Anti Lewis što. Analiza za sifilis ELISA - dekodiranje analize
Cijena: na zahtjev
Artikal možete dodati u svoju košaricu navođenjem količine
Vrlo je važno odabrati upravo one pretrage, metode ili dijagnostičke metode koje će doista pomoći da se postavi točna dijagnoza, a ne još više zbuniti liječnika. Imunoenzimski test odavno se etablirao kao metoda koja omogućuje ne samo dobivanje pozitivnog ili negativnog odgovora na pitanje - je li osoba bolesna od bilo koje spolne infekcije, već i utvrđivanje u kojoj je fazi razvoja bolest, te također razumjeti je li pacijentica imala sličan problem u anamnezi. ELISA test za sifilis danas je jedan od najosjetljivijih i najspecifičnijih testova, a njegova je točnost oko 90%.
Testni sustavi koji koriste metodu enzimske imunološke analize dizajnirani su za otkrivanje ne samo sifilisa, već i mnogih drugih infekcija: hepatitisa, HIV-a, CMV-a, herpesa, toksoplazmoze itd. ELISA test za sifilis omogućuje određivanje antitijela (IgG, IgA, IgM) na blijedu treponemu sadržanu u krvi bolesne osobe. Ova metoda omogućuje uvid u interakciju protutijela s posebnim pripravcima koji sadrže antigene koji u kombinaciji s protutijelima mogu tvoriti znak bolesti, što je jasno vidljivo u različitim dijagnostičkim metodama.
Imunoenzimski test za sifilis temelji se na metodi interakcije antitijela otkrivenih u krvi s antigenom uzročnika infekcije. Dijagnoza će ovisiti o tome koja su protutijela korištena: mogu se otkriti protutijela određene klase ili općenito. Da bi se dijagnosticirala ova metoda, krv se uzima natašte iz vene.
ELISA test krvi za sifilis uključuje upotrebu tri klase imunoglobulina: G, M, A. Ovi imunoglobulini imaju jedno svojstvo koje je važno za dijagnosticiranje sifilisa pomoću ELISA: proizvode se u strogo definiranom slijedu, zbog čega vam ELISA omogućuje odrediti u kojoj je fazi proces i koja je dinamika njegovog razvoja:
- Imunoglobulin M u krvi pokazuje koliko je vremena prošlo od infekcije. Međutim, pozitivni rezultati njegove prisutnosti ne znače uvijek prisutnost spolno prenosive bolesti: moguće je da je osoba doživjela egzacerbaciju neke kronične bolestišto je izazvalo takvu reakciju.
- Prisutnost IgA antitijela znači da je od infekcije prošlo najmanje mjesec dana.
- Budući da imunitet na ovu bolest nije proizveden, pozitivan rezultat IgG testa može pokazati i vrhunac bolesti i razdoblje nakon terapije.
Što znači ELISA test za sifilis pozitivan?
Treba napomenuti da ELISA pozitivan rezultat na sifilis nije razlog za paniku. Činjenica je da ova metoda omogućuje određivanje samo prisutnosti protutijela, ali ne i patogena. Stoga, ako je rezultat ELISA testa na sifilis pozitivan, to još nije temelj za postavljanje dijagnoze. Međutim, u znanstvenom svijetu testni sustavi se svakodnevno usavršavaju, a to danas znači da se u većini slučajeva još uvijek može vjerovati rezultatima analiza.
Postoje samo dva dijagnostička rezultata: "pozitivan" i "negativan". U prvom slučaju, pozitivni podaci znače da pacijent ima bolest u jednoj od faza ili da je nedavno završio tijek liječenja. Negativan rezultat imunoenzimskog testa znači ili odsutnost bolesti ili vrlo ranu fazu njezina razvoja.
Klinička slika prve faze sifilisa predstavljena je otkrivanjem tvrdog šankra u različitim područjima.
Prvi simptomi sifilisa pojavljuju se 3-5 tjedana nakon infekcije. Do ove točke bolest se odvija bez ikakvih vanjskih manifestacija.
Vrlo često, nakon nezaštićenog odnosa, osoba koja sumnja na sifilis, HIV ili hepatitis.
Recenzije i komentari
Muž je testiran na sifilis, ELISA na sifilis - pozitivan, RMP na sifilis - negativan. I što to znači?
Tijekom trudnoće (razdoblje je bilo 37 tjedana), ELISA rezultat bio je pozitivan 2,1. Nakon poroda sam 2 puta napravila testove - sve je bilo negativno. Nakon 6 mjeseci opet preboljela, ELISA - pozitivna, CP=1,9.(IgM+IgG). Što to znači.
Zdravo! Što to znači: krvni test za sifilis ELISA (ukupno at.) je pozitivan?
Molim vas recite mi što znači rmp1+, rpga 1+ ifa ukupno je negativan! Hvala unaprijed.
ELISA je lažno pozitivna!
Ostavite recenziju ili komentar
NAJNOVIJE OBJAVE
VENEROLOŠKE VIJESTI
Balanopostitis
Sifilis
Herpes
Kontracepcija
ELISA test krvi
Za sveobuhvatnu procjenu stanja tijela (osobito njegovih zaštitnih funkcija) propisana je enzimska imunoanaliza (ELISA). ELISA test krvi provodi se za dijagnosticiranje zaraznih, autoimunih, hematoloških patologija, primarnih i sekundarnih imunodeficijencija. U ovom članku predlažemo detaljnije razmotriti što je ELISA test krvi, kao i koje indikacije postoje za njegovu provedbu.
Indikacije za imenovanje krvnog testa ELISA i princip njegovog djelovanja
Kao što smo već napomenuli, ELISA test krvi je laboratorijska istraživanja, koji otkriva antigene ili antitijela u uzorku krvi. Ova analiza se koristi za otkrivanje razine hormona, imunoloških kompleksa i imunoglobulina. Postoje sljedeće indikacije za isporuku ELISA analize:
- Dijagnoza alergije.
- Dijagnostika bolesti virusnog porijekla - Epstein-Barr virus, herpes, hepatitis, citomegalovirus.
