Anti Lewis šta. Analiza za sifilis ELISA - dekodiranje analize
Cijena: na zahtjev
Možete dodati artikl u korpu za kupovinu tako što ćete navesti količinu
Vrlo je važno odabrati upravo one testove, metode ili dijagnostičke metode koje će zaista pomoći da se postavi tačna dijagnoza, a ne još više zbuni liječnika. Enzimski imunosorbentni test odavno se etablirao kao metoda koja omogućava ne samo da se dobije pozitivan ili negativan odgovor na pitanje - je li osoba bolesna od bilo koje spolne infekcije, već i da se utvrdi u kojoj je fazi razvoja bolest, kao i da se shvati da li je pacijent imao sličan problem u anamnezi. ELISA za sifilis danas je jedan od najosetljivijih i najspecifičnijih testova, a njegova tačnost je oko 90%.
Test sistemi koji koriste metodu enzimske imunoeseje dizajnirani su za otkrivanje ne samo sifilisa, već i mnogih drugih infekcija: hepatitisa, HIV-a, CMV-a, herpesa, toksoplazmoze itd. ELISA test za sifilis omogućava vam da odredite antitijela (IgG, IgA, IgM) na blijedu treponemu sadržanu u krvi bolesne osobe. Ova metoda vam omogućava da vidite interakciju antitijela sa posebnim preparatima koji sadrže antigene koji u kombinaciji s antitijelima mogu formirati znak bolesti, što je jasno vidljivo u različitim dijagnostičkim metodama.
Enzimski imunosorbentni test za sifilis temelji se na metodi interakcije antitijela otkrivenih u krvi s antigenom infektivnog agensa. Dijagnoza će ovisiti o tome koja su antitijela korištena: mogu se otkriti ili antitijela određene klase ili općenito. Za dijagnosticiranje ove metode krv se uzima na prazan želudac iz vene.
ELISA krvni test na sifilis uključuje korištenje tri klase imunoglobulina: G, M, A. Ovi imunoglobulini imaju jedno svojstvo koje je važno za dijagnosticiranje sifilisa ELISA-om: proizvode se u strogo definiranom slijedu, zbog čega ELISA omogućava odrediti u kojoj je fazi proces i kakvom dinamikom se razvija:
- Imunoglobulin M u krvi pokazuje koliko je vremena prošlo od infekcije. Međutim, pozitivni rezultati njegovog prisustva ne znače uvijek prisustvo spolno prenosive bolesti: moguće je da je osoba doživjela pogoršanje neke bolesti. hronična bolest koji je izazvao takvu reakciju.
- Prisustvo IgA antitela znači da je prošlo najmanje mesec dana od infekcije.
- Zbog imuniteta na ovu bolest se ne proizvodi, pozitivan rezultat IgG testa može pokazati i vrhunac bolesti i period nakon terapije.
Šta znači ELISA za pozitivan sifilis?
Treba napomenuti da ELISA pozitivna na sifilis nije razlog za paniku. Činjenica je da ova metoda omogućava utvrđivanje samo prisutnosti antitijela, ali ne i patogena. Stoga, ako je ELISA rezultat na sifilis pozitivan, to još nije osnova za postavljanje dijagnoze. Međutim, u naučnom svijetu sistemi za testiranje se svakodnevno unapređuju, a danas to znači da se u većini slučajeva još uvijek može vjerovati rezultatima analiza.
Postoje samo dva dijagnostička rezultata: “pozitivan” i “negativan”. U prvom slučaju pozitivni podaci znače da pacijent ima bolest u jednom od stadijuma, ili da je nedavno završio kurs lečenja. Negativan rezultat enzimskog imunosorbentnog testa znači ili odsutnost bolesti, ili vrlo ranu fazu njenog razvoja.
Kliničku sliku prve faze sifilisa predstavlja otkrivanje tvrdog šankra u različitim područjima.
Prvi simptomi sifilisa javljaju se 3-5 sedmica nakon infekcije. Do ovog trenutka bolest se odvija bez ikakvih vanjskih manifestacija.
Vrlo često, nakon nezaštićenog odnosa, osoba koja sumnja na sifilis, HIV ili hepatitis.
Recenzije i komentari
Muž je testiran na sifilis, ELISA na sifilis - pozitivan, RMP na sifilis - negativan. I šta to znači?
Tokom trudnoće (period je bio 37 sedmica), ELISA skor je bio pozitivan 2,1. Nakon porođaja radila sam testove 2 puta - sve je bilo negativno. Posle 6 meseci ponovo je prošla, ELISA - pozitivna, CP=1,9 (IgM+IgG). Šta to znači.
Zdravo! Šta to znači: test krvi na sifilis ELISA (ukupno at.) je pozitivan?
Molim vas recite mi šta znači rmp1+, rpga 1+ ifa ukupno je negativan! Hvala unapred.
ELISA je lažno pozitivna!
Ostavite recenziju ili komentar
NAJNOVIJE PUBLIKACIJE
VENEROLOŠKE VIJESTI
Balanopostitis
sifilis
Herpes
Kontracepcija
ELISA test krvi
Za sveobuhvatnu procjenu stanja tijela (posebno njegovih zaštitnih funkcija) propisan je enzimski imunosorbentni test (ELISA). ELISA test krvi radi se za dijagnosticiranje infektivnih, autoimunