Coombs deneme anlamları ve tanımları. Yenidoğanın hemolitik hastalığının tanısında Coombs testi

Coombs testi klinik analiz kanın güvensiz olabilecek belirli antikorlar içerip içermediğini görmek için yapılan kan testi. Bu antikorlar kırmızı kan hücrelerine yapışır ve bağışıklık sistemini istila edebilir ve başka şekillerde zarar verebilir. Tıbbi terminolojide bu teste antiglobulin testi (AGT) de denir.

Coombs Test Türleri

Doğrudan ve dolaylı olmak üzere iki tür Coombs testi vardır.

Doğrudan Coombs testi doğrudan (DAT) olarak da bilinen, kırmızı kan hücrelerinin yüzeyine yapışan oto-antikorları saptar. Bu antikorlar bazen vücutta belirli hastalıklar nedeniyle veya prokainamid, metildopa veya kinidin gibi belirli ilaçlar alındığında üretilir.

Bu antikorlar tehlikelidir çünkü bazen kırmızı kan hücrelerini yok ederek anemiye neden olurlar.

Bu test bazen sarılık veya aneminin nedenini teşhis etmek için reçete edilir.

Normalde, Coombs reaksiyonu negatiftir.

Olumlu:

yenidoğanın hemolitik hastalığı;
otoimmün hemoliz;
hemolitik transfüzyon reaksiyonları;
ilaca bağlı immün hemolitik anemi.

Dolaylı test Coombs olarak da bilinir, kan serumunda bulunan kırmızı kan hücrelerine karşı antikorları tespit etmek için kullanılır (serum, kırmızı kan hücreleri ve pıhtılaştırıcı atıldıktan sonra kalan berrak sarı kan sıvısıdır).

Dolaylı Coombs testi, donörün kanının alıcınınkiyle eşleşip eşleşmediğini belirlemek için kan naklinde kullanılır. Buna uyumluluk testi denir ve donörün kanına karşı herhangi bir olumsuz reaksiyonun önlenmesine yardımcı olur. Bu analiz hamile kadınlar için de önerilir. Bazı kadınlarda plasentadan fetüse geçebilen ve yenidoğana zarar vererek hemolitik anemi olarak bilinen hemolitik bir hastalığa neden olabilen IgG antikorları vardır.

prosedür

Kan, genellikle elin arkasından veya dirsek kıvrımından bir damardan bir şırınga vasıtasıyla alınır. Delinme yeri bundan önce iyice dezenfekte edilir ve kan testi yapıldıktan sonra temiz gazlı bez veya pamuk yünü uygulanır.

Ortaya çıkan kan laboratuvarda saflaştırılır ve kırmızı kan hücreleri ayrıştırılır. Numune daha sonra çeşitli serum ve karşı konulan Coombs reaktifleri kullanılarak sıralı olarak incelenir. Aglütinasyon yoksa (kırmızı topaklanma) kan hücreleri), bu da olumlu bir sonuç anlamına gelir.

Bununla birlikte, test negatifse, kanda kırmızı kan hücrelerine karşı hareket eden antikorlar olduğu anlamına gelir. Bu gösterebilir çeşitli hastalıklar anemi (doğal veya ilaca bağlı), sifiliz veya mikoplazma enfeksiyonu gibi. Sonuçları aldıktan sonra, ilgili doktor uygun tedaviyi reçete edecektir.

Video

Coombs testi, kırmızı kan hücresinin içinde veya yüzeyinde bulunan antikorları saptayan özel bir laboratuvar testidir. Bu prosedür, hemolitik transfüzyon reaksiyonlarının belirlenmesinin yanı sıra yenidoğanlarda dahil olmak üzere bağışıklık sisteminin teşhisine izin verir. Coombs testi, eritrosit antijenlerini belirlemek için adli tıpta ve bilimsel genetikte aktif olarak kullanılmaktadır. Böyle bir analizin uygulanması için tüm kurallara uygunluk, en güvenilir sonucu almanızı sağlar.

Antiglobulin testinin amacı

Doğrudan Coombs testi, kırmızı kan hücrelerine sabitlenmiş anti-eritrosit antikorlarını tespit etmenizi sağlar. Böyle bir çalışmada pozitif bir reaksiyon, otoimmünite gelişimini gösterir.Antikorlar genellikle serbest formda olduklarından, yani kırmızı kan hücreleriyle hiçbir bağlantıları olmadığından, negatif bir sonucun varlığını dışlamadığına dikkat edilmelidir. Bu gibi durumlarda, içindeki otonom maddeleri belirlemenizi sağlayacak dolaylı bir Coombs testi yapmanız önerilir.

Analiz nasıl yapılır?

Böyle bir testin nihai sonucunu etkileyen önemli bir faktör bulunmamasına rağmen, hastadan venöz kan örneklemesi sabahları aç karnına yapılır. Alınan malzemenin 2 ila 8 ° C sıcaklıkta yedi günden fazla olmamak üzere saklanmasına izin verilir. Bu çalışmanın olabildiğince doğru olması için tam kanın ilk iki saat içinde laboratuvara ulaştırılması gerekir. İdeal olarak Coombs testi, vücutta hemolitik değişikliklerin olmadığını gösteren negatif bir sonuç göstermelidir.

Toplamları deşifre etmek

Coombs testi, dikkatli ve doğru performans gerektiren, oldukça zaman alan bir araştırma yöntemidir. Böyle bir testi kullanırken, pozitif reaksiyonların zayıf tezahürü nedeniyle nihai sonuçların yanlış yorumlanmasıyla ilişkili bazı zorluklar olabilir. Analizin güvenilmezliğinin - yani pozitif bir Coombs testinin - eritrositlerin etkisiz yıkanmasının, yağ ile temasın sonucu olabileceğine dikkat edilmelidir.
yüzey, ayrıca antiglobulin reaktiflerinin bileşenler tarafından nötralizasyonu

serum. Bu araştırma yönteminin bir diğer dezavantajı ise alınan, saklanması belirli özelliklere sahip olan malzemenin kararsız olmasıdır.