- Dijagnostika spolno prenosivih infekcija - mikoplazma, ureaplazma, sifilis, trihomonas, klamidija.
- Definicija imunodeficijencije.
- Dijagnostika onkoloških patologija.
- Procjena učinkovitosti terapije.
- Određivanje razine hormona.
- Preoperativno sveobuhvatan pregled.
Načelo djelovanja enzimskog imunološkog testa temelji se na krvnom testu za prisutnost imunoglobulina (specifična proteinska protutijela). Imunoglobuline proizvodi imunološki sustav kada antigeni (strani mikroorganizmi) uđu u ljudsko tijelo. Te se imunološke molekule vežu za razne infektivne agense i neutraliziraju ih. Važna značajka razlikovanja koju posjeduju imunoglobulini je njihova specifičnost. Zbog ovih karakteristika mogu formirati kompleks antigen-protutijelo vezanjem na specifični antigen. Tijekom ELISA testa krvi, ovaj kompleks se određuje kvantitativno i kvalitativno.
Za ovu studiju često se koristi ljudska krv. Međutim, kao materijal za analizu možete uzeti sadržaj staklasto tijelo, amnionska tekućina, cerebrospinalna tekućina. Uzorak krvi obično se uzima iz pacijentove kubitalne vene. Preporuča se darivanje krvi na prazan želudac (od posljednjeg obroka mora proći najmanje 12 sati). Ako bolesnik uzima lijekovi morate prijaviti liječniku, jer neki od njih mogu utjecati na rezultat analize. Također, na pouzdanost rezultata testa utječe i korištenje droga i alkohola.
Dešifriranje krvnog testa za ELISA
Oblik ove analize obično označava negativan (-) ili pozitivan (+) rezultat izračuna svake klase imunoglobulina.
Predlažemo da razmotrimo tumačenje vjerojatnog dekodiranja krvnog testa za ELISA.
- IgG, IgA nisu otkriveni, a rezultat IgM je negativan - potpuni oporavak.
- Nalaz IgM, IgA, IgG je negativan - nema imuniteta na infekciju.
- IgG nalaz, IgA pozitivan i negativan, kao i nalaz IgM pozitivan- prisutnost akutne infekcije.
- Pozitivan nalaz IgG i negativan nalaz IgA i IgM - postcijepni ili postinfekcijski imunitet.
- Pozitivan ili negativan rezultat IgG, IgA i negativan IgM je kronična infekcija.
- Rezultat IgG, IgM, IgA je pozitivan - pogoršanje kronične zarazne patologije.
U enzimskom imunološkom testu, osim pojašnjavanja klasa protutijela, njihovi kvantitativni pokazatelji navedeni su u prijepisu. Međutim, samo liječnik daje njihovo opširno objašnjenje.
Prednosti i nedostaci ove studije
- Relativno niska cijena.
- Jednostavnost korištenja.
- Mogućnost dijagnostike ranoj fazi sumnja na bolest.
- Relativno visoka točnost dobivenih podataka.
- Kratko vremensko razdoblje potrebno za dobivanje rezultata studije.
- Sposobnost praćenja dinamike razvoja infektivni proces u organizmu.
- Visoka razina unifikacije, što omogućuje provođenje masovnih istraživanja.
- Automatizacija svih faza istraživanja.
Nedostatak ELISA testa krvi je taj što može biti prilično rijetki slučajevi dati lažno pozitivne ili lažno negativne rezultate. Također, tijekom studija, osim tehničkih grešaka, razlog lažni rezultati pacijent može imati reumatoidni faktor, prisutnost kronična bolest(kod kojih se stvaraju antitijela), uzimanje određenih lijekova, metabolički poremećaji.
- Giardiasis.
- Ascariasis.
- cisticerkoza.
- Amebijaza.
- Trichinosis - studija se provodi više puta, 4-12 tjedana nakon infekcije, određuje se maksimalna razina antitijela.
- Tenijaza.
- Opisthorchiasis - provesti diferencijalnu dijagnozu između akutnog i kroničnog oblika bolesti.
- Toksoplazmoza.
- Fascioliasis - in akutni stadij bolest se određuje prisutnošću antitijela.
- Kožna ili visceralna lišmanijaza.
Prilikom korištenja materijala sa stranice, aktivna referenca je obavezna.
Podaci navedeni na našoj web stranici ne smiju se koristiti za samodijagnozu i liječenje te ne mogu biti zamjena za savjetovanje s liječnikom. Upozoravamo na prisutnost kontraindikacija. Potrebna je specijalistička konzultacija.
Koji se krvni testovi daju za sifilis: RW, RPHA, ELISA, VDRL, RPR, RIBT, dekodiranje rezultata testa
Sifilis je zarazna bolest uzrokovana spirohetom Treponema pallidum, sklona progresivnom kroničnom tijeku, s jasnom periodizacijom kliničkih simptoma.
Prevladavanje spolnog prijenosa nad kontaktnim i transplacentalnim svrstava ovu bolest u niz spolno prenosivih bolesti (STD, SPI). Uz navedene načine prijenosa infekcije, posebnu ulogu ima umjetni put (od latinskog "artificio" - umjetno stvoren).
Tipično je za medicinske ustanove, uglavnom se provodi u bolničkom okruženju. Infekcija se javlja tijekom transfuzije krvi, raznih kirurške operacije, invazivne dijagnostičke metode.
Unatoč karanteni darovane krvi, problem otkrivanja sifilisa kod darivatelja postoji različite faze bolest je i dalje prisutna.
Stoga dijagnostičke mjere za sifilis zahtijevaju standardizaciju, uvođenje novih osjetljivih i informativnih metoda identifikacije, kao i minimiziranje pogrešaka i pogrešnog tumačenja rezultata ispitivanja.
Klasifikacija laboratorijskih dijagnostičkih metoda
Dijagnoza sifilisa ima neke značajke i razlikuje se od dijagnoze drugih. bakterijske infekcije. Složena struktura i antigenska svojstva blijede treponeme uzrokuju pogreške u tumačenju rezultata seroloških testova.
