Coombs deneme anlamları ve tanımları. Coombs'un doğrudan testi

- Rh-pozitif kanın eritrositlerinin yüzeyinde bulunan spesifik bir protein olan Rh faktörüne karşı Rh-negatif kanda eksik anti-eritrosit antikorlarını saptamayı amaçlayan bir antiglobulin testi. Bu testin iki türü vardır: doğrudan - kırmızı kan hücrelerinin yüzeyindeki antikorların tespiti, dolaylı - kan serumundaki antikorların tespiti. Kan hastalıklarının teşhisi ve tedavisinin izlenmesinde doğrudan bir test yapılır: hemolitik anemi, hemolitik hastalık yeni doğanlar ve diğerleri. Transfüzyon sırasında vericinin ve alıcının kanının uyumluluğunu değerlendirmek ve ayrıca hamileliği planlarken ve yönetirken Rh çatışmasının varlığını ve riskini belirlemek için dolaylı bir test yapılır. Coombs testi için malzeme oksijensiz kan, çalışma aglütinasyon reaksiyonuna dayalı yöntemlerle gerçekleştirilir. Normalde her iki test de negatif sonuç verir. Analiz bir gün içinde gerçekleştirilir.

Coombs testi - klinik çalışma Rh faktörüne karşı antikorların saptanmasını amaçlayan Rh negatif kan. Test, Rh çatışması ve hemolitik reaksiyonlar geliştirme riskini belirlemek için kullanılır. Her insanda, eritrositlerin yüzeyi belirli bir dizi antijen veya aglütinojen içerir - varlığı veya yokluğu kan grubunu ve Rh faktörünü yargılamak için kullanılan çeşitli yapıdaki bileşikler. Tıbbi uygulamada birçok antijen türü vardır, kan grubunu belirleyen aglütinojen A ve B ve Rh faktörü olan aglütinojen D, pratik açıdan en büyük öneme sahiptir. Pozitif bir Rh faktörü ile, eritrositlerin dış zarında D antijenleri negatif olarak tespit edilir - hayır.

Antiglobulin testi olarak da adlandırılan Coombs testi, kandaki Rh faktör sistemine karşı tamamlanmamış anti-eritrosit antikorlarını saptamayı amaçlar. Rh faktörüne karşı antikorlar, Rh-negatif kanda D aglütinojenleri olan eritrositler girdiğinde üretilen spesifik immünoglobulinlerdir.Bu, fetüsün ve hamile kadının kanının önceden kan tayini yapılmadan yapılan kan transfüzyonları ile karıştırılması durumunda meydana gelebilir. Coombs testinin iki versiyonu vardır - doğrudan ve dolaylı. Doğrudan bir Coombs testi yapılırken, kırmızı kan hücrelerinin yüzeyine yapışık antikorlar saptanır. Çalışma, hemolitik reaksiyonun nedenini belirlemek için kullanılır. Dolaylı Coombs testi, kan plazmasındaki anti-eritrosit antikorlarını saptamayı amaçlar. Vericinin ve alıcının veya annenin ve fetüsün kanının uyumluluğunu belirlemek gerekir, Rh çatışmasının ve ardından kırmızı kan hücrelerinin hemolizinin gelişmesini önlemeye yardımcı olur.

Coombs testinin her iki varyantı için kan bir damardan alınır. Analiz, antiglobulin serum kullanılarak aglütinasyon yöntemiyle gerçekleştirilir. Çalışmanın sonuçları hematolojide hemolitik reaksiyonların nedenlerini belirlemede, cerrahi ve resüsitasyonda kan transfüzyonları sırasında, kadın doğum ve jinekolojide Rh-negatif kanı olan kadınlarda gebeliklerin izlenmesinde kullanılmaktadır.

Belirteçler

Kırmızı kan hücrelerinin yüzeyine bağlı antikorları tespit eden doğrudan Coombs testi, çeşitli kökenlerden hemolitik reaksiyonlar (kırmızı kan hücrelerinin yok edilmesi) için reçete edilir. Çalışma, birincil otoimmün hemolitik anemi, transfüzyon sonrası hemolitik anemi, yenidoğanın hemolitik hastalığı, otoimmün, neoplastik veya bulaşıcı hastalıkların neden olduğu eritrositlerin hemolizinin yanı sıra alınması için endikedir. ilaçlarörneğin kinidin, metildopa, prokainamid. Kan plazmasındaki antikorları tespit eden dolaylı Coombs testi, Rh çatışmasının gelişmesini önlemek için kullanılır. Çocuğun gelecekteki babasının pozitif bir Rh faktörüne sahip olması koşuluyla, kan nakli için hazırlanan hastalar ve ayrıca Rh faktörü negatif olan hamile kadınlar için endikedir.

Rh uyumluluğunu belirlemek için Rh pozitif kanı olan hastalara Coombs testi uygulanmaz. Bu durumlarda, kırmızı kan hücrelerinin yüzeyinde zaten antijenler vardır, antikor üretimi kan transfüzyonu veya hamile kadının kan dolaşımına fetal kanın girmesi ile tetiklenemez. Ayrıca, her iki ebeveynin de kalıtsal resesif bir özellik olan negatif bir Rh faktörü varsa, çalışma hamile kadınlar için endike değildir. Bu tür çiftlerdeki bir çocuğun her zaman Rh negatif kanı vardır, anne ile immünolojik bir çatışma imkansızdır. Hemolitik patolojilerde, sonuçlar eritrosit yıkım sürecinin aktivitesini yansıtmadığından, tedavinin başarısını izlemek için antiglobulin testi kullanılmaz.

Coombs testinin sınırlaması, araştırma prosedürünün karmaşıklığıdır - güvenilir sonuçlar elde etmek için sıcaklık ve zaman koşullarına, reaktifleri ve biyomateryal hazırlama kurallarına uymak gerekir. Coombs testinin avantajı, yüksek duyarlılığıdır. Hemolitik anemide hemoglobin, bilirubin ve retikülositler normale dönse bile bu testin sonuçları pozitif kalır.

Analiz için hazırlık ve materyal toplama

Coombs testini gerçekleştirmek için kullanılan materyal venöz kandır. Kan alma prosedürünün zamanı ve hastanın hazırlanması için özel bir gereklilik yoktur. Her çalışmada olduğu gibi en az 4 saat yemek yedikten sonra ara verilmesi ve son 30 dakikada sigaranın bırakılması önerilir, fiziksel aktivite duygusal stresten kaçının. İlaç almayı bırakma gereğini önceden doktorunuzla görüşmeye değer - bazı ilaçlar Coombs testinin sonuçlarını bozabilir. Kan kübital damardan bir şırınga ile alınır, daha az sıklıkla elin arkasındaki damardan alınır. Birkaç saat içinde malzeme laboratuvara teslim edilir.