Yanlış bir negatif sonuç, yeniden süspansiyon sırasında RBC süspansiyonunun aşırı sallanmasından kaynaklanabilir. Hatalı sonuçlar, test edilen eritrositlerin yüzeyinde inkübasyon sırasında adsorbe olan ve pozitif bir sonucun ortaya çıkmasına neden olan anti-tamamlayıcı antikor kontaminantlarının varlığından da kaynaklanabilir. Test numuneleri iyice yıkanır ve reaksiyon koşulları kontrol edilirse, bu eksiklikler kolayca giderilebilir ve bu da Coombs testinin en güvenilir göstergelerini elde etme şansını artıracaktır.

Coombs testi

Coombs testi- Rh-pozitif kanın eritrositlerinin yüzeyinde bulunan spesifik bir protein olan Rh faktörüne karşı Rh-negatif kanda eksik anti-eritrosit antikorlarını saptamayı amaçlayan bir antiglobulin testi. Bu testin iki türü vardır: doğrudan - kırmızı kan hücrelerinin yüzeyindeki antikorların tespiti, dolaylı - kan serumundaki antikorların tespiti. Kan hastalıklarının tedavisinin teşhisinde ve izlenmesinde doğrudan bir test yapılır: hemolitik anemi, yenidoğanın hemolitik hastalığı ve diğerleri. Transfüzyon sırasında vericinin ve alıcının kanının uyumluluğunu değerlendirmek ve ayrıca hamileliği planlarken ve yönetirken Rh çatışmasının varlığını ve riskini belirlemek için dolaylı bir test yapılır. Coombs testi için materyal venöz kandır, çalışma aglütinasyon reaksiyonuna dayalı yöntemlerle gerçekleştirilir. Normalde her iki test de negatif sonuç verir. Analiz bir gün içinde gerçekleştirilir.

Coombs testi - klinik çalışma Rh faktörüne karşı antikorların saptanmasını amaçlayan Rh negatif kan. Test, Rh çatışması ve hemolitik reaksiyonlar geliştirme riskini belirlemek için kullanılır. Her insanda, eritrositlerin yüzeyi belirli bir dizi antijen veya aglütinojen içerir - varlığı veya yokluğu kan grubunu ve Rh faktörünü yargılamak için kullanılan çeşitli yapıdaki bileşikler. Tıbbi uygulamada birçok antijen türü vardır, kan grubunu belirleyen aglütinojen A ve B ve Rh faktörü olan aglütinojen D, pratik açıdan en büyük öneme sahiptir. Pozitif bir Rh faktörü ile, eritrositlerin dış zarında D antijenleri negatif olarak tespit edilir - hayır.

Antiglobulin testi olarak da adlandırılan Coombs testi, kandaki Rh faktör sistemine karşı tamamlanmamış anti-eritrosit antikorlarını saptamayı amaçlar. Rh faktörüne karşı antikorlar, Rh-negatif kanda D aglütinojenleri olan eritrositler girdiğinde üretilen spesifik immünoglobulinlerdir. Bu, fetüsün ve hamile kadının kanının önceden kan tayini yapılmadan yapılan kan transfüzyonları ile karıştırılması durumunda ortaya çıkabilir. Coombs testinin iki versiyonu vardır - doğrudan ve dolaylı. Doğrudan bir Coombs testi yapılırken, kırmızı kan hücrelerinin yüzeyine yapışık antikorlar saptanır. Çalışma, hemolitik reaksiyonun nedenini belirlemek için kullanılır. Dolaylı Coombs testi, kan plazmasındaki anti-eritrosit antikorlarını saptamayı amaçlar. Vericinin ve alıcının veya annenin ve fetüsün kanının uyumluluğunu belirlemek gerekir, Rh çatışmasının ve ardından kırmızı kan hücrelerinin hemolizinin gelişmesini önlemeye yardımcı olur.

Coombs testinin her iki varyantı için kan bir damardan alınır. Analiz, antiglobulin serum kullanılarak aglütinasyon yöntemiyle gerçekleştirilir. Çalışmanın sonuçları hematolojide hemolitik reaksiyonların nedenlerini belirlemede, cerrahi ve resüsitasyonda kan transfüzyonları sırasında, kadın doğum ve jinekolojide Rh-negatif kanı olan kadınlarda gebeliklerin izlenmesinde kullanılmaktadır.

Belirteçler

Kırmızı kan hücrelerinin yüzeyine bağlı antikorları tespit eden doğrudan Coombs testi, çeşitli kökenlerden hemolitik reaksiyonlar (kırmızı kan hücrelerinin yok edilmesi) için reçete edilir. Çalışma, primer otoimmün hemolitik anemi, transfüzyon sonrası hemolitik anemi, yenidoğanın hemolitik hastalığı, otoimmün, tümör veya bulaşıcı hastalıklar almanın yanı sıra ilaçlarörneğin kinidin, metildopa, prokainamid. Kan plazmasındaki antikorları tespit eden dolaylı Coombs testi, Rh çatışmasının gelişmesini önlemek için kullanılır. Çocuğun gelecekteki babasının pozitif bir Rh faktörüne sahip olması koşuluyla, kan nakli için hazırlanan hastalar ve ayrıca Rh faktörü negatif olan hamile kadınlar için endikedir.

Rh uyumluluğunu belirlemek için Rh pozitif kanı olan hastalara Coombs testi uygulanmaz. Bu durumlarda, kırmızı kan hücrelerinin yüzeyinde zaten antijenler vardır, antikor üretimi kan transfüzyonu veya hamile kadının kan dolaşımına fetal kanın girmesi ile tetiklenemez. Ayrıca, her iki ebeveynin de kalıtsal resesif bir özellik olan negatif bir Rh faktörü varsa, çalışma hamile kadınlar için endike değildir. Bu tür çiftlerdeki bir çocuğun her zaman Rh negatif kanı vardır, anne ile immünolojik bir çatışma imkansızdır. Hemolitik patolojilerde, sonuçlar eritrosit yıkım sürecinin aktivitesini yansıtmadığından, tedavinin başarısını izlemek için antiglobulin testi kullanılmaz.