Test krvi za sifilis nudi se 3 glavne skupine pacijenata:
- 1 Probir i klinički pregled populacijskih skupina (uključujući trudnoću, registraciju u antenatalnu kliniku, prijem na posao i upis u zdravstvenu knjižicu i tako dalje).
- 2 Probir u rizičnim skupinama (nezaštićeni spolni odnosi s osobom zaraženom sifilisom, osobe nakon prisilnog spolnog odnosa, zaražene HIV-om i dr.).
- 3 Osobe sa simptomima ili sumnjom na sifilitičku infekciju.
svi laboratorijske metode uvjetno se dijele na izravne i neizravne.
Izravne metode
- 1 Identifikacija Treponema pallidum u tamnom polju (mikroskopija tamnog polja).
- 2 Infekcija pokusnih životinja (uzgoj u laboratorijskim životinjama).
- 3 PCR (lančana reakcija polimerazom).
- 4 DNA sonda ili hibridizacija nukleinske kiseline.
Neizravne metode
Serološke reakcije su laboratorijske dijagnostičke metode koje se temelje na otkrivanju protutijela (skraćeno AT) na antigene blijede treponeme (skraćeno AG). Oni su neophodni za potvrdu dijagnoze.
- 1 Netreponemski testovi:
- Wassermanova reakcija (RSK);
- Reakcija mikrotaloženja (MR, RMP) i njeni analozi, koji su navedeni u nastavku;
- Brzi plazma reagin test (RPR, RPR);
- Test s crvenim toluidinom i serumom (TRUST);
- Netreponemski test Laboratorija za proučavanje spolno prenosivih bolesti - VDRL.
- 2 Treponemalni testovi:
- R-cija imobilizacije Treponema pallidum - RIBT/RIT;
- R-cija imunofluorescencije - RIF, FTA (razrjeđenje seruma RIF-10, RIF-200, RIF-abs);
- R-cija pasivne hemaglutinacije (RPHA, TRPGA, TPHA);
- ELISA (ELISA, EIA);
- Imunobloting.
Slika 1 - Algoritam serodijagnostike sifilisa
Histomorfološke metode
Ove metode svode se na utvrđivanje značajki histomorfologije sifilitičkih manifestacija. Pozornost se posvećuje suptilnostima strukture tvrdog šankra. Međutim, diferencijalna dijagnoza infekcija pomoću histologije vrlo je teška. Histomorfologija se koristi s drugim laboratorijskim i kliničkim pretragama.
Mikroskopija u tamnom polju Treponema pallidum
Ova se metoda temelji na izravnom otkrivanju blijede treponeme u materijalu koji se proučava pomoću mikroskopa i posebnih uređaja (najčešće iscjedak erozija i ulkusa, rjeđe cerebrospinalne tekućine i drugih supstrata).
Uz pomoć skarifikacije, struganja, istiskivanja iz erozija i ulcerativnih defekata dobiva se eksudat, a zatim se pripremljeni pripravak ispituje pod mikroskopom.
Obično se blijede treponeme otkrivaju u pripravku dobivenom iz šankra, iz žarišta sekundarnog svježeg, sekundarnog rekurentnog sifilisa, kao i punktata limfnih čvorova, placente.
Na temelju fenomena sjaja malih čestica u tamnom polju kada ih pogodi snop svjetlosti (Tyndallov fenomen), metoda savršeno omogućuje razlikovanje uzročnika sifilisa od drugih treponema na temelju morfoloških razlika i razlika u načinima bakterija se kreće.
Za mikroskopiranje se koristi poseban kondenzor tamnog polja odgovarajuće optičke rezolucije. Lijek se dobiva metodom usitnjene kapi (kap materijala nanese se na čisto predmetno stakalce bez masnoće i prekrije vrlo tankim pokrovnim stakalcem).
Imerzijsko ulje se kapne na pokrovno stakalce. Okretanjem cijevi i okretanjem povećala podešava se željeno osvjetljenje.
U tamnom polju mikroskopa otkrivaju se krvne stanice, epitelne stanice i uzročnik sifilisa. Blijeda treponema izgleda kao spirala, vrlo tanka, zrači srebrnastom bojom, s glatkim pokretima.
Slika 2 - Mikroskopija tamnog polja kao način vizualizacije blijede treponeme u materijalu koji se proučava. Izvor slike - CDC
Treponema pallidum se mora razlikovati od ostalih treponema, uključujući Tr. refringens, koji se mogu naći u orofarinksu i sluznici genitalija. Ova bakterija čini kaotične pokrete, ima široke i asimetrične, prilično grube kovrče. Osim toga, Treponema pallidum se razlikuje od Tr. Microdentium, Tr. Buccalis i Tr. vincenti.
Vizualizacija bakterija u tamnom polju ponekad je dopunjena reakcijom fluorescencije. Za to se nativnom materijalu dodaju antitreponemska protutijela obilježena fluorescentnom bojom. Time nastaje kompleks nazvan antigen-antitijelo (skraćeno AG-AT), koji je predmet proučavanja pomoću fluorescentnog mikroskopa.
Metoda lančane reakcije polimerazom (PCR).
PCR, razvijen 1991. za otkrivanje molekule deoksiribonukleinske kiseline (DNA) treponeme pallidum, vrlo je osjetljiv i specifičan, omogućujući otkrivanje fragmenata DNA patogena.
Ova analiza temelji se na kopiranju kratkih dijelova DNA spirohete pallidum, koja zadovoljava navedene parametre i prisutna je u uzorku. Sve se to radi u umjetnim uvjetima (in vitro). Reakcija se provodi u uređaju - pojačivaču, koji osigurava periodizaciju temperaturnih ciklusa. Dolazi do hlađenja, a zatim zagrijavanja epruveta s pogreškom od 0,1˚S.
Predložak DNA zagrijava se 2 minute na temperaturi od 92-98°C (koristi se maksimalna temperatura ako je polimeraza termostabilna). Kada se zagriju, DNK lanci se razilaze zbog raspada vodikovih veza između njih. U koraku žarenja, temperatura reakcije se snižava kako bi se primer vezao na jednolančani predložak.