Direkt Coombs testi yapılırken hastanın kan serumuna antiglobulin serumu eklenir. Bir süre sonra karışım, aglütinatların varlığı açısından incelenir - kırmızı kan hücrelerinde antikorlar varsa oluşurlar. Pozitif bir sonuçla, aglütinasyon titresi belirlenir. Dolaylı Coombs testi daha fazla adımdan oluşur. İlk olarak serumda bulunan antikorlar inkübasyon sırasında enjekte edilen eritrositlere sabitlenir. Daha sonra numuneye antiglobulin serum eklenir, bir süre sonra aglütinatların varlığı ve titresi belirlenir. Analiz süresi 1 gündür.

normal sonuçlar

Normalde direkt Coombs testinin sonucu negatiftir (-). Bu, kanda kırmızı kan hücreleriyle ilişkili antikorların olmadığı ve hemolize neden olamayacakları anlamına gelir. normal sonuç dolaylı Coombs testi de negatiftir (-), yani kan plazmasında Rh faktörüne karşı antikor yoktur. Alıcı için kan transfüzyonu için hazırlanırken bu, donörün kanıyla uyumluluk anlamına gelir, hamileliği izlerken - annede Rh duyarlılığının olmaması, Düşük risk immünolojik çatışmanın gelişimi. Beslenme alışkanlıkları gibi fizyolojik faktörler veya fiziksel aktivite, testin sonucunu etkileyemez. Bu nedenle, sonuç olumlu ise, bir doktor konsültasyonu gereklidir.

Analizin teşhis değeri

Pozitif bir Coombs test sonucu niteliksel olarak (+) ila (++++) arasında veya niceliksel olarak 1:16 ila 1:256 titrelerinde ifade edilir. Eritrositler üzerindeki ve kan serumundaki antikor konsantrasyonunun belirlenmesi her iki numune türünde de yapılır. Direkt Coombs testinin pozitif çıkması ile kırmızı kan hücrelerinin dış zarında antikorlar saptanır ve bu kan hücrelerinin yıkımına yol açar. Nedeni, önceden tiplendirme yapılmadan kan transfüzyonu olabilir - transfüzyon sonrası hemolitik reaksiyonun yanı sıra yenidoğanın eritroblastozu, ilaç kullanımına bağlı hemolitik reaksiyon, birincil veya ikincil otoimmün hemolitik anemi. Eritrositlerin sekonder yıkımına sistemik lupus eritematozus, Evans sendromu, Waldenström makroglobulinemisi, paroksismal soğuk hemoglobinüri, kronik lenfositik lösemi, lenfoma, enfeksiyöz mononükleoz, sifiliz, mikoplazmal pnömoni neden olabilir.

Dolaylı Coombs testinin pozitif sonucu, plazmada Rh faktörüne karşı antikorların varlığını gösterir. Uygulamada bu, Rh duyarlılığının meydana geldiği, hamilelik sırasında donör kanının infüzyonundan sonra bir Rh çatışması gelişme olasılığı olduğu anlamına gelir. Gebelik komplikasyonlarını önlemek için Coombs testi pozitif olan kadınlar özel kayıtlara alınır.

Normdan sapmaların tedavisi

Coombs testi, izoserolojik çalışmaları ifade eder. Sonuçları, Rh çatışmasının gelişmesini önlemek için hemolitik bir reaksiyonu tanımlamanın yanı sıra donör ve alıcının, anne ve fetüsün kanının uyumluluğunu belirlemeyi mümkün kılar. Testin sonucu pozitifse, ilgili hekimden - doğum uzmanı-jinekolog, hematolog, cerrahtan tavsiye almanız gerekir.

Doğrudan Coombs testi. Bu testin yardımıyla çocuğun eritrositleri tarafından sabitlenen bloke edici antikorların varlığı kanıtlanır. Pozitif bir doğrudan test, sensitizasyonu gösterir ve diğerlerinin ortaya çıkmasından önce bile yenidoğanın hemolitik hastalığının güçlü bir göstergesidir. klinik işaretler. Bir istisna olarak ve yalnızca çok Sunum dosyaları Doğrudan bir Coombs testi, hassaslaştırılmış eritrositlerin halihazırda başlamış, neredeyse tamamen hemolizi nedeniyle negatif olabilir.

Direkt Coombs testi şu şekilde yapılır: Çocuğun topuğundan alınan 5 damla kan bir test tüpüne konur ve üzerine 5 ml salin eklenir. İyice karıştırın ve 10 dakika santrifüjleyin. Eritrosit sedimentinden berrak bir sıvı ayrılır. Daha sonra tekrar 5 ml salin ekleyin, karıştırın ve santrifüjleyin. Salin ile üç kez karıştırıldıktan sonra eritrositler iyice yıkanır. Süpernatanın son ayrılmasından sonra 0,1 ml miktarındaki eritrosit sedimenti 0,9 ml salin ile karıştırılır. Bu karışımdan 2-3 damla cam bir lam üzerine uygulayın ve bir damla Coombs serumu ekleyin. Aglütinasyonun varlığı, reaksiyonun pozitif olduğunu gösterir (pozitif direkt Coombs testi). Çalışma, soğuk aglütininlerin etkisini önlemek için 16°C'nin üzerindeki oda sıcaklığında yapılmalıdır.

Dolaylı Coombs testi anne serumunda serbest antikorların varlığının kanıtı olarak hizmet eder ve anne serumu ile yapılır.

Rh uyuşmazlığı olan bir yenidoğanda hemolitik hastalık genellikle ikinci gebelikten sonra kendini gösterir. İlk çocuk sağlıklı doğar, ikincisi hafif anemi belirtileriyle doğar ve ancak üçüncü hamilelikten sonra çocuklar kansızlıkla doğar. açık işaretler hemolitik hastalık. Sadece ilk hamilelik sırasında önceden duyarlı hale getirilmiş kadınlarda hemolitik hastalık semptomları olan bir çocuk doğabilir. Bazı durumlarda aşılama, kürtajlara ve ölü doğumlara neden olur. Hastalığın başlangıcı ve şiddeti için plasentanın durumu ve fetüs üzerinde maternal aglütininlere maruz kalma süresi önemlidir. Aglütininlerin doğumdan 10-14 hafta önce ortaya çıkması ile çocukta genellikle subklinik formlar görülür. Aglütininlerin doğumdan 15-26 hafta önce erken ortaya çıkması, hastalığın ciddi formlarına neden olur. Hastalığın tüm formlarında ana süreç hemolizdir. Antijen-antikor reaksiyonunun sonucu hemolizdir, hepatik ve beyin kılcal damarlarına zarar verir. Hangi lezyonun baskın olduğuna bağlı olarak, ayrıca çeşitli formlar hastalıklar. Bazı anafilaktik olaylar da tehlikelidir. Karaciğer hücrelerinde ve özellikle bazal çekirdeklerin ganglion hücrelerinde, amon boynuzunda, medulla oblongata'da ve hatta serebral kortekste ciddi hasara neden olan histamin benzeri maddelerin oluşumuna yol açarlar. Karaciğer hücrelerinin hasar görmesi ile karaciğer dışı sarılığa hepat sarılığı eklenir. Çocuklar ciddi nükleer sarılık semptomlarıyla ölüyor. Hayatta kalırlarsa, lezyonların semptomları kalır. gergin sistem(ekstrapiramidal sistemin koreoatetik hareketlerle ihlali, bir tür dans yürüyüşü, başın zorla hareketleri, bazen istemli hareketlerin koordinasyonunda sık sık düşme ile bir bozukluk, artan ton kaslar, zeka geriliği, yani sözde belirtileri olan. ensefalopati posticteria infantum).