Coombs testinin sınırlaması, araştırma prosedürünün karmaşıklığıdır - güvenilir sonuçlar elde etmek için sıcaklık ve zaman koşullarına, reaktifleri ve biyomateryal hazırlama kurallarına uymak gerekir. Coombs testinin avantajı, yüksek duyarlılığıdır. Hemolitik anemide hemoglobin, bilirubin ve retikülositler normale dönse bile bu analizin sonuçları pozitif kalır.

Analiz için hazırlık ve materyal toplama

Coombs testini gerçekleştirmek için kullanılan materyal venöz kandır. Kan alma prosedürünün zamanı ve hastanın hazırlanması için özel bir gereklilik yoktur. Her çalışmada olduğu gibi en az 4 saat yemek yedikten sonra ara verilmesi ve son 30 dakikada sigaranın bırakılması önerilir, fiziksel aktivite duygusal stresten kaçının. İlaç almayı bırakma gereğini önceden doktorunuzla görüşmeye değer - bazı ilaçlar Coombs testinin sonuçlarını bozabilir. Kan kübital damardan bir şırınga ile alınır, daha az sıklıkla elin arkasındaki damardan alınır. Birkaç saat içinde malzeme laboratuvara teslim edilir.

Direkt Coombs testi yapılırken hastanın kan serumuna antiglobulin serumu eklenir. Bir süre sonra karışım, aglütinatların varlığı açısından incelenir - kırmızı kan hücrelerinde antikorlar varsa oluşurlar. Pozitif bir sonuçla, aglütinasyon titresi belirlenir. Dolaylı Coombs testi daha fazla adımdan oluşur. İlk olarak serumda bulunan antikorlar inkübasyon sırasında enjekte edilen eritrositlere sabitlenir. Daha sonra numuneye antiglobulin serum eklenir, bir süre sonra aglütinatların varlığı ve titresi belirlenir. Analiz süresi 1 gündür.

normal sonuçlar

Normalde direkt Coombs testinin sonucu negatiftir (-). Bu, kanda kırmızı kan hücreleriyle ilişkili antikorların olmadığı ve hemolize neden olamayacakları anlamına gelir. normal sonuç dolaylı Coombs testi de negatiftir (-), yani kan plazmasında Rh faktörüne karşı antikor yoktur. Alıcı için kan transfüzyonu için hazırlanırken bu, donörün kanıyla uyumluluk anlamına gelir, hamileliği izlerken - annede Rh duyarlılığının olmaması, Düşük risk immünolojik çatışmanın gelişimi. Beslenme alışkanlıkları gibi fizyolojik faktörler veya fiziksel aktivite, testin sonucunu etkileyemez. Bu nedenle, sonuç olumlu ise, bir doktor konsültasyonu gereklidir.

Analizin teşhis değeri

Pozitif bir Coombs test sonucu niteliksel olarak (+) ila (++++) arasında veya niceliksel olarak 1:16 ila 1:256 titrelerinde ifade edilir. Eritrositler üzerindeki ve kan serumundaki antikor konsantrasyonunun belirlenmesi her iki numune türünde de yapılır. Direkt Coombs testinin pozitif çıkması ile kırmızı kan hücrelerinin dış zarında antikorlar saptanır ve bu kan hücrelerinin yıkımına yol açar. Nedeni, önceden tiplendirme yapılmadan kan transfüzyonu olabilir - transfüzyon sonrası hemolitik reaksiyon, ayrıca neonatal eritroblastoz, ilaç kullanımına bağlı hemolitik reaksiyon, birincil veya ikincil otoimmün hemolitik anemi. Eritrositlerin sekonder yıkımına, sistemik lupus eritematozus, Evans sendromu, Waldenström makroglobulinemi, paroksismal soğuk hemoglobinüri, kronik lenfositik lösemi, lenfoma, enfeksiyöz mononükleoz, sifiliz, mikoplazmal pnömoni neden olabilir.

Dolaylı Coombs testinin pozitif sonucu, plazmada Rh faktörüne karşı antikorların varlığını gösterir. Uygulamada bu, Rh duyarlılığının meydana geldiği, hamilelik sırasında donör kanının infüzyonundan sonra bir Rh çatışması gelişme olasılığı olduğu anlamına gelir. Gebelik komplikasyonlarını önlemek için Coombs testi pozitif olan kadınlar özel kayıtlara alınır.

Normdan sapmaların tedavisi

Coombs testi, izoserolojik çalışmaları ifade eder. Sonuçları, Rh çatışmasının gelişmesini önlemek için hemolitik bir reaksiyonu tanımlamanın yanı sıra donör ve alıcının, anne ve fetüsün kanının uyumluluğunu belirlemeyi mümkün kılar. Testin sonucu pozitifse, o zaman bir kadın doğum uzmanı-jinekolog, hematolog, cerrah olan ilgili hekimden tavsiye almanız gerekir.

Tıp pratiğinde mevcut birçok antijenden en yüksek değerüç tip kan aglütinojenine verilir. Bunlardan biri, Rh faktörünün tezahüründen sorumlu tiptir: eritrosit zarında varsa, Rh + kan grubu, yoksa - Rh- olarak teşhis edilir. Rh + aglutinojen içeren eritrositler, Rh negatif kanın bileşimine girerse, vücut bir bağışıklık tepkisini tetikler ve bu antijene karşı antikor üretmeye başlar, bu da patolojik durumlara neden olur.

REFERANS! Rh faktörü, birkaç düzine antijenden oluşan karmaşık bir çok bileşenli sistemdir. Bunlardan en yaygın olanları tip D aglütinojenler (vakaların %85'i) ile E ve C'dir.