Žarenje traje oko 30 sekundi, tijekom kojih se sintetiziraju stotine nukleotida. Novosintetizirane molekule kopira polimeraza, kao rezultat, specifični fragmenti deoksiribonukleinske kiseline se višestruko povećavaju. Naknadna detekcija fragmenata provodi se elektroforezom u agar gelu.
PCR dijagnostika sifilisa još uvijek je eksperimentalne prirode, ali je opravdana kada se otkrije kongenitalna infekcija, u teškim dijagnostičkim slučajevima ili s minimalnim sadržajem blijedih treponema u ispitivanom materijalu.
DNA hibridizacija
Hibridizacija DNA provodi se in vitro i temelji se na potpunom ili djelomičnom spajanju dviju jednolančanih molekula DNA u jednu molekulu. U slučaju potpunog podudaranja komplementarnih fragmenata, spajanje je jednostavno. Ako je komplementarno podudaranje djelomično, tada se povezivanje lanaca DNA odvija sporo. Na temelju vremena lančane fuzije može se procijeniti stupanj komplementarnosti.
Kada se DNK zagrijava u puferskoj otopini, vodikove veze se prekidaju dušičnim bazama koje su komplementarne, kao rezultat toga, lanci DNK se razdvajaju. Zatim se dobiva pripravak od dvije denaturirane deoksiribonukleinske kiseline. Nakon hlađenja, jednolančane regije renaturiraju. Nastaje takozvani DNA hibrid.
Metoda omogućuje procjenu i analizu brzine žarenja, uzimajući u obzir značajke (sličnosti i razlike) DNK između vrsta ili unutar vrste.
Upotreba DNK sonde sastoji se u hibridizaciji obilježenog fragmenta DNK sa specifičnom regijom DNK za identifikaciju komplementarnih nukleotidnih sekvenci. Za označavanje sonde koristi se skupina nezasićenih atoma (kromofora) ili radioaktivnih izotopa.
DNA sonda se koristi za heterogenu i homogenu detekciju nukleinskih kiselina. Uloga sonde je odrediti područja gdje je došlo do spajanja mete i sonde. Detekcija u homogenom sustavu ima prednost u mogućnosti praćenja hibridizacije molekula DNA u stvarnom vremenu.
Bit metode svodi se na denaturaciju i renaturaciju DNA (ponovno ujedinjenje lanaca DNA). Proces renaturacije nukleinske kiseline i DNA sonde završava stvaranjem "hibrida".
Specifične sekvence nukleinske kiseline hibridiziraju se s DNA sondom i tako se otkrivaju te omogućuju procjenu količine DNA u ispitivanom materijalu.
Infekcija laboratorijskih životinja
Visoka osjetljivost kunića na Treponema pallidum (oko 99,9%) omogućuje im da se koriste u dijagnostici sifilitičke infekcije.
Infekcija kunića provodi se u istraživačkim centrima i predstavlja "zlatni standard" za procjenu osjetljivosti drugih metoda.
Vratimo se treponemskim i netreponemskim testovima, koji se najčešće koriste. Razmotrite njihove prednosti i nedostatke, kao i pogreške u interpretaciji rezultata.
Netreponemski testovi
Ovo su testovi za utvrđivanje IgG antitijela i IgM na standardizirani kardiolipinski antigen. Njihov značajan nedostatak je njihova relativno niska specifičnost.
Niska cijena i jednostavnost provedbe omogućuju svrstavanje ovih testova u probirne dijagnostičke testove potrebne za postavljanje preliminarne dijagnoze i probir stanovništva.
To su ne-treponemalni testovi koji se daju prilikom registracije medicinske knjižice, prijave za posao, registracije u antenatalnoj klinici.
- 1 Minimalna osjetljivost u fazi primarnog sifilisa - 70%;
- 2 Minimalna osjetljivost u fazi kasnog sifilisa - 30%;
- 3 Mogućnost lažno negativnih i lažno pozitivnih rezultata;
- 4 Složenost implementacije RSC-a.
- 1 Relativno niska cijena testne proizvodnje;
- 2 Dobijte brzi odgovor;
- 3 Mogućnost njihove primjene za probir.
Dobivanje lažno pozitivnih ili slabo pozitivnih uzoraka moguće je u sljedećim slučajevima:
- 1 Kršenje tehnologije izvođenja, prilikom blokiranja kompleksa AG-AT.
- 2 Prisutnost pacijenta autoimune bolesti(reumatoidni artritis, reumatizam, sklerodermija, sistemski eritematozni lupus, sarkoidoza itd.).
- 3 Zloćudne neoplazme.
- 4 Virusne i bakterijske infekcije.
- 5 Endokrine bolesti (autoimuni tiroiditis, dijabetes melitus).
- 6 Trudnoća.
- 7 Konzumiranje alkohola.
- 8 Konzumiranje masne hrane.
- 9 starost.
Kao što možete vidjeti iz popisa, postoji dovoljno razloga za netočan rezultat. Stoga s njim treba postupati s velikim oprezom. Razmotrimo još dva uzorka uz RSC. Ovo je reakcija mikroprecipitacije i VDLR (njegova modifikacija).
Reakcija vezanja komplementa (RSK, Wasserman, RW)
Ovo je test koji se temelji na sposobnosti komplementa da se veže na AG-AT komplekse. Rezultirajući kompleks identificira se pomoću hemolitičkog sustava. Kardiolipinski antigen značajno povećava osjetljivost uzorka.
Osjetljiva je Colmerova reakcija, koja se sastoji u izvođenju pri različitim temperaturnim uvjetima. Dakle, prva faza Colmerove reakcije odvija se na temperaturi od 20˚S pola sata, druga faza na temperaturi od 4-8˚S tijekom 20 sati. Za to vrijeme dolazi do vezanja komplementa.
Prilikom izvođenja RSK moguće je dobiti izrazito pozitivne rezultate. Razlog je vjerojatno veliki titar antitijela u nerazrijeđenom serumu. U tom slučaju uzorci se stavljaju s opadajućim dozama.