Eksik anti-eritrosit antikorlarını tespit etmek için tasarlanmış bir antiglobulin testi, 1945'te Coombs, Morant, Reis tarafından önerildi ve daha sonra Coombs testi olarak adlandırıldı. Bu yöntemin özü, insan immünoglobulinlerine karşı antikorlar içeren antiglobulin serumunun, eksik antikorlarla duyarlılaştırılmış eritrositlerle reaksiyona girdiğinde bunların aglütinasyonuna yol açmasında yatmaktadır.

Antikorların kırmızı kan hücrelerinin yüzeyinde fikse veya kan plazmasında serbest olmasına bağlı olarak, doğrudan veya dolaylı bir Coombs testi kullanılır.

İncelenen kırmızı kan hücrelerinin zaten olduğuna inanmak için sebeplerin olduğu durumlarda doğrudan bir Coombs testi yapılır. in vivo uygun antikorlarla hassaslaştırıldı, örn. Reaksiyonun ilk aşaması - antikorların eritrositlerin yüzeyinde sabitlenmesi - vücutta meydana gelir ve ardından antiglobulin serumunun eklenmesi, duyarlı hücrelerin aglütinasyonuna neden olur.

Dolaylı Coombs testi kullanılarak, test serumunda bulunan eksik antikorlar tespit edilir. Bu durumda, reaksiyon iki aşamada ilerler. İlk aşama, test eritrositlerinin test serumu ile inkübasyonudur, bu sırada test serum örneğinde bulunan antikorlar eritrosit yüzeyinde sabitlenir. İkinci aşama, antiglobulin serumunun eklenmesidir.

Şimdiye kadar, Coombs testi, hücre zarının antikorlara ve (veya) bileşenlerine bağlanması nedeniyle eritrositlerin yok edilmesiyle karakterize edilen, özellikle otoimmün hemolitik anemiler olmak üzere immünopatolojik durumların teşhisi için laboratuvar pratiğinde yaygın olarak kullanılmıştır. tamamlayıcı sistem. Yardımı ile eritrosit zarında komplemanı ve bazen komplemanı (C3d) aktive edebilen Ig G'nin (genellikle Ig G1 ve Ig G3) varlığı tespit edilir. Ancak hastalığın akut döneminde üzerinde eritrositlerin yıkımı nedeniyle çok sayıda antikorlar, hemolitik kriz ile ve ayrıca hastalığın kronik seyrinde yetersiz miktarda antikor ile, negatif bir doğrudan Coombs testi not edilebilir.

Dolaylı Coombs testinin geçerliliğini koruduğu vurgulanmalıdır. en iyi yöntem donör ve alıcının eritrosit antijenleri için bireysel uyumluluğunu en doğru şekilde belirlemenize izin verdiği için transfüzyon ortamının bireysel seçimi.

Nakil öncesi dönemde tüm organ ve doku alıcılarının ve nakilden sonra da hematopoietik kök hücre alıcılarının muayenesinde otoantikorların varlığı için ek bir doğrudan antiglobulin testi önerilir.

İmmünohematoloji ve transfüzyona ek olarak, antiglobulin testleri bir dizi patolojik durumun tanısında yaygın olarak kullanılmaktadır: lenfoproliferatif olanlar dahil hematolojik hastalıklarda, sistemik hastalıklar bağ dokusu, Sjögren hastalığı, kronik aktif hepatit vb.

Coombs testleri tıbbi genetik ve adli tıpta yüzey eritrosit antijenlerini belirlemek için aktif olarak kullanılmaktadır.

Coombs testi, uygulanmasında özel dikkat gerektiren oldukça zaman alıcı bir araştırma yöntemidir. Kullanırken, özellikle zayıf pozitif reaksiyonların yorumlanmasıyla ilgili bazı zorluklar vardır. Coombs testleri yapılırken yanlış zayıf pozitif veya negatif reaksiyonların, eritrositlerin yetersiz etkili bir şekilde yıkanmasının, antiglobulin reaktifinin eser miktarda serumla nötrleştirilmesinin ve üzerine antiglobulinin sabitlenebileceği yağdan arındırılmamış bir yüzeyle temasın sonucu olabileceği bilinmektedir. etkinliğini kaybediyor. Coombs testinin diğer bir dezavantajı, hazırlanması ve saklanması belirli özelliklere sahip olan antiglobulin reaktifinin instabilitesidir, bu da antiglobulin serumu ile hemaglutinasyon reaksiyonunun ölçülmesini zorlaştırır.

Ayrıca A. Holburn, D. Voak ve ark. , kırmızı hücre süspansiyonunun yeniden süspanse edilmesi sırasında aşırı sallamanın yanlış negatif sonuçlara neden olabileceğini gösterdi. Antiglobulin testleri yapılırken hatalı sonuçlar ayrıca antiglobulin reaktifinde antikomplementer antikorların, özellikle inkübasyon sırasında test eritrositlerinin yüzeyinde adsorbe olan ve oluşturan C3d, C3c, C4c ve C4d kompleman bileşenlerinin bir karışımının varlığından da kaynaklanabilir. olumlu bir sonucun görünümü.

Bu eksiklikler, test numunelerinin iyice yıkanması ve reaksiyon koşullarının kontrol edilmesiyle kolayca giderilebilir.

Son on yılda, dolaylı Coombs testinin süresini ve duyarlılığını azaltmak için düşük iyonik güçlü izotonik salin (LISS) kullanılmıştır.

Bazı yazarlara göre antiglobulin testlerinin tartışılmaz avantajı, çözünürlüğü önemli ölçüde aşan yüksek duyarlılıklarıdır. alternatif yöntemler aglütine olmayan antikorları saptamak için kullanılan testler.

Poliglusin, jelatin ve antiglobulin serumu kullanarak eksik antikorların varlığı için kan serumu inceleme yöntemlerinin çözünürlüğünü karşılaştırdık. Çalışma süresince, jelatin, poliglüsin ve indirekt antiglobulin testleri kullanılarak izoimmün donörlerin 140 kan serum örneğinde tamamlanmamış anti-D antikorlarının titreleri izlendi. Bu yöntemlerin beyanı genel kabul görmüş yöntemlere göre yapılmıştır.

Çözünürlükleri açısından, anti-D antikorları ile eritrosit duyarlılığını saptamaya yönelik yöntemlerin şu şekilde düzenlendiği bulunmuştur: en duyarlı olan dolaylı Coombs testi, ardından jelatin testi ve en az bilgilendirici olan poliglusin testidir. Bu deney serisinde elde edilen sonuçlar, Coombs testlerinin duyarlılığının yeterince yüksek olduğu sonucuna varmamıza izin veren literatür verilerine tamamen karşılık gelir, bu da anti-eritrosit antikorlarının varlığını yüksek bir kesinlikle tanımlamayı mümkün kılar. vücutta kırmızı kan hücrelerinin aglütinasyonuna neden olmaz.

Bununla birlikte, Coombs testlerinin uygulanmasında, hastalığın klinik tablosu veya önceki aşılama olası varlıklarını gösterse de, eksik antikorların tespit edilmediği durumlar vardır. Bu gibi durumlarda, antikor miktarının antiglobulin serum antikorları tarafından çökeltilmesi için yeterli olmadığı varsayılabilir.

Bu sonuç, hücrelerin analitik mikroelektroforez yöntemi kullanılarak, dolaylı Coombs testinde tespit edilmeyen test eritrositlerinde anti-D antikorlarının varlığının tespit edildiği kendi deneyimizle doğrulandı. Bu deney serisinde, antiglobulin serumu, önceden aşılanmış donörlerin kanından elde edilen serumlarla inkübe edilmiş eritrositlere, hareket halindeyken, yani antikor oluşumu döneminde eklendi. Coombs testi de dahil olmak üzere bilinen yöntemlerin içlerinde antikor tespit edemediği dönemde.

Yapılan çalışmalarda eritrositlerin yüzeyinde inkomplet antikorların varlığına dair kanıtlar istatistiksel olarak Önemli değişiklik antiglobulin serumu eklendikten sonra duyarlılaştırılmış kırmızı kan hücrelerinin elektroforetik mobilite değerleri. Akabinde, indirekt Coombs testinde tüm bağışıklı donörlerin kan serumunda anti-D antikorlarının saptandığına dikkat edilmelidir.

Gillerand ve ark. antiglobulin testlerinin belirli bir hassasiyet eşiği ile karakterize edildiğini de göstermiştir: pozitif bir sonuç, yalnızca bir eritrosit yüzeyinde en az 500 Ig G molekülü sabitlendiğinde not edilir.

Ek olarak, literatürde, olası bir negatif Coombs sonucunun, kırmızı kan hücrelerini hassaslaştıran antikorların düşük afinitesinden kaynaklanabileceğine ve bunun sonucunda yıkama sırasında kırmızı kan hücrelerinin yüzeyinden kolayca ayrıştırıldığına dair kanıtlar vardır.

Yukarıdakilerin ışığında, bazı durumlarda Coombs testinin negatif bir sonucunun, eritrositlerin yüzeyinde sabitlenmiş antikorların bulunmadığının kanıtı olmadığı sonucuna varılabilir.

Coombs reaksiyonlarının oldukça spesifik olduğu ve çoğu eksik antikor tipinin saptanmasına izin verdiği bilinmektedir. Bununla birlikte, bazı deneysel verilerin gösterdiği gibi, antiglobulin testleri immünolojik olmayan durumlarda da pozitif olabilir. E. Muirhead ve ark. fenilhidrazin uygulamasından sonraki ikinci günde köpeklerin Coombs testinin pozitif olduğu gözlendi. Pozitif reaksiyonun bu kadar hızlı bir şekilde ortaya çıkması, immünolojik doğasına karşı tanıklık eder ve daha ziyade, eritrositlerin yüzeyinde proteinin spesifik olmayan adsorpsiyonu ile ilişkilidir.

M. Williams ve ark. klavulanik asidin, yazarlara göre eritrosit yüzeyinde plazma proteinlerinin spesifik olmayan adsorpsiyonu ile ilişkili pozitif bir reaksiyona da neden olabileceğini buldu. Sefalosporin antibiyotiklerle yapılan tedavide de benzer bir etki gözlenmiştir.

Yukarıdaki çalışmaların yazarları, Coombs testlerinden elde edilen pozitif sonuçların immünolojik olmayan doğasını vurgulamakta ve bu maddelerin, eritrositlerin proteinleri (özellikle, normalde kan plazmasında bulunan ve antikor özelliklerine sahip olmayan albümin). Ek olarak, hücre zarı ile plazma proteinleri arasında bir bağlantı görevi gören, hücre yüzeyinde adsorbe edilen ksenobiyotik olması da mümkündür.

Antiglobulin testleri kurma sonuçlarının doğru yorumlanması için, periferik kandaki genç ve olgun eritrositler arasındaki kantitatif oran da dikkate alınmalıdır. Geliştirilmiş eritron rejenerasyonu döneminde vücuttan izole edilen retikülositlerin antiglobulin serumu ile aglütine olabileceği bulundu.

Pozitif direkt antiglobulin test sonucu Bozuklukların eşlik ettiği çeşitli patolojik durumlarda da kullanılır. bağışıklık sistemi, inflamatuar süreçler eritrosit membranlarında farklı özgüllükteki antikorların spesifik olmayan adsorpsiyonuna yol açar. Bu, Ig G moleküllerinin Ig G molekülleri ile etkileşime girmediğini göstermektedir. spesifik antijenler eritrositler, ancak yalnızca incelenen hücrelerin yüzeyinde sabitlenir.

Coombs testini, disproteinemi gelişimi veya paraproteinlerin ortaya çıkması ile karakterize edilen hastalıklarda ayarlarken, pozitif bir sonucun, özelliklere sahip olmayan proteinlerin eritrositlerinin yüzeyinde bulunmasından kaynaklandığı akılda tutulmalıdır. antiglobulin testlerinin, yardımlarıyla tespit edilen proteinin doğasına ilişkin yetersiz özgüllüğünü de gösteren antikorlar.

Bu nedenle, çok sayıda çalışmanın gösterdiği gibi, doğrudan ve dolaylı antiglobulin testlerinin pozitif sonuçları, antikorların varlığının mutlak kanıtı değildir, çünkü vücudun izosensitizasyonu veya otosensitizasyonu ile ilişkili olmayan çeşitli patolojik durumlarda da pozitif reaksiyonlar gözlemlenebilir. Bu nedenle, yalnızca çeşitli immünserolojik yöntemlerin sonuçlarının karşılaştırılması klinik tablo hastalık, gelişen patolojik süreci tam olarak yargılamanıza izin verir.

Negatif direkt test ile pozitif indirekt antiglobulin testi, genellikle önceki kan transfüzyonları veya gebeliklerle ilişkili olarak test serumunda serbest alloantikorların varlığını gösterir.