Coombs testi, yalnızca doğrudan endikasyonların varlığında gerçekleştirilir. Bir Coombs testi önermek için genel bir neden listesi:

gebeliğin planlanması ve yönetimi (ebeveynlerin Rh değerleri farklıdır);
bağış ve kan transfüzyonu için hazırlık (Rh'deki kan uyumsuzluğu, AB0 sistemindeki uyumsuzluktan daha az zararlı değildir);
planlanmış cerrahi müdahale(kan nakli ile kan kaybının yenilenmesi durumunda);
hemolitik hastalıkların teşhisi.

Daha spesifik endikasyonlar yürütülen çalışmanın türüne bağlıdır.

Doğrudan Coombs testi

Doğrudan bir test, kırmızı kan hücrelerinin yüzeyindeki antikorları tespit eder. Bu mevcut tanı için gereklidir. hemolitik patolojiler:

otoimmün (eritrositler ve hemoglobin, vücudun kendi antikorlarının saldırısı sonucu yok edilir);
tıbbi ( patolojik süreç biraz almaya başlar ilaçlar kinidin veya prokainamid tipi);
transfüzyon sonrası (transfüzyon sırasında kan grubunun uyumsuzluğu ile) ve ayrıca hamilelik sırasında Rh çatışması (yenidoğanların eritroblastozu) şeklinde.

REFERANS! Hemolitik anemi, yetersiz kan oksijen doygunluğuna ve beyin ve / veya iç organların hipoksisine yol açan hemoliz sonucu kırmızı kan hücrelerinin erken yıkımı ile ilişkili bir hastalıktır.

Kan elementlerinin hemolizi onkolojik, bulaşıcı, romatizmal hastalıklarda görülür, bu nedenle doğrudan Coombs testi patolojik bir durumu teşhis etmek için ek bir araç olarak kullanılabilir. Aynı zamanda şunu hatırlamakta fayda var: analizin negatif bir değeri hemoliz olasılığını dışlamaz, ancak ek inceleme için bir nedendir.

Dolaylı Coombs testi

Patolojik durumları önlemek için dolaylı bir test daha sık kullanılır. Transfüzyon uyumluluğunu değerlendirmek ve hamilelik sırasında Rh çatışması risklerini teşhis etmek için gerekli olan kan plazmasındaki antikorları tespit etmeye yardımcı olur.

İnsanların %80'inden fazlası pozitif Rh faktörüne (Rh +) sahiptir, %20'den biraz azı Rh negatiftir. Bir Rh- anne bir Rh+ bebeği geliştirirse, vücudu, fetal kırmızı kan hücrelerine saldırarak hemolize neden olan antikorlar üretmeye başlar.

"Farklı Rhesus" evliliklerinin yüzdesinin% 12-15'e ulaştığı göz önüne alındığında, yenidoğanın hemolitik hastalığı riski yüksek olmalıdır, ancak gerçekte, kadınlarda bu tür 25 vakadan sadece 1'inde fenomen görülür. duyarlılık gözlenir (200 başarılı doğum için 1 hemolitik patoloji örneği). Bu kısmen, ilk Rh-pozitif çocuğun genellikle annenin vücudunda açık bir saldırganlığa neden olmamasından kaynaklanmaktadır; vakaların büyük çoğunluğu ikinci ve sonraki çocuklarda görülür. Belirli bir alerjene karşı konvansiyonel sensitizasyon ile aynı prensip geçerlidir.

İlk temasta reaksiyon oluşmaz. Vücut, yalnızca onun için yeni bir antijenle tanışır ve hızlı bir bağışıklık tepkisinden sorumlu olan, ancak plasenta bariyerini nadiren çocuğun kanına nüfuz eden IgM sınıfından antikorlar üretir. Tüm patolojik reaksiyonlar, vücutta IgG sınıfı antikorlar üretilmeye başladığında, hemoliz sürecini başlatarak fetal kan dolaşımına kolayca nüfuz ettiğinde, tekrarlanan "buluşma" üzerine kendini gösterir.

Hamilelik sırasında indirekt Coombs testi anne vücudundaki antikorların varlığını tespit etmenizi ve zamanında tanımlamanızı sağlar İlk aşama duyarlılaşma. Olumlu bir cevap, doğumdan 3-4 hafta önce aylık bir antikor titresi çalışması ve zorunlu hastaneye yatış ile kayıt gerektirir.

REFERANS! Rh faktörü uyumsuzluğu annenin durumunu hiçbir şekilde etkilemez, hemolitik hastalık sadece çocukta gelişir. İÇİNDE Sunum dosyaları ve zamanında yanıt alınmazsa, fetüs anne karnında veya doğumdan hemen sonra ölebilir.

Prosedür için hazırlık ve uygulama

Teşhis için kullanılır venöz kan. Coombs testi için özel uzun süreli hazırlık gerekli değildir. Analiz için bir damardan kan almadan önce standart bir dizi kurala uymaya çalışın:

3 gün boyunca alkolü bırakmak, ilaçlar(Eğer mümkünse);
analiz için kan almadan önce son öğünü 8 saatten sonra planlayın;
1 saat içinde sigarayı, fiziksel, zihinsel ve duygusal stresi bırakın;
İşlemden önce bir bardak temiz gazsız su için.

Araştırma yöntemi hemaglütinasyon reaksiyonuna dayanmaktadır.

Doğrudan test yapılırken bir kan örneği önceden hazırlanmış, indikatörleri bilinen antiglobulin seruma maruz bırakılır, karışım bir süre bekletilir ve eritrositlerde antikor bulunduğunda oluşan aglütinatlar açısından kontrol edilir. Aglütinatların seviyesi, bir aglütinasyon titresi kullanılarak teşhis edilir.

Dolaylı test Coombs benzer bir tekniğe sahiptir, ancak daha karmaşık bir eylem dizisine sahiptir. Ayrılan kan serumuna antijenik eritrositler (Rh faktörlü) verilir ve ancak bu manipülasyonlardan sonra aglütinatların teşhisi ve titresi için antiglobulin serum eklenir.