Da bi se razlikovali stadiji sifilisa i procijenila učinkovitost antisifilitičkog liječenja, određuje se količina protutijela u serumu.
Pozitivnost uzorka procjenjuje se pomoću križanja; također, u Wassermanovoj, Colmerovoj i Cannovoj reakciji indicirano je razrjeđenje seruma.
Reakcija mikrotaloženja
Budući da je složenost izvođenja navedenih testova velika, razvijena je ubrzana metoda serodijagnostike sifilisa, tzv. ekspresna metoda, mikroprecipitacijska reakcija (skraćeno MR, RMP), za širinu obuhvata medicinskim pregledima različitih populacijskih skupina. .
Izvodi se s kardiolipinskim antigenom i pomoćnim tvarima. Njegova prednost je prikupljanje periferne krvi za istraživanje. To znatno ubrzava kako samu tehniku tako i rad laboranta.
Slika 2 - Reakcija mikroprecipitacije (shema)
Za MR je potrebna plazma ili inaktivirani serum bolesnika (sadrže antitijela). Zatim se plazma stavlja u označene jažice. Zatim se ispitnom materijalu doda kap kardiolipinskog antigena, promiješa i protrese. Zbog toga se u serumu zaražene osobe pojavljuju karakteristične ljuskice različitog intenziteta.
Ovo je test kvalitete. Kvantifikacija koristi 10 razrjeđenja seruma smještenih u 10 odgovarajuće označenih jažica. Kod kvalitativne MR, odgovor je naznačen u obliku križića (plus) ili minusa, kod kvantitativne MR, titar antitijela (1:2, 1:4, i tako dalje).
Prisutnost ljuskica smatra se pozitivnim ili slabo pozitivnim odgovorom. Pojava flokulata također je moguća u odsutnosti bolesti, stoga se konačna procjena dobivenog rezultata provodi nakon kontrolne studije ili drugih reakcija (RIBT, RIF, ELISA, RPHA).
Metoda koju preporučuje Svjetska zdravstvena organizacija za postavljanje reakcije s antigenom lipoidne prirode (AH) s pravom se smatra najboljom među ostalim standardnim netreponemskim testovima. Razvijen u SAD-u, Georgia u laboratoriju za spolne bolesti (Veneral Diseases Research Laboratories).
Kao naziv uzorka poslužila je skraćenica institucije - VDRL. VDRL je modifikacija MP-a. Serum bolesnika sa sifilisom se inaktivira i stavlja na predmetno staklo. Antigen koji se koristi sastoji se od kardiolipina, kolesterola i lecitina u različitim postocima. Odgovor se registrira gotovo odmah.
U prisutnosti protutijela u serumu dolazi do izrazite flokulacije. Serum postaje reaktivan 4 tjedna nakon infekcije. Za procjenu količine protutijela, serum se prethodno eksponencijalno razrijedi.
- 1 relativno visoka osjetljivost;
- 2 relativno visoka specifičnost;
- 3 jednostavnost implementacije;
- 4 niske cijene reagensa;
- 5 dobiti brz odgovor.
Nedostatak VDRL-a je relativno visoka stopa lažno pozitivnih rezultata.
Njihovi uzroci su sve iste gore navedene bolesti.
Treponemalni testovi se izvode sa specifičnim antigenima Treponema pallidum. Oni su nužni i obvezni za osnivanje konačna dijagnoza. To je reakcija imunofluorescencije (RIF), reakcija neizravne hemaglutinacije (IPHA), enzimski imunotest (ELISA) itd.
Nakon pozitivnog rezultata netreponemskog testa (RPR, MP, VDRL) uvijek treba napraviti treponemske testove (češće kombinaciju - RPHA, ELISA, RIF).
Treponemske testove teže je izvesti od brzih testova i koštaju više.
Ova reakcija (skraćeno RIF) koristi se za dijagnosticiranje sifilisa, uključujući latentne oblike, te za ponovnu provjeru pozitivnih i lažno pozitivnih uzoraka.
RIF se temelji na sjaju obilježenih antitijela u kombinaciji s kompleksom antigen-antitijelo pod kvarcnom lampom. Metoda se počela koristiti 60-ih godina i odlikovala se jednostavnošću implementacije i visokom specifičnošću (koja je malo inferiorna u odnosu na RIBT).
Ima nekoliko modifikacija: RIF-10, RIF-200 i RIF-abs.
Najosjetljiviji RIF u razrjeđenju je 10 puta, a ostali su specifičniji. RIF se provodi u dvije faze. Bolesnikov krvni serum dodaje se AG. Formira se AG-AT kompleks koji se istražuje u sljedećoj fazi. Kompleks obilježen fluorokromom zatim se identificira mikroskopijom. Ako se ne primijeti sjaj, to ukazuje na odsutnost specifičnih protutijela u krvnom serumu.
RIF-200 je najvrjednije od svih razrjeđenja. Metoda je namijenjena dijagnostici razne forme sifilis, osobito latentni sifilis, te unakrsna provjera pozitivnih uzoraka.
Reakcija imobilizacije blijede treponeme (skraćeno RIBT, RIT) jedna je od složenih seroloških pretraga koje zahtijevaju značajan napor i financijske troškove. RIBT se koristi sve rjeđe, ali ostaje relevantan u dijagnostici latentnog sifilisa.
Od velike je važnosti u prepoznavanju lažno pozitivnih nalaza u trudnica, a temelji se na imobilizaciji bakterija u prisutnosti imobilizina – kasnih antitijela.
Rezultat se procjenjuje na postotak (%) imobiliziranih treponema pomoću posebne tablice:
- 1 Od 0 do 20 - negativan test.
- 2 Od 21 do 50 - slabo pozitivan test.
- 3 Od 50 prepozitivna reakcija.
Lažno pozitivni rezultati također su mogući kod RIBT-a. Dakle, netočan odgovor je moguć kod infekcije tropskom trepanematozom, kao i kod tuberkuloze, ciroze jetre, sarkoidoze i senilnih bolesnika.
Ovaj test krvi za sifilis naziva se test pasivne hemaglutinacije (skraćeno kao krv za TPHA, TPHA).
Antigen za TPHA priprema se iz eritrocita ovna obloženih fragmentima blijedih treponema (dobivenih od zaraženih kunića (vidi sliku 4)). Koristi se za analizu deoksigenirana krv(plazma ili inaktivirani serum) pacijenta.
Kada se antigen doda serumu bolesnika sa sifilisom, nastaje kompleks AG-AT, što dovodi do aglutinacije crvenih krvnih stanica. aglutinaciju utvrđuje subjektivno laborant.
Slika 3 - Shema RPHA (reakcija pasivne hemaglutinacije)
Uzorak se ocjenjuje pozitivnim kada se pojave aglutinati ujednačene ružičaste boje. Crvena boja taloga ukazuje na taloženje eritrocita. RPHA je vrlo osjetljiv i vrlo specifičan.
Reakcija mikrohemaglutinacije
To je pojednostavljena verzija RPGA. Razlikuje se od gore opisanog uzorka po tome što ima manje antigena, razrjeđivača i krvnog seruma za izvođenje reakcije. Uzorak se može procijeniti 4 sata nakon inkubacije seruma. Koristi se u probiru i masovnim pregledima na sifilis.
Vezani imunosorbentni test
Imunoenzimski test (skraćeno ELISA) temelji se na specifičnoj reakciji antigen-antitijelo. biološki materijal(krvni serum pacijenta, cerebrospinalna tekućina) uvode se u jažice, na čijoj su čvrstoj površini fiksirani antigeni blijede treponeme. Ispitni materijal se inkubira, zatim se isperu antitijela koja se nisu vezala na antigene (vidi sliku 5).
Identifikacija dobivenog kompleksa provodi se u fazi fermentacije pomoću imunološkog seruma obilježenog enzimom. Tijekom kemijske reakcije, enzim boji nastale komplekse. Intenzitet bojenja ovisi o količini specifičnih protutijela u krvi bolesnika i bilježi se spektrofotometrom.
Slika 4 - Shema ELISA (enzimski imunotest)
Osjetljivost ELISA je više od 95%. Metoda se koristi u automatiziranom načinu za proučavanje dekretiranih populacijskih skupina: donora, trudnica i drugih, kako bi se razjasnila dijagnoza u slučaju pozitivnih i lažno pozitivnih netreponemskih testova.
Imunobloting
Imunobloting je vrlo osjetljiva metoda, modifikacija jednostavnog ELISA testa. Reakcija se temelji na elektroforezi s odvajanjem antigena blijede treponeme.
Odvojene imunodeterminante se prenose na nitrocelulozni papir i prikazuju u ELISA testu. Serum se zatim inkubira i nevezana antitijela se isperu. Dobiveni materijal se tretira enzimom obilježenim imunoglobulinima (IgM ili IgG).
Klinička procjena rezultata laboratorijske dijagnostike sifilisa
U tablici 1 u nastavku imamo moguće rezultate analize i njihova interpretacija. Kao što možete vidjeti u tablici, glavna vrijednost u dešifriranju je sveobuhvatna procjena testova.
Tablica 1 - Dešifriranje rezultata seroloških reakcija (krvni testovi za sifilis). Kliknite na tablicu za pregled
Reaktivnost testova također se ocjenjuje "križićima":
- 1 Maksimalni odgovor (jako pozitivan test) označen je s 4 križića.
- 2 Pozitivan uzorak označen je s 3 križića.
- 3 Slabo pozitivna reakcija označena je s dva križića.
- 4 Jedan križić označava sumnjiv i negativan rezultat.
- 5 Negativni odgovor označava se znakom minus.
Problem optimizacije laboratorijske dijagnoze sifilisa do danas nije izgubio svoju važnost. Suvremene dijagnostičke metode, unatoč želji znanstvenika da dijagnostiku dovedu do najveće moguće osjetljivosti i specifičnosti, zahtijevaju kontrolni pregled i individualan pristup.
Značajka sifilitičke infekcije je fenomen serorezistencije, koji nije dobio znanstveno objašnjenje. Dijagnoza se postavlja nakon potpunog pregleda pacijenta epidemiološkim, kliničkim, laboratorijskim metodama.
U pozadini ekonomskog i tehničkog razvoja medicine, također postoji napredak u razvoju novih kriterija za dijagnosticiranje sifilisa. Sve to će vam omogućiti brzo, uspješno i precizno liječenje pacijenata.
- 1 SAVEZNE KLINIČKE PREPORUKE ZA LIJEČENJE PACIJENATA SA SIFILISOM. RUSKO DRUŠTVO DERMATOVENEROLOGA I KOZMETOLOGA. Moskva 2013.;
- 2 NAREDBA MINISTARSTVA ZDRAVLJA RUSKE FEDERACIJE od 26. ožujka 2001. N 87 “O POBOLJŠANJU SEROLOŠKE DIJAGNOSTIKE SIFILISA”;
- 3 Sifilis. Pranatharthi Haran Chandrasekar, MBBS, profesor dr. med., šef odjela za infektivne bolesti, Odjel za internu medicinu, Medicinski fakultet Sveučilišta Wayne State. Medsacape.com;
- Smjernice za liječenje spolno prenosivih bolesti (CDC).
Kada je propisana analiza, uzmite ELISA test za sifilis. Metode laboratorijske dijagnostike. Rezultati analize - kako odrediti normu i odstupanja. Trošak imunološkog enzimskog testa.
U pravilu, stalno kada kontaktirate kliniku, liječnici propisuju različite testove. To im omogućuje da identificiraju infekcije i bolesti od kojih osoba boluje. ELISA, ili takozvani enzimski imunotest, izvrstan je način za procjenu imunološki sustav organizam, te identificirati infekciju i stadij bolesti prema prisutnosti protutijela.
Dakle, tko je dodijeljen uzeti ovu analizu i što je enzimski imunološki test? Liječnici propisuju ovu analizu ako osoba ima sljedeće bolesti:
- Osip na tijelu - alergijske reakcije.
- Virusi - herpes, citomegalavirus.
- Spolno prenosive bolesti - sifilis, Trichomonas.
- Patologija povezana s rakom.
- Neurosifilis.
Uz ove bolesti, analiza je propisana za određivanje razine hormona u krvi. Na temelju rezultata procjenjuje se kvaliteta terapije. Što je sifilis vjerojatno svaka osoba zna, ali ne predstavlja njegove razmjere i koliko zaraženih ljudi hoda pored nas.
Trenutno je sifilis najčešća bolest. Ovo je treponoma koja utječe na ljudsko tijelo. Kao rezultat toga, svi su pogođeni. unutarnji organi bolestan.
Ovo je vrlo opasna infekcija, a nerijetko se dogodi da se dugo ne pojavi. Dakle, osoba može dugo biti nositelj i distributer, a da ne zna da je bolesna.
Metoda laboratorijske dijagnostike
Medicina ne stoji mirno, moderne analize postale su značajno drugačije od starih metoda proučavanja tijela. Iako su svoju ulogu odradili savršeno, ponekad su na rezultate morali čekati tjednima i mjesecima. To naravno nije bilo povoljno za zaraženu osobu. Što je očekivanje rezultata, bolesna osoba je prošla.
Klasične analize - otkrivanje sifilisa Wassermanovom metodom, Kahnova metoda počela je gubiti svoje pozicije i zamijenjena takvim testovima kao što je ELISA.
Ovo je najviše moderna metoda otkrivanje infekcije kod ljudi. Rezultat se dešifrira pomoću računala. To vam omogućuje točnije određivanje pozitivnog rezultata ili negativnog testa.
Pročitajte i povezano
Što je spolno prenosiva bolest? Simptomi, liječenje
Tijekom dekodiranja, traženje antitijela na specifične bolesti. A kao rezultat analize bilo je moguće otkriti infekciju kada je rezultat bio pozitivan. Korištenje ELISA testa za otkrivanje sifilisa podrazumijeva upotrebu imunoglobulina u tri klase:
- G, M, A - za dijagnozu su najvažniji.
- Proizvode se u zaražena osoba strogo određenim redoslijedom.
- Brzo odredite stadij infekcije.
Rezultati ELISA testa - normalna i pozitivna analiza
Ako govori o analizi ELISA za sifilis, onda je u ovom slučaju teško reći da postoji norma ili odstupanje. Rezultat je obično ili negativan ili pozitivan. Osim toga, postoje titri koji određuju količinu antitijela u krvi.
Postoje mnoge suptilnosti u dešifriranju analize, ako je pokazala pozitivan rezultat, analiza će se ipak morati ponoviti nekoliko puta kako bi se isključila metoda lažno pozitivne reakcije.
Kao što je već napisano, postoji mnogo suptilnosti prilikom dešifriranja analize, a samo liječnik može odrediti rezultat. Dajemo primjere u tablici, koji se rezultati mogu prikazati za enzimski imunološki test:
Nemojte očajavati ako je analiza pokazala pozitivan rezultat. U pravilu se provode dodatne analize i ispitivanja, različiti putevi radi točnije dijagnoze.
Trošak imunološkog enzimskog testa
U pravilu, trošak ove analize izravno ovisi o samoj analizi i identifikaciji specifične infekcije. Određivanje markera infekcije razne vrste košta od 200 do 350 rubalja. I takva analiza se provodi u roku od dva dana.
ELISA je najpopularnija i najmodernija metoda za dijagnosticiranje organizma. Metoda je pokazala svoju učinkovitost u otkrivanju infekcije, te određivanju točnog razdoblja infekcije.
S obzirom na politiku cijena, možemo reći da je analiza dostupna svakoj osobi s bilo kojim budžetom. Omogućuje liječniku da dobije potpunu sliku infekcije osobe. Pokazao se u slučaju i nije razočarao liječnike. U isto vrijeme, nakon što je primio analizu, liječnik je mogao brzo odgovoriti, propisujući pravodobno liječenje.
(veza na 3. članak u ovoj datoteci), omogućujući procjenu sposobnosti tijela da se odupre zarazne bolesti a u prikazivanju faze bolesti važno mjesto zauzima imunoenzimski test (ELISA). Provođenje ove studije omogućuje vam sveobuhvatnu procjenu aktivnosti zaštitne funkcije krvi i prepoznavanje stanja imunodeficijencije kod zaraznih patologija, kao i bolesti krvi, autoimunih procesa i hormonalnih problema.
Kako je moguće jednom analizom obuhvatiti toliko ciljeva i koje su indikacije za njezinu provedbu? Pokušajmo to shvatiti.
Što je ELISA test krvi?
Ovo je laboratorijski test koji vam omogućuje određivanje prisutnosti specifičnih protutijela (zaštitnih faktora krvi proteinske prirode) na određene antigene (patogene agense). Među antitijelima od najveće važnosti su imunoglobulini, koji mogu postojati u obliku imunokompleksa.
Imunoglobulini nastaju kao rezultat složenih ljudskih neurohumoralnih reakcija koje se javljaju kao odgovor na uvođenje stranih antigena. Svaka vrsta patogena proizvodi vlastita specifična protutijela. Djeluju tako što "vežu" antigen ili patološki mikroorganizam, stvarajući kompleksni spoj "antigen-antitijelo", nakon čega slijedi neutralizacija, enzimska liza, reakcije fagocitoze i izlučivanje iz organizma.
Bilješka:upravo po prisutnosti određenih kompleksa ELISA metoda određuje vrstu uzročnika ili štetne tvari prisutne u pacijentu.
Osnovne principe funkcioniranja ljudskog imuniteta možete naučiti gledajući ovaj video pregled:
Što su imunoglobulini
Otkriveno je i proučavano 5 glavnih klasa imunoglobulina - IgA, IgM, IgG, IgD, IgE. uloga ostalih još nije do kraja razjašnjena i oni su u fazi znanstvenog istraživanja.