Paroksismal noktürnal hemoglobinürinin şiddetlenmesi sırasında Coombs testi genellikle pozitiftir; anti-C3 ve anti-C3dg ile pozitif bir Coombs testi, soğuk aglütinin hastalığının bir belirtecidir.

Yenidoğanın hemolitik hastalığı gelişme riskinin yüksek olduğu durumlarda, büyük önem tanı için (çoğunlukla hamilelik sırasında) ve gerekirse, antikor titresindeki görünümün ve değişimin dinamik olarak izlenmesi için doğrudan ve dolaylı antiglobulin testlerinin sonuçları vardır. Çoğu zaman, yenidoğanın hemolitik hastalığı, anne ve fetüs arasındaki D antijeni için, daha az sıklıkla AB0 sisteminin antijenleri için ve hatta daha az sıklıkla diğer antijenler (C, c, K, vb.) İçin uyumsuzlukla ilişkilidir. Ortaya çıkan antikorlar la, kural olarak, Ig G sınıfının tamamlanmamış antikorları olarak dolaylı bir antiglobulin testinde açıkça saptanır. Bu hastalıkta, hamile bir kadının kanındaki anti-eritrosit antikorlarının seviyesi ile hemolitik hastalığın ciddiyetinin olası prognozu arasında belirli bir ilişki olduğundan, tespit edilen antikorların doğru belirlenmiş titresi ve özgüllüğü büyük önem taşır.

Dolaylı bir Coombs testine de ihtiyaç vardır. klinik uygulama güvenli transfüzyon tedavisi sağlamak için. Uygulanması, donörlerin ve çeşitli alıcı kategorilerinin immünohematolojik çalışmalarının ve ayrıca kan ve bileşenlerinin transfüzyonuna ihtiyaç duyabilecek tüm tıbbi kurumların hastalarının rutin muayenelerinin zorunlu bir bileşenidir.

Dolaylı bir antiglobulin testi aşağıdaki durumlarda kullanılır:

Rh faktörünün diğer yöntemlerle (poliglüsin, jelatin, vb.) belirlenmesinin bulanık sonuçlarıyla Rh ilişkisinin (antijen D) daha doğru bir şekilde belirlenmesi için;

Zayıf eritrosit antijenlerini (Kell, Duffy, Kidd, Lewis vb. sistemler) ve bu antijenlere karşı oluşan antikorları tespit etmek için;

Transfüzyon sonrası hemolitik reaksiyonlara neden olan antikorlar dahil olmak üzere alloimmün anti-eritrosit antikorlarının saptanması ve tanımlanması için;

Transfüzyon hemolitik komplikasyonlarında AB0 sisteminin immün antikorlarının varlığını belirlemek;

Transfüze edilen kanın ve bileşenlerinin bireysel seçimi için uyumluluk testi olarak.

Bu nedenle Coombs testi tıbbın çeşitli alanlarında (hematoloji, obstetrik, romatoloji, transfüzyon, klinik ve laboratuvar tanıları vb.) kullanılan önemli bir tanı testidir. Coombs testinin özelliklerinin bilinmesi, sonuçların güvenilirliğini artırmaya yardımcı olacak ve laboratuvar verilerinin doğru yorumlanmasına katkıda bulunacaktır.

Edebiyat

1. Antikorlar. Yöntemler / ed. Cathy. — M.: Mir, 1991.

2. Bayramalibeyli I.E., Rahimov A.A., Gadzhiev A.B.. // Aneminin transfüzyon tedavisi: ders kitabı. doktorlar için rehber. - M .: Prakt. tıp, 2005. - S. 105-106.

3. Volkova O.Ya., Fregatova L.M., Levchenko L.B.// Transfüzyon. - 2006. - 2 numara. - S.39-62.

4. Donskov S.I.// Rhesus sisteminin kan grupları: teori ve pratik. - M.: VINITI RAN, 2005. - S. 180-186, 195.

5.İmmünoseroloji (normatif belgeler) / komp. A.G. Bashlay, S.I. Donskov. — M.: VINITI RAN, 1998.

6.Klinik uygulamada kan sisteminin araştırılması / ed. GI Kozintsa, V.A. Makarov. — M.: Triada-X, 1997.

7. Levin VI. Akut posthemorajik anemi döneminde eritrodierez ve eritropoez mekanizmasına: Ph.D. dis. ... can. Bal. Bilimler. - Minsk, 1968.

8. Rahimov A.A., Bayramalibeyli I.E.. // Aneminin teşhisi, önlenmesi ve tedavisinin temelleri. - M .: Rusya Federasyonu Sağlık Bakanlığı GOU VUNMT'leri, 2002. - S. 204-209.

9. Chumakova E.D.. // Gerçek problemler hematoloji ve transfüzyon: Belarus Cumhuriyeti hematologlar ve transfüzyonologlar VI Kongresi materyalleri, Minsk, 24-25 Mayıs 2007 / ed. A.I. Svirnovsky, M.P. Potapnev. - Minsk: Hematoloji ve Transfüzyon için Cumhuriyet Bilimsel ve Pratik Merkezi, 2007. - S. 50.

10. Coombs R., Mourant A., Yarış R. // Lanset. - 1945. - Cilt. 2. - S.15.

11. serbest adam J. // J. Clin. Pathol. - 1979. - Cilt. 32. - S. 1014-1018.

12. Holburn AM. kalite kontrol. Hematolojide Yöntemler / ed. Cavill. - Edinburg: Churchill Livingstone, 1982. - Cilt. 4. - S.34-50.

13. Hakan S.// CMAJ. - 2006. - Cilt. 175, No. 8. - S. 919.

14. Komatsu F.// Nippon Rinsho. - 2005. - Cilt. 63 (ek 7). - S.719-721.

15. Komatsu F.// Nippon Rinsho. - 2005. - Cilt. 63 (ek 7). - S.716-718.

16. Molthan L., Reidenberg M.M., Eihman M.F.// Yeni İngilizce J.Med. —1976. — cilt 277. - S. 123-125.

17. Müirhead E.E. korularM., Brian S.. // J. Lab. klinik Med. —1954. — cilt 44. - S.902-903.

18. Rosse WF//hastane Pratik - 1995. - N 105.

19. Voak D., Downie D., MooreB. et al. //Biyotestler Bull. - 1986. - Cilt. 1. - S.41-52.

20. Voak D., Haigh T., Downie D. et al. Antiglobulin testleri için Hücre Yıkama makineleri. Tekrar testi - yaygın olarak kullanılan bir makinenin verimsizliğini gösteren yeni bir yöntem - Sorvall CW1-AF2: DHSS Teknik Şubesine rapor, Şubat 1991.

21. Williams M.E., Thomas D., Harman C.P.. et al. //Antimikrobiyal Ajanlar ve Kemoterapi. -1985. - S.125-127.

22. Zarandona J.M., Yazer M.H.. // CMAJ. - 2006. - Cilt. 174, No. 3. - S. 305-307.

Tıbbi haberler. - 2008. - 3 numara. -S.33-36.

Dikkat! Makale tıp uzmanlarına yöneliktir. Bu makalenin veya parçalarının İnternette orijinal kaynağa köprü olmadan yeniden basılması, telif hakkı ihlali olarak kabul edilir.

Coombs testi- yüzeye yapışık veya plazmada çözünmüş antikorları saptamak için analiz. Yardımı ile bağışıklama ve kırmızı kan hücrelerine karşı antikorlar tespit edilir. İkinci isim antiglobulin testidir. Doğrudan ve dolaylı olarak gerçekleşir.

-de direkt antiglobulin testi eritrositlerin yüzeyine sabitlenmiş antikorları tespit eder. İlaç (metildopa, penisilin, kinin) ve aldıktan sonra diğer otoimmün hastalıklar şüphesiyle yapılır.

Eritrositler in vivo olarak hassaslaştırılmıştır - antikorlar bunlara zaten sıkıca bağlanmıştır ve antiglobulin serumunun (anti-IgG) eklenmesi, hassaslaştırılmış hücrelerin çıplak gözle görülebilecek şekilde birbirine yapışmasına neden olur.

Dolaylı Coombs testi kan plazmasında anti-eritrosit antikorları saptar, kan transfüzyonu öncesi ve sırasında yapılır.

Anti-eritrosit antikorları - bir tür otoantikor, yani kendi dokularına karşı antikorlar. Bir otoantikor, bağışıklık sistemi yüksek doz penisilin gibi bazı ilaçlara anormal derecede reaktif olduğunda ortaya çıkar.

Eritrositler, yüzeylerinde tıpta antijen olarak adlandırılan çeşitli kimyasal yapılar (glikolipidler, sakkaritler, glikoproteinler ve proteinler) içerirler. Bir kişi, ebeveynlerinden her kırmızı kan hücresinde belirli bir antijen haritası alır.

Antijenler gruplar halinde birleştirilir ve bunun yanında kan birkaç gruba ayrılır - AB0 sistemine göre Rh, Kell, Lewis, Kidd, Duffy. Bir doktorun çalışmasında en ünlü ve önemli olan AB0 ve Rh faktörüdür (Rh).

AB0 sistemi

Bir kişinin Rh-bağlılığı, bu antijenlerin varlığı ile belirlenir. Özellikle önemli bir eritrosit antijeni, antijen D'dir. Varsa, o zaman hakkında konuşurlar. Rh-pozitif kan RhD ve değilse - hakkında Rh negatif Rhd.

Karşılık gelen antikor, eritrosit antijenlerine katılırsa, eritrosit yok edilir - olacak hemoliz.

Belirteçler

için ana endikasyon doğrudanantiglobulin testi- Hemolitik anemi şüphesi. Çoğu zaman primer otoimmün hemolitik anemi, romatizmal hemoliz, tümör ile gerçekleştirilir, bulaşıcı hastalıklar ilaca bağlı hemoliz.

Kan naklinden birkaç gün veya ay sonra anemi veya yenidoğanda uzun süreli sarılık görülürse, doğrudan bir Coombs testi de yapılır.

Dolaylıantiglobulin testi yapıldı kan transfüzyonundan önce ve Rh negatif bir kadının hamileliği sırasında.

Otoimmün hemolitik anemi

Otoimmün hemolitik anemi (birincil) nedeni bilinmeyen klasik bir otoimmün hastalıktır. Bağışıklık sistemi içindeki etkileşim bozulur, bu da kişinin kendi eritrositlerini yabancı olarak algılamasına yol açar. Lenf düğümlerinde, eritrosit yüzeyine bağlandığında bir dizi enzimi başlatan IgG sınıfı antikorlar (t 37 ° C'de reaksiyona girer) ve / veya IgM (t 40 ° C'de) sentezlenir. tamamlayıcı sistem) ve eritrosit duvarını "delin", bu da yıkımına - hemolize yol açar.

İlk belirtiler hem kırmızı kan hücrelerinin yıkımına hem de hemoglobinin azalmasına bağlıdır. Aralarında:

• yorgunluk, genel halsizlik, sinirlilik
• nefes darlığı
• karın ve göğüs ağrısı, mide bulantısı
• koyu idrar rengi
• sırt ağrısı
• cilt ve mukoza zarlarının ikterik renklenmesi
• eritrosit sayısında azalma ve

pozitif doğrudan sonuç Coombs testi Otoimmün hemolitik anemi tanısını %100 doğrular ve otoimmün kökenini kanıtlar. Aynı zamanda, negatif bir sonuç tanının kaldırılmasını mümkün kılmaz.

İkincil hemolitik anemi

İkincil otoimmün hemolitik anemi ve pozitif bir Coombs testi aşağıdaki hastalıklarda olabilir:

• Evans sendromu
• pnömoni enfeksiyonu

Bu hastalıklarda pozitif bir antiglobulin testi, bir tanı kriteri değil semptomlardan biridir.

Yenidoğanın hemolitik hastalığı

Neden yenidoğanın hemolitik hastalığı anne ve fetüsteki kan grubunun uyumsuzluğu, çoğu durumda Rh sistemine göre, tek vakalarda - AB0 sistemine göre, casuistik olarak - diğer antijenlere göre.

Rh-negatif bir kadında fetüs babasından Rh-pozitif kan almışsa, Rh-çatışma gelişir.

Yeni doğmuş bir bebekte hastalık, yalnızca anne, önceki gebeliklerden, kürtajlardan, uyumsuz kan transfüzyonlarından sonra meydana gelen karşılık gelen antijenlere karşı antikorlar geliştirmişse gelişir. En yaygın neden eritrosit zarının antijenlerine karşı antikor sentezinin başlatılması - doğum (feto-anne kanaması). İlk doğumlar genellikle komplikasyonsuz geçer, ancak sonraki doğumlar doğumdan sonraki ilk günlerde yenidoğanın hemolitik hastalığı ile doludur.

Yenidoğanın hemolitik hastalığının belirtileri:

• cilt sarılığı
• ve mukus
• karaciğer ve dalak büyümesi
• solunum bozuklukları
• tüm vücudun şişmesi
• merkezi sinir sisteminin uyarılması ve kademeli olarak depresyonu

Kan nakli sonrası anemi

Dolaylı Coombs testi uyumluluğu değerlendirmek için kan transfüzyonundan önce ve doğrudan bir Coombs testi - transfüzyon sonrası hemolizden şüpheleniliyorsa, yani ateş, sulanma gibi belirtileriniz varsa (aşağıyı okuyun). Testin amacı, alıcının RBC'lerine bağlanan ve transfüzyon sonrası hemolizin yanı sıra donör RBC'lerin alıcının (alıcının) dolaşımından erken çıkarılmasına neden olan transfüze edilmiş RBC'lere yönelik antikorları saptamaktır.