Araştırma sonuçları

Normalde hem doğrudan hem de dolaylı Coombs testi olumsuz bir sonuç vermelidir:

negatif bir doğrudan test, kırmızı kan hücreleriyle ilişkili Rh faktörüne yönelik spesifik antikorların kanda bulunmadığını ve hemolize neden olamayacaklarını gösterir.
negatif dolaylı bir test, kan plazmasında Rh faktörüne karşı serbest antikor olmadığını da gösterir; gerçek, Rh faktörüne göre donörün kanının alıcının kanıyla (veya anne ve çocuğun kanıyla) uyumluluğunu gösterir.

Pozitif bir Coombs testi, kan nakli durumunda veya farklı Rh statüsüne sahip bir çocuğu taşırken Rh çatışmasının ana nedeni olan vücudun Rh duyarlılığı gerçeğini gösterir. Bu durumda sonuçlar 3 ay boyunca (eritrosit ömrü) değişmeden kalır. Sebep otoimmün hemolitik anemi olmuşsa, pozitif bir test hastayı birkaç yıl (bazı durumlarda ömür boyu) rahatsız edebilir.

REFERANS! Antiglobulin testi oldukça duyarlıdır, ancak çok az bilgi içeriğine sahiptir. Hemolitik sürecin aktivitesini kaydetmez, antikor tipini belirlemez ve patolojinin nedenini belirleyemez. Daha eksiksiz bir resim elde etmek için, ilgilenen doktor mutlaka ek çalışmalar (kan mikroskobu, genel ve biyokimyasal analiz, romatizmal testler, ESR, demir ve ferritin seviyeleri) reçete eder.

Duyarlılık derecesi, nitel bir ifadeye ("+" ila "++++" arası) veya nicel - bir başlık biçiminde olabilir:

1:2 - düşük değer, tehlike oluşturmaz;
1:4 - 1:8 - bir immünolojik reaksiyon gelişiminin başlangıcı; tehlike oluşturmaz, ancak sürekli izleme gerektirir;
1:16 -1:1024 - parlak bir hassasiyet biçimi, hemen önlemler alınmalıdır.

Pozitif bir testin nedeni şunlar olabilir:

bağışçının ve alıcının Rh faktörü eşleşmediğinde, türü belirlenmemiş kanın (veya yazım hatası olan) transfüzyonu;
Hamilelik sırasında Rhesus çatışması (eğer baba ve annedeki kan antijenlerinin bileşimi uyuşmuyorsa);
otoimmün hemolitik anemi - belirli hastalıkların (Evans sendromu, bulaşıcı pnömoni, sifiliz, soğuk hemoglobinüri, lenfoma) bir sonucu olan hem doğuştan (birincil) hem de ikincil;
ilaç hemolitik reaksiyonu.

Yukarıdaki sorunlardan hiçbiri hasta tarafından onsuz çözülemez. tıbbi yardım. Her durumda, acil bir konsültasyon, kayıt veya acil hastaneye yatış gerekli olacaktır.

DİKKAT! İÇİNDE nadir durumlar Yanlış pozitif Coombs testi mümkündür. Bunun nedeni, sık kan nakli ve bir dizi hastalık olabilir: romatizmal eklem iltihabı, lupus eritematozus, sarkoidoz. Ayrıca, bu fenomen, dalağın çıkarılmasından sonra ve ayrıca reaksiyon seyrinin ihlali durumunda (içeriğin sık sık çalkalanması, kirleticilerin varlığı) gözlemlenebilir.

Eksik anti-eritrosit antikorlarını tespit etmek için tasarlanmış bir antiglobulin testi, 1945'te Coombs, Morant, Reis tarafından önerildi ve daha sonra Coombs testi olarak adlandırıldı. Bu yöntemin özü, insan immünoglobulinlerine karşı antikorlar içeren antiglobulin serumunun, eksik antikorlarla duyarlılaştırılmış eritrositlerle reaksiyona girdiğinde bunların aglütinasyonuna yol açmasında yatmaktadır.

Antikorların kırmızı kan hücrelerinin yüzeyinde fikse veya kan plazmasında serbest olmasına bağlı olarak, doğrudan veya dolaylı bir Coombs testi kullanılır.

İncelenen kırmızı kan hücrelerinin zaten olduğuna inanmak için sebeplerin olduğu durumlarda doğrudan bir Coombs testi yapılır. in vivo uygun antikorlarla hassaslaştırıldı, örn. Reaksiyonun ilk aşaması - antikorların eritrositlerin yüzeyinde sabitlenmesi - vücutta meydana gelir ve ardından antiglobulin serumunun eklenmesi, duyarlı hücrelerin aglütinasyonuna neden olur.

Dolaylı Coombs testi kullanılarak, test serumunda bulunan eksik antikorlar tespit edilir. Bu durumda, reaksiyon iki aşamada ilerler. İlk aşama, test eritrositlerinin test serumu ile inkübasyonudur, bu sırada test serum örneğinde bulunan antikorlar eritrosit yüzeyinde sabitlenir. İkinci aşama, antiglobulin serumunun eklenmesidir.

Şimdiye kadar, Coombs testi, özellikle otoimmün hastalıklar olmak üzere immünopatolojik durumların teşhisinde laboratuvar pratiğinde yaygın olarak kullanılıyordu. hemolitik anemi, hücre zarının antikorlar ve (veya) tamamlayıcı sistemin bileşenleri ile bağlanması nedeniyle eritrositlerin yok edilmesi ile karakterize edilir. Yardımı ile eritrosit zarında komplemanı ve bazen komplemanı (C3d) aktive edebilen Ig G'nin (genellikle Ig G1 ve Ig G3) varlığı tespit edilir. Ancak hastalığın akut döneminde üzerinde eritrositlerin yıkımı nedeniyle çok sayıda antikorlar, hemolitik kriz ile ve ayrıca hastalığın kronik seyrinde yetersiz miktarda antikor ile, negatif bir doğrudan Coombs testi not edilebilir.

Dolaylı Coombs testinin geçerliliğini koruduğu vurgulanmalıdır. en iyi yöntem donör ve alıcının eritrosit antijenleri için bireysel uyumluluğunu en doğru şekilde belirlemenize izin verdiği için transfüzyon ortamının bireysel seçimi.

Nakil öncesi dönemde tüm organ ve doku alıcılarının ve nakilden sonra da hematopoietik kök hücre alıcılarının muayenesinde otoantikorların varlığı için ek bir doğrudan antiglobulin testi önerilir.

İmmünohematoloji ve transfüzyona ek olarak, antiglobulin testleri bir dizi patolojik durumun tanısında yaygın olarak kullanılmaktadır: lenfoproliferatif olanlar dahil hematolojik hastalıklarda, sistemik hastalıklar bağ dokusu, Sjögren hastalığı, kronik aktif hepatit vb.

Coombs testleri tıbbi genetik ve adli tıpta yüzey eritrosit antijenlerini belirlemek için aktif olarak kullanılmaktadır.

Coombs testi, uygulanmasında özel dikkat gerektiren oldukça zaman alan bir araştırma yöntemidir. Kullanırken, özellikle zayıf pozitif reaksiyonların yorumlanmasıyla ilgili bazı zorluklar vardır. Coombs testleri yapılırken yanlış zayıf pozitif veya negatif reaksiyonların, eritrositlerin yetersiz etkili bir şekilde yıkanmasının, antiglobulin reaktifinin eser miktarda serumla nötrleştirilmesinin ve üzerine antiglobulinin sabitlenebileceği yağdan arındırılmamış bir yüzeyle temasın sonucu olabileceği bilinmektedir. etkinliğini kaybediyor. Coombs testinin diğer bir dezavantajı, hazırlanması ve saklanması belirli özelliklere sahip olan antiglobulin reaktifinin instabilitesidir, bu da antiglobulin serumu ile hemaglutinasyon reaksiyonunun ölçülmesini zorlaştırır.

Ayrıca A. Holburn, D. Voak ve ark. , kırmızı hücre süspansiyonunun yeniden süspanse edilmesi sırasında aşırı sallamanın yanlış negatif sonuçlara neden olabileceğini gösterdi. Antiglobulin testleri yapılırken hatalı sonuçlar ayrıca antiglobulin reaktifinde antikomplementer antikorların, özellikle inkübasyon sırasında test eritrositlerinin yüzeyinde adsorbe olan ve oluşturan C3d, C3c, C4c ve C4d kompleman bileşenlerinin bir karışımının varlığından da kaynaklanabilir. olumlu bir sonucun görünümü.

Bu eksiklikler, test numunelerinin iyice yıkanması ve reaksiyon koşullarının kontrol edilmesiyle kolayca giderilebilir.

Son on yılda, dolaylı bir Coombs testi yapma süresini azaltmak ve duyarlılığını artırmak için, izotonik solüsyon düşük iyonik kuvvet (LISS) .

Bazı yazarlara göre antiglobulin testlerinin tartışılmaz avantajı, çözünürlüğü önemli ölçüde aşan yüksek duyarlılıklarıdır. alternatif yöntemler aglütine olmayan antikorları saptamak için kullanılan testler.

Poliglusin, jelatin ve antiglobulin serumu kullanarak eksik antikorların varlığı için kan serumu inceleme yöntemlerinin çözünürlüğünü karşılaştırdık. Çalışma süresince, jelatin, poliglüsin ve indirekt antiglobulin testleri kullanılarak izoimmün donörlerin 140 kan serum örneğinde tamamlanmamış anti-D antikorlarının titreleri izlendi. Bu yöntemlerin beyanı genel kabul görmüş yöntemlere göre yapılmıştır.

Çözünürlükleri açısından, anti-D antikorları ile eritrosit duyarlılığını saptamaya yönelik yöntemlerin şu şekilde düzenlendiği bulunmuştur: en duyarlı olan dolaylı Coombs testi, ardından jelatin testi ve en az bilgilendirici olan poliglusin testidir. Bu deney serisinde elde edilen sonuçlar, Coombs testlerinin duyarlılığının yeterince yüksek olduğu sonucuna varmamıza izin veren literatür verilerine tamamen karşılık gelir, bu da anti-eritrosit antikorlarının varlığını yüksek bir kesinlikle tanımlamayı mümkün kılar. vücutta kırmızı kan hücrelerinin aglütinasyonuna neden olmaz.

Bununla birlikte, Coombs testlerinin uygulanmasında, hastalığın klinik tablosu veya önceki aşılama olası varlıklarını gösterse de, eksik antikorların tespit edilmediği durumlar vardır. Bu gibi durumlarda, antikor miktarının antiglobulin serum antikorları tarafından çökeltilmesi için yeterli olmadığı varsayılabilir.

Bu sonuç, hücrelerin analitik mikroelektroforez yöntemi kullanılarak, dolaylı Coombs testinde tespit edilmeyen test eritrositlerinde anti-D antikorlarının varlığının tespit edildiği kendi deneyimizle doğrulandı. Bu deney serisinde, antiglobulin serumu, önceden aşılanmış donörlerin kanından elde edilen serumlarla inkübe edilmiş eritrositlere, hareket halindeyken, yani antikor oluşumu döneminde eklendi. Coombs testi de dahil olmak üzere bilinen yöntemlerin içlerinde antikor tespit edemediği dönemde.

Yapılan çalışmalarda eritrositlerin yüzeyinde inkomplet antikorların varlığına dair kanıtlar istatistiksel olarak Önemli değişiklik antiglobulin serumu eklendikten sonra duyarlılaştırılmış kırmızı kan hücrelerinin elektroforetik mobilite değerleri. Akabinde, indirekt Coombs testinde tüm bağışıklı donörlerin kan serumunda anti-D antikorlarının saptandığına dikkat edilmelidir.

Gillerand ve ark. antiglobulin testlerinin belirli bir hassasiyet eşiği ile karakterize edildiğini de göstermiştir: pozitif bir sonuç, yalnızca bir eritrosit yüzeyinde en az 500 Ig G molekülü sabitlendiğinde not edilir.

Ek olarak, literatürde, olası bir negatif Coombs sonucunun, kırmızı kan hücrelerini hassaslaştıran antikorların düşük afinitesinden kaynaklanabileceğine ve bunun sonucunda yıkama sırasında kırmızı kan hücrelerinin yüzeyinden kolayca ayrıştırıldığına dair kanıtlar vardır.

Yukarıdakilerin ışığında, bazı durumlarda Coombs testinin negatif bir sonucunun, eritrositlerin yüzeyinde sabitlenmiş antikorların bulunmadığının kanıtı olmadığı sonucuna varılabilir.

Coombs reaksiyonlarının oldukça spesifik olduğu ve çoğu eksik antikor tipinin saptanmasına izin verdiği bilinmektedir. Bununla birlikte, bazı deneysel verilerin gösterdiği gibi, antiglobulin testleri immünolojik olmayan durumlarda da pozitif olabilir. E. Muirhead ve ark. fenilhidrazin uygulamasından sonraki ikinci günde köpeklerin Coombs testinin pozitif olduğu gözlendi. Pozitif reaksiyonun bu kadar hızlı bir şekilde ortaya çıkması, immünolojik doğasına karşı tanıklık eder ve daha ziyade, eritrositlerin yüzeyinde proteinin spesifik olmayan adsorpsiyonu ile ilişkilidir.

M. Williams ve ark. klavulanik asidin, yazarlara göre eritrosit yüzeyinde plazma proteinlerinin spesifik olmayan adsorpsiyonu ile ilişkili pozitif bir reaksiyona da neden olabileceğini buldu. Sefalosporin antibiyotiklerle yapılan tedavide de benzer bir etki gözlenmiştir.

Yukarıdaki çalışmaların yazarları, Coombs testlerinden elde edilen pozitif sonuçların immünolojik olmayan doğasını vurgulamakta ve bu maddelerin, eritrositlerin proteinleri (özellikle, normalde kan plazmasında bulunan ve antikor özelliklerine sahip olmayan albümin). Ek olarak, hücre zarı ile plazma proteinleri arasında bir bağlantı görevi gören, hücre yüzeyinde adsorbe edilen ksenobiyotik olması da mümkündür.

Antiglobulin testleri kurma sonuçlarının doğru yorumlanması için, periferik kandaki genç ve olgun eritrositler arasındaki kantitatif oran da dikkate alınmalıdır. Geliştirilmiş eritron rejenerasyonu döneminde vücuttan izole edilen retikülositlerin antiglobulin serumu ile aglütine olabileceği bulundu.

Pozitif direkt antiglobulin test sonucu Bozuklukların eşlik ettiği çeşitli patolojik durumlarda da kullanılır. bağışıklık sistemi, inflamatuar süreçler eritrosit membranlarında farklı özgüllükteki antikorların spesifik olmayan adsorpsiyonuna yol açar. Bu, Ig G moleküllerinin Ig G molekülleri ile etkileşime girmediğini göstermektedir. spesifik antijenler eritrositler, ancak yalnızca incelenen hücrelerin yüzeyinde sabitlenir.

Coombs testini, disproteinemi gelişimi veya paraproteinlerin ortaya çıkması ile karakterize edilen hastalıklarda ayarlarken, pozitif bir sonucun, özelliklere sahip olmayan proteinlerin eritrositlerinin yüzeyinde bulunmasından kaynaklandığı akılda tutulmalıdır. antiglobulin testlerinin, yardımlarıyla tespit edilen proteinin doğasına ilişkin yetersiz özgüllüğünü de gösteren antikorlar.

Bu nedenle, çok sayıda çalışmanın gösterdiği gibi, doğrudan ve dolaylı antiglobulin testlerinin pozitif sonuçları, antikorların varlığının mutlak kanıtı değildir, çünkü vücudun izosensitizasyonu veya otosensitizasyonu ile ilişkili olmayan çeşitli patolojik durumlarda da pozitif reaksiyonlar gözlemlenebilir. Bu nedenle, yalnızca çeşitli immünserolojik yöntemlerin sonuçlarının karşılaştırılması klinik tablo hastalık, gelişen patolojik süreci tam olarak yargılamanıza izin verir.

Negatif direkt test ile pozitif indirekt antiglobulin testi, genellikle önceki kan transfüzyonları veya gebeliklerle ilişkili olarak test serumunda serbest alloantikorların varlığını gösterir.

Paroksismal alevlenme sırasında Coombs testi genellikle pozitiftir. gece hemoglobinüri; anti-C3 ve anti-C3dg ile pozitif bir Coombs testi, soğuk aglütinin hastalığının bir belirtecidir.

Yenidoğanın hemolitik hastalığı geliştirme riskinin yüksek olduğu durumlarda, doğrudan ve dolaylı antiglobulin testlerinin sonuçları tanı koymak (çoğunlukla hamilelik sırasında) ve gerekirse görünüm ve değişikliğin dinamik olarak izlenmesi için büyük önem taşır. antikor titresinde. Çoğu zaman, yenidoğanın hemolitik hastalığı, anne ve fetüs arasındaki D antijeni için, daha az sıklıkla AB0 sisteminin antijenleri için ve hatta daha az sıklıkla diğer antijenler (C, c, K, vb.) İçin uyumsuzlukla ilişkilidir. Ortaya çıkan antikorlar la, kural olarak, Ig G sınıfının tamamlanmamış antikorları olarak dolaylı bir antiglobulin testinde açıkça saptanır. Bu hastalıkta, hamile bir kadının kanındaki anti-eritrosit antikorlarının seviyesi ile hemolitik hastalığın ciddiyetinin olası prognozu arasında belirli bir ilişki olduğundan, tespit edilen antikorların doğru belirlenmiş titresi ve özgüllüğü büyük önem taşır.