Bilješka:najvažniji u praktičnoj medicini su imunoglobulini klasa - A, M i G. Informativnost definicije temelji se na različitim vremenskim intervalima njihove pojave, maksimuma i nestanka.
Razmotrimo ovo pitanje detaljnije.
Glavni zadatak imunoglobulin A (IgA) je zaštitna funkcija sluznice dišni put, gastrointestinalni trakt i mokraćnog sustava. S akutnim početkom bolesti, nemoguće ih je identificirati. Ovi zaštitni kompleksi pojavljuju se tek od 2. tjedna od početka bolesti, ponekad i kasnije. Glavnina imunoglobulina A koncentrirana je u mukoznim tkivima. Otprilike oko 80%. Preostala antitijela cirkuliraju u krvi. Glavna funkcija je neutralizacija i uništavanje mikroorganizama. Nakon smirivanja akutnih manifestacija bolesti, količina ovih imunoglobulina počinje se smanjivati i potpuno nestaje do 8 tjedana od početka bolesti. Ako se IgA nađu u više od kasni datumi, onda to ukazuje na kronizaciju procesa.
Glavni i prvi markeri akutne faze razvoja patologije su imunoglobulini klase M (IgM). Nalaze se do 5. dana od pojave bolesti. Možete odrediti njihovu prisutnost u krvi oko 6 tjedana. Zatim počnu brzo nestajati.
Preostali imunološki odgovor karakterizira prisutnost u krvi imunoglobulini klase G (IgG). Pojava ovih čimbenika u krvi otkriva se otprilike mjesec dana nakon početka bolesti. U budućnosti, oni mogu biti određeni za mnogo mjeseci, godina, pa čak i cijeli život, obavljanje zaštitnu funkciju od povratka (relapsa) bolesti, au nekim slučajevima onemogućujući sekundarni razvoj patologije. Ako se količina imunoglobulina G ponovno počela povećavati, tada se može posumnjati reinfekcija. Sličan zaključak može se izvući provođenjem dva ili tri uzorka uzeta u razmaku od 2 tjedna.
Imunoglobulin D (IgD) nalazi se na B-limfocitima, u maloj je koncentraciji u zdravi ljudi. Nakon 10 godina života dostiže svoje maksimalne vrijednosti. Količina imunoglobulina D povećava se tijekom trudnoće, kod pacijenata sistemske bolesti vezivno tkivo, bolesti uzrokovane imunodeficijencijom.
Indikacije za imenovanje enzimskog imunološkog testa
Određivanje protutijela na prisutnost u tijelu patogenih mikroba koji uzrokuju:
- trihomonijaza;
- ureaplazmoza i.
Dolazi do porasta broja imunoglobulina i sa.
Dijagnostika se provodi kako bi se otkrilo:
- herpetične bolesti;
- skupine virusnog hepatitisa;
- Epstein-Barr virus;
- citomegalovirus.
Uz pomoć ELISA-e moguće je utvrditi prisutnost protutijela na 600 vrsta alergena, otkriti stanje imunodeficijencije, provesti sveobuhvatan pregled prije operacije transplantacije i provesti sveobuhvatnu analizu za učinkovitost liječenja.
ELISA je dodatna metoda za otkrivanje stanica raka.
Kako se radi ELISA test krvi?
Za imunoenzimski test, u većini slučajeva, koristi se krv pacijenata, ponekad se uzimaju staklovina, tekućina spinalnog kanala i amnionska tekućina.
Krv se izvlači kroz injekcijsku iglu u štrcaljku iz kubitalne vene. Studija se provodi na prazan želudac. Treba imati na umu da uzimanje određenih lijekova može utjecati na rezultat analize. Prije davanja krvi morate se suzdržati od pušenja, pijenja alkohola. Korištenje narkotičkih tvari može iskriviti rezultate.
U slučaju negativnih vrijednosti imunoglobulina IgM, IgG, IgA, možemo govoriti o odsutnosti bolesti ili njenoj početnoj fazi, a moguć je i rezultat s minusima uz potpuni oporavak nakon značajnog vremena.
Ako IgA i IgM nisu dokazani, a IgG je pozitivan, tada je najvjerojatnije riječ o formiranoj imunosti nakon zarazne bolesti, odnosno nakon cijepljenja.
U slučaju visokog titra IgM uz negativne vrijednosti IgG, IgA, može se zaključiti da se radi o akutnoj zaraznoj bolesti.
Istovremene pozitivne vrijednosti rezultata imunoglobulina - IgA, IgM, IgG karakteristične su za akutnu fazu recidiva postojeće kronične bolesti.
Za kroničnu infekciju koja je u fazi remisije procesa, ELISA pokazuje negativne vrijednosti imunoglobulina M (IgM), dok će nalaz imunoglobulina G (IgG) i A (IgA) biti pozitivan.
Prednosti metode enzimskog imunološkog ispitivanja
Glavne prednosti ELISA metode su:
- niska cijena analize;
- dijagnostička specifičnost, točnost;
- dinamička kontrola (ponoviti analizu za određivanje učinkovitosti liječenja i stadija bolesti);
- mogućnost provođenja masovnih pregleda u žarištima infekcije;
- brzina dobivanja rezultata;
- relativna jednostavnost analize;
- mogućnost korištenja informacijske tehnologije u obradi;
- sigurnost i bezbolnost za pacijenta.
Postoje li neki nedostaci ELISA testa krvi?
Glavna negativna točka studije je mogućnost dobivanja lažno negativnih i lažno pozitivnih podataka. Uzrok nesporazuma mogu biti tehnički nedostaci, uzimanje lijekova koji mogu iskriviti sliku.
ELISA se koristi za otkrivanje:
- (ascaris, pinworms);
- oštar i kronični oblik opisthorchiasis;
- trihinoza;
- prisutnost lamblije (kao dodatna analiza);
- oblici lišmanioze;
- amebijaza;
- sadržaj toksoplazme;
Zaključno treba napomenuti da je suvremena imunologija u stalnoj fazi razvoja, tražeći nove metode dijagnostike i liječenja bolesti.
Stepanenko Vladimir, kirurg