Belirtiler:

• vücut ısısında artış
• ciltte kızarıklık
• sırt ağrısı
• kırmızı
• mide bulantısı
• baş dönmesi

şifre çözme

Doğrudan ve dolaylı antiglobulin testlerinin kodunu çözmek için temel kuralların aynı olduğunu hatırlamakta fayda var. Tek fark, antikorların yeridir - kanda veya zaten eritrosit üzerinde.

• Eğer direkt Coombs testi negatif- bu, antikorun eritrositler üzerinde "oturmadığı" ve semptomların nedeninin daha fazla aranması ve gerçekleştirilmesi gerektiği anlamına gelir. dolaylı örnek Coombs
• kan transfüzyonu, enfeksiyonlar, ilaçlar sonrası pozitif bir Coombs testi sonucu tespit edilirse - pozitiflik 3 aya kadar sürer (eritrosit ömrü 120 gün - 3 ay)
• pozitif antiglobulin test sonucu Otoimmün rahatsızlığı aylar hatta yıllar sürer

Norm

• direkt Coombs testi - negatif
• dolaylı Coombs testi - negatif

Niteliksel olarak, pozitif bir sonuç birden dörde (+, ++, +++, ++++) artı sayısında ve nicel olarak dijital biçimde - 1:16, 1:256, vb.

Evet. Kan transfüzyonu almış olmanız, şimdi test sonuçlarının doğru yorumlanmasını etkilediğinden doktorunuz tarafından bilinmelidir. Başkasının kanını alırken (birçok kez test edilmiş kan olsa da), vücudunuzun transfüze edilen kana karşı antikor geliştirme olasılığı her zaman vardır. Sağlık üzerinde olumsuz bir etkisi olacak olan bu antikorlardır. Sonraki kan transfüzyonlarında, doktor zaten transfüzyon aldığınızı bilmelidir, bu da antikorların sentezi için zamanın olduğu anlamına gelir. Hamile kadınlar için bu bilgi daha da önemlidir.

3. Anne ile bebek arasında Rh faktörü uyumsuzluğu olursa tüm çocuklar hasta olur mu?

Çocuğun Rh-pozitif veya negatif (RhD) olmasına bağlıdır. Kan grubu I, II, III ve IV taşıyıcıları hem Rh pozitif hem de negatif olabilir. Annenin Rh-negatif ve çocuğun Rh-pozitif olduğu bir durumda, antikorlar daha ilk gebelikte üretilecektir, ancak yalnızca ilk doğumdan (veya gebeliğin sonlandırılmasından) sonra annenin kanı arasında doğrudan temas olacaktır. anne ve çocuk Antikorların hemolitik etkisinin uygulanması sadece ikinci ve sonraki doğumlarda olacak ve bu da yenidoğanda hemolitik hastalığa yol açacaktır.

Rh faktörü negatif olan her kadın gebelikte ve doğumdan sonra dikkatle muayene edilmelidir, önleyici tedavi antikorların ortaya çıkmasını ve diğer komplikasyonları önlemek için.

4. Hamilelik sırasında Coombs testi yapmadan önce kocanın kan grubunu bilmek gerekli midir?

Hamilelik sırasında çocuğun biyolojik babasının kan grubunu sadece bilmek değil, kontrol etmek de gereklidir.

Veri

• ilk kez 1945'te Cambridge'de önerildi
• duyarlılık eşiği - bir eritrosit üzerinde en az 300 sabit antikor molekülü
• hemolizi tetikleyen antikor sayısı - her kişi için ayrı ayrı (16-30 ila 300)
• hemolitik aneminin diğer laboratuvar göstergelerinin (hemoglobin, bilirubin, retikülositler) dinamikleri normalleşebilir ve Coombs testi aynı seviyede kalacaktır.

Coombs testi en son düzenleme: 16 Mart 2018 tarafından Maria Bodyan

Bir plaka veya cam slayt üzerine pipetlerle (farklı!) 1 büyük damla O (I), A (II), B (III) serumu uygulanır. Zaman fark edilerek, temiz bir cam çubuk veya cam lamın temiz bir açısı ile serum damlaları kan damlaları ile birleştirilir. Tespit 5 dakika sürer, plak çalkalanır, ardından her damla karışımına 1 damla salin solüsyonu eklenir ve sonuçlar değerlendirilir. Serum 2 farklı seri ise daha iyi olur. Kan grubu sonuçları her iki serum serisinde de eşleşmelidir.

İzohemaglütinasyon sonuçlarının değerlendirilmesi:

izohemaglutinasyon. Pozitif bir reaksiyonla, karışımda küçük kırmızı yapışkan kırmızı kan hücreleri taneleri belirir. Taneler daha büyük taneler halinde birleşir ve ikincisi pullara dönüşür. Serumun rengi neredeyse solmuştur;

negatif bir reaksiyonla, karışım 5 dakika boyunca eşit şekilde pembe renkte kalır ve hiçbir tane algılanmaz;

3 serum grubu O(I), A(II), B(III) ile çalışırken, 4 reaksiyon kombinasyonu mümkündür:

1. 3 serumun tümü negatif reaksiyon verdiyse, yani karışım eşit şekilde pembe renkteyse - bu O (I) kan grubudur;

   sadece A (II) grubunun serumu negatif bir reaksiyon verdiyse ve serum O (I) ve B (III) pozitif bir reaksiyon verdiyse, yani taneler ortaya çıktıysa - bu A (II) kan grubudur;

   B(II) grubunun serumu negatif reaksiyon verdi ve O(I) ve A(II) gruplarının serumu pozitif reaksiyon verdi - bu B(III) kan grubudur.

3 serumun tümü pozitif tepkiler verdi - AB (IV) grubunun test edilen kanı. Bu durumda AB(IV) grubunun serumu ile bir çalışma yapılır.

Not!Çalışılan kanın damlaları, serum damlalarından 5-10 kat daha küçük olmalıdır.

İzohemaglütinasyon hataları.

Olması gereken yerde aglütinasyon olmaması ve olmaması gereken yerde aglütinasyon olması. Bunun nedeni düşük serum titresi artı zayıf eritrosit aglütinasyonu olabilir.

Olmaması gereken yerde aglütinasyonun varlığı- bu, eritrosit yığınlarının "madeni para sütunları" oluşturduğu psödoaglütinasyondur. Plakayı sallamak veya tuzlu su eklemek onları yok eder.

Panaglütinasyon, serum kendi kan grubu da dahil olmak üzere tüm kırmızı kan hücrelerini birbirine yapıştırdığında. 5. dakikada aglütinasyon belirtileri kaybolur.

Odadaki düşük hava sıcaklığı (15 ° C'nin altında) nedeniyle eritrositler birbirine yapıştığında, sözde soğuk panaglütinasyon da vardır.