Dolaylı bir Coombs testine de ihtiyaç vardır. klinik uygulama güvenli transfüzyon tedavisi sağlamak için. Uygulanması, donörlerin ve çeşitli alıcı kategorilerinin immünohematolojik çalışmalarının ve ayrıca kan ve bileşenlerinin transfüzyonuna ihtiyaç duyabilecek tüm tıbbi kurumların hastalarının rutin muayenelerinin zorunlu bir bileşenidir.

Dolaylı bir antiglobulin testi aşağıdaki durumlarda kullanılır:

Rh faktörünün diğer yöntemlerle (poliglüsin, jelatin, vb.) belirlenmesinin bulanık sonuçlarıyla Rh ilişkisinin (antijen D) daha doğru bir şekilde belirlenmesi için;

Zayıf eritrosit antijenlerini (Kell, Duffy, Kidd, Lewis vb. sistemler) ve bu antijenlere karşı oluşan antikorları tespit etmek için;

Transfüzyon sonrası hemolitik reaksiyonlara neden olan antikorlar dahil olmak üzere alloimmün anti-eritrosit antikorlarının saptanması ve tanımlanması için;

Transfüzyon hemolitik komplikasyonlarında AB0 sisteminin immün antikorlarının varlığını belirlemek;

Transfüze edilen kanın ve bileşenlerinin bireysel seçimi için uyumluluk testi olarak.

Bu nedenle Coombs testi tıbbın çeşitli alanlarında (hematoloji, obstetrik, romatoloji, transfüzyon, klinik ve laboratuvar tanıları vb.) kullanılan önemli bir tanı testidir. Coombs testinin özelliklerinin bilinmesi, sonuçların güvenilirliğini artırmaya yardımcı olacak ve laboratuvar verilerinin doğru yorumlanmasına katkıda bulunacaktır.

Edebiyat

1. Antikorlar. Yöntemler / ed. Cathy. — M.: Mir, 1991.

2. Bayramalibeyli I.E., Rahimov A.A., Gadzhiev A.B.. // Aneminin transfüzyon tedavisi: ders kitabı. doktorlar için rehber. - M .: Prakt. tıp, 2005. - S. 105-106.

3. Volkova O.Ya., Fregatova L.M., Levchenko L.B.// Transfüzyon. - 2006. - 2 numara. - S.39-62.

4. Donskov S.I.// Rhesus sisteminin kan grupları: teori ve pratik. - M.: VINITI RAN, 2005. - S. 180-186, 195.

5.İmmünoseroloji (normatif belgeler) / komp. A.G. Bashlay, S.I. Donskov. — M.: VINITI RAN, 1998.

6.Klinik uygulamada kan sisteminin araştırılması / ed. GI Kozintsa, V.A. Makarov. — M.: Triada-X, 1997.

7. Levin VI. Akut posthemorajik anemi döneminde eritrodierez ve eritropoez mekanizmasına: Ph.D. dis. ... can. Bal. Bilimler. - Minsk, 1968.

8. Rahimov A.A., Bayramalibeyli I.E.. // Aneminin teşhisi, önlenmesi ve tedavisinin temelleri. - M .: Rusya Federasyonu Sağlık Bakanlığı'nın GOU VUNMT'leri, 2002. - S. 204-209.

9. Chumakova E.D.. // Gerçek problemler hematoloji ve transfüzyon: Belarus Cumhuriyeti hematologlar ve transfüzyonologlar VI Kongresi materyalleri, Minsk, 24-25 Mayıs 2007 / ed. A.I. Svirnovsky, M.P. Potapnev. - Minsk: Hematoloji ve Transfüzyon için Cumhuriyet Bilimsel ve Pratik Merkezi, 2007. - S. 50.

10. Coombs R., Mourant A., Yarış R. // Lanset. - 1945. - Cilt. 2. - S.15.

11. serbest adam J. // J. Clin. Pathol. - 1979. - Cilt. 32. - S. 1014-1018.

12. Holburn AM. kalite kontrol. Hematolojide Yöntemler / ed. Cavill. - Edinburg: Churchill Livingstone, 1982. - Cilt. 4. - S.34-50.

13. Hakan S.// CMAJ. - 2006. - Cilt. 175, No. 8. - S. 919.

14. Komatsu F.// Nippon Rinsho. - 2005. - Cilt. 63 (ek 7). - S.719-721.

15. Komatsu F.// Nippon Rinsho. - 2005. - Cilt. 63 (ek 7). - S.716-718.

16. Molthan L., Reidenberg M.M., Eihman M.F.// Yeni İngilizce J.Med. —1976. — cilt 277. - S. 123-125.

17. Müirhead E.E. korularM., Brian S.. // J. Lab. klinik Med. —1954. — cilt 44. - S.902-903.

18. Rosse WF//hastane Pratik - 1995. - N 105.

19. Voak D., Downie D., MooreB. et al. //Biyotestler Bull. - 1986. - Cilt. 1. - S.41-52.

20. Voak D., Haigh T., Downie D. et al. Antiglobulin testleri için Hücre Yıkama makineleri. Tekrar testi - yaygın olarak kullanılan bir makinenin verimsizliğini gösteren yeni bir yöntem - Sorvall CW1-AF2: DHSS Teknik Şubesine rapor, Şubat 1991.

21. Williams M.E., Thomas D., Harman C.P.. et al. //Antimikrobiyal Ajanlar ve Kemoterapi. -1985. - S.125-127.

22. Zarandona J.M., Yazer M.H.. // CMAJ. - 2006. - Cilt. 174, No. 3. - S. 305-307.

Tıbbi haberler. - 2008. - 3 numara. -S.33-36.

Dikkat! Makale tıp uzmanlarına yöneliktir. Bu makalenin veya parçalarının İnternette orijinal kaynağa köprü olmadan yeniden basılması, telif hakkı ihlali olarak kabul edilir.

benzer makaleler