Aglutinācijas klātbūtne tur, kur tai nevajadzētu būt- tā ir pseidoaglutinācija, kad eritrocītu kaudzes veido "monētu kolonnas". Šūpojot šķīvi vai pievienojot fizioloģisko šķīdumu, tie tiek iznīcināti.

Panaglutinācija, kad serums salīmē kopā visas sarkanās asins šūnas, ieskaitot savu asins grupu. Līdz 5. minūtei aglutinācijas pazīmes pazūd.

Ir arī tā sauktā aukstā panaglutinācija, kad eritrocīti salīp kopā zemās gaisa temperatūras (zem 15°C) dēļ telpā.

Visos šajos gadījumos tiek veikta vai nu atkārtota reakcija, vai arī saskaņā ar standarta eritrocītiem.

Asins Rh piederības noteikšana

Lai noteiktu Rh piederību, t.i., lai noteiktu Rh sistēmas antigēnu esamību vai neesamību cilvēku asinīs, tiek izmantoti standarta anti-Rēzus serumi (reaģenti), kuriem ir atšķirīga specifika, t.i., kas satur antivielas attiecībā pret dažādi šīs sistēmas antigēni. Lai noteiktu Rh 0 (D) antigēnu, visbiežāk izmanto anti-Rēzus serumu, pievienojot 10% želatīna šķīdumu vai standarta anti-Rēzus reaģentu, kas iepriekš sagatavots ar 33% poliglucīna šķīdumu. Lai iegūtu precīzākus pētījuma rezultātus, kā arī noteiktu citu seroloģisko sistēmu antigēnus, tiek izmantots Kumbsa tests (tas ir arī ļoti jutīgs pārlieto asiņu saderības noteikšanā). Pētījumam tiek izmantotas vietējās asinis vai sagatavotas ar kādu konservantu. Šajā gadījumā asinis jānomazgā no konservanta ar desmitkārtīgu tilpumu izotonisks šķīdums nātrija hlorīds. Nosakot Rh piederību- Rh 0 (D) jāizmanto divi seruma vai anti-rēzus reaģenta paraugi no divām dažādām sērijām un tajā pašā laikā jāizmanto standarta eritrocīti, kas iegūti no asinīm no Rh pozitīvām (Rh +) un Rh negatīvajām (Rh - ) personām. Nosakot citus izoantigēnus, attiecīgi jāizmanto kontroles eritrocīti, kas satur vai trūkst antigēna, pret kuru ir vērstas antivielas standarta serumā.

Nepilnīgi siltuma aglutinīni ir visizplatītākais antivielu veids, kas var izraisīt autoimūnas hemolītiskās anēmijas attīstību. Šīs antivielas pieder IgG, reti - IgM, IgA.

KUMBS TESTS

Kumbsa tests: ievads. Kumbsa tests ir laboratorijas diagnostikas metode, kuras pamatā ir hemaglutinācijas reakcija.

Galvenā autoimūnās hemolītiskās anēmijas diagnostikas metode ir Kumbsa tests. Tas ir balstīts uz imūnglobulīniem (īpaši IgG) vai komplementa komponentiem (īpaši C3) specifisko antivielu spēju aglutinēt eritrocītus, kas pārklāti ar IgG vai C3.

IgG un C3b saistīšanās ar eritrocītiem tiek novērota autoimūnās hemolītiskās anēmijas un zāļu izraisītas imūnās hemolītiskās anēmijas gadījumā. Tiešais Kumbsa tests. Tiešo Kumbsa testu izmanto, lai noteiktu antivielas vai komplementa komponentus, kas fiksēti uz sarkano asins šūnu virsmas. To veic šādi:

Lai iegūtu antivielas pret cilvēka imūnglobulīniem (antiglobulīna serumu) vai komplementu (antikomplementārais serums), dzīvnieku imunizē ar cilvēka serumu, imūnglobulīniem vai cilvēka komplementu. No dzīvnieka iegūtais serums tiek attīrīts no antivielām pret citiem proteīniem.

Pacienta eritrocītus mazgā ar fizioloģisko šķīdumu, lai pilnībā noņemtu serumu, kas neitralizē imūnglobulīnu un komplementa antivielas un var izraisīt kļūdaini negatīvu rezultātu.

Ja uz eritrocītu virsmas ir fiksētas antivielas vai komplementa komponenti, antiglobulīna vai antikomplementāra seruma pievienošana izraisa eritrocītu aglutināciju.

Tiešo Kumbsa testu izmanto šādos gadījumos:

autoimūna hemolīze.

Jaundzimušā hemolītiskā slimība.

Zāļu izraisīta imūnā hemolītiskā anēmija.

Hemolītiskās transfūzijas reakcijas. Netiešais Kumbsa tests. Netiešais Kumbsa tests nosaka antivielas pret eritrocītiem serumā. Lai to izdarītu, pacienta serumu inkubē ar 0. grupas donora eritrocītiem, un pēc tam veic tiešo Kumbsa testu.

Netiešo Kumbsa testu izmanto šādos gadījumos:

Donora un recipienta asiņu individuālās saderības noteikšana.

Alloantivielu noteikšana, ieskaitot antivielas, kas izraisa hemolītiskās transfūzijas reakcijas.

Virsmas eritrocītu antigēnu noteikšana medicīnas ģenētikā un tiesu medicīnā.

Identisku dvīņu apstiprināšana kaulu smadzeņu transplantācijā.

Lai veiktu bioloģisko testu, asinis tiek pārlietas pēc iespējas ātrāk (vēlams ar strūklu). Pēc 25 ml asiņu pārliešanas sistēmas caurule tiek nostiprināta ar skavu. Pēc tam tiek veikta 3 minūšu pauze, kuras laikā tiek uzraudzīts saņēmēja stāvoklis. Lai izveidotu bioloģisko paraugu, trīs reizes injicē 25 ml asiņu. Pārbaudes beigās (pēc pirmo 75 ml asiņu pārliešanas frakcionētās 25 ml devās ar 3 minūšu intervālu) sistēma tiek pielāgota vajadzīgajam pārliešanas ātrumam. Pārlejot pacientam vairāk nekā vienu flakonu ar asinīm, ir nepieciešams izņemt adatu no vēnas. Šajā gadījumā adatu izņem no tā flakona mēģenes, kurā ir izsīkušas asinis, un ievieto nākamajā flakonā. Sistēmas caurule (gumijas vai plastmasas) šajā brīdī ir nostiprināta ar skavu. Ja asins pārliešanas laikā recipientam ir nepieciešams intravenozi ievadīt kādas citas zāles, to veic, caurdurot sistēmas gumijas cauruli. Plastmasas caurules caurduršana ir nepieņemama, jo tā nenokrīt. Pēc katras asins pārliešanas pacients ir jāuzrauga, lai identificētu un savlaicīgi novērstu iespējamās komplikācijas, tostarp alerģiskas reakcijas. Ķermeņa temperatūra jāmēra 2 stundas pēc asins pārliešanas beigām. Palielinoties tā mērījumiem, tas ir jāatkārto nākamajās 4 stundās katru stundu. Tikpat svarīga ir urinēšanas un urīna sastāva uzraudzība, kas ļauj noteikt toksiskas pēctransfūzijas reakcijas klātbūtni. Oligūrijas un anūrijas parādīšanās pēc asins pārliešanas, asins šūnu un olbaltumvielu klātbūtne urīnā ir tieša norāde uz pēctransfūzijas hemolīzes attīstību.