Tüm bu durumlarda, ya tekrarlanan bir reaksiyon ya da standart eritrositlere göre gerçekleştirilir.

Kanın Rh-bağlılığının belirlenmesi

Rh ilişkisini belirlemek için, yani insanların kanında Rh sistemi antijenlerinin varlığını veya yokluğunu tespit etmek için, özgüllük açısından farklı olan, yani ilgili antikorları içeren standart anti-Rhesus serumları (reaktifler) kullanılır. Bu sistemin çeşitli antijenleri. Rh 0 (D) antijenini belirlemek için, çoğunlukla% 10'luk bir jelatin çözeltisi ilavesiyle anti-Rhesus serumu veya% 33'lük bir poliglusin çözeltisi ile önceden hazırlanmış standart bir Rhesus karşıtı reaktif kullanılır. Çalışmanın daha doğru sonuçlarını elde etmek ve diğer serolojik sistemlerin antijenlerini tespit etmek için Coombs testi kullanılır (ayrıca transfüze edilen kanın uyumluluğunu belirlemede çok hassastır). Çalışma için yerli kan veya bir çeşit koruyucu ile hazırlanmış kan kullanılır. Bu durumda kan on kat hacimde koruyucudan yıkanmalıdır. izotonik solüsyon sodyum klorit. Rh-bağlılığını belirlerken- Rh 0 (D) iki numune serum veya iki farklı seriden anti-Rhesus reaktifi kullanılmalı ve aynı zamanda Rh-pozitif (Rh +) ve Rh-negatif (Rh -) kandan elde edilen standart eritrositler kullanılmalıdır. ) bireyler. Diğer izoantijenleri belirlerken, standart serumda antikorların yönlendirildiği antijeni içeren veya içermeyen kontrol eritrositler buna göre kullanılmalıdır.

Eksik ısı aglütininleri, otoimmün hemolitik anemi gelişimine neden olabilen en yaygın antikor türüdür. Bu antikorlar, nadiren IgG'ye, IgM'ye, IgA'ya aittir.

KOMBİ TESTİ

Coombs testi: bir giriş. Coombs testi, hemaglütinasyon reaksiyonuna dayanan bir laboratuvar tanı yöntemidir.

Otoimmün hemolitik anemiyi teşhis etmenin ana yöntemi Coombs testidir. İmmünoglobulinlere (özellikle IgG) veya kompleman bileşenlerine (özellikle C3) özgü antikorların, IgG veya C3 ile kaplı eritrositleri aglütine etme yeteneğine dayanır.

IgG ve C3b'nin eritrositlere bağlanması, otoimmün hemolitik anemi ve ilaca bağlı immün hemolitik anemide gözlenir. Doğrudan Coombs testi. Doğrudan Coombs testi, kırmızı kan hücrelerinin yüzeyine sabitlenmiş antikorları veya tamamlayıcı bileşenleri saptamak için kullanılır. Aşağıdaki gibi gerçekleştirilir:

İnsan immünoglobülinlerine (antiglobulin serumu) veya tamamlayıcıya (antitamamlayıcı serum) karşı antikorlar elde etmek için, hayvana insan serumu, immünoglobülinler veya insan tamamlayıcısı ile bağışıklık kazandırılır. Hayvandan elde edilen serum, diğer proteinlere karşı antikorlardan arındırılır.

Hastanın eritrositleri, immünoglobulinlere ve komplemana karşı antikorları nötralize eden ve yanlış negatif sonuca neden olabilen serumu tamamen çıkarmak için salinle yıkanır.

Antikorlar veya tamamlayıcı bileşenler eritrositlerin yüzeyine sabitlenirse, antiglobulin veya antikomplementer serum eklenmesi eritrositlerin aglütinasyonuna neden olur.

Direct Coombs testi aşağıdaki durumlarda kullanılır:

otoimmün hemoliz.

Yenidoğanın hemolitik hastalığı.

İlaca bağlı immün hemolitik anemi.

Hemolitik transfüzyon reaksiyonları. Dolaylı Coombs testi. Dolaylı Coombs testi, serumda eritrositlere karşı antikorları saptar. Bunu yapmak için hastanın serumu, grup 0 donör eritrositleri ile inkübe edilir ve ardından doğrudan bir Coombs testi yapılır.

Dolaylı Coombs testi aşağıdaki durumlarda kullanılır:

Vericinin ve alıcının kanının bireysel uyumluluğunun belirlenmesi.

Hemolitik transfüzyon reaksiyonlarına neden olan antikorlar dahil alloantikorların saptanması.

Tıbbi genetik ve adli tıpta yüzey eritrosit antijenlerinin belirlenmesi.

Kemik iliği naklinde tek yumurta ikizlerinin doğrulanması.

Biyolojik bir test yapmak için kan mümkün olan en kısa sürede (tercihen bir jetle) transfüze edilir. 25 ml kan transfüzyonu yapıldıktan sonra sistemin tüpü klemp ile klemplenir. Ardından, alıcının durumunun izlendiği 3 dakikalık bir duraklama yapılır. Biyolojik bir numune oluşturmak için üç kez 25 ml kan enjekte edilir. Testin sonunda (ilk 75 ml kanın 3 dakikalık aralıklarla 25 ml'lik fraksiyonel dozlarda transfüzyonundan sonra) sistem gerekli transfüzyon hızına ayarlanır. Bir hastaya birden fazla şişe kan transfüzyonu yapılırken iğnenin damardan çıkarılması gerekir. Bu durumda iğne, kanın aktığı flakonun test tüpünden çıkarılır ve bir sonraki flakona takılır. Sistem borusu (kauçuk veya plastik) bu anda bir kelepçe ile sıkıştırılır. Bir kan transfüzyonu sırasında alıcıya başka herhangi bir ilacın intravenöz uygulanmasına ihtiyaç duyulursa, bu, sistemin kauçuk tüpünün delinmesiyle yapılır. Düşmedikleri için plastik bir tüpün delinmesi kabul edilemez. Her kan transfüzyonundan sonra hasta, tespit etmek ve zamanında ortadan kaldırmak için izlenmelidir. olası komplikasyonlar, alerjik reaksiyonlar dahil. Kan transfüzyonu bittikten 2 saat sonra vücut ısısı ölçülmelidir. Artan ölçüm ile sonraki 4 saat içinde her saat başı tekrarlanmalıdır. Aynı derecede önemli olan, idrara çıkma ve idrar bileşiminin izlenmesidir, bu da transfüzyon sonrası toksik bir reaksiyonun varlığını belirlemeyi mümkün kılar. Kan transfüzyonundan sonra oligüri ve anürinin başlaması, idrarda kan hücrelerinin ve proteinin varlığı, transfüzyon sonrası hemoliz gelişiminin doğrudan bir göstergesidir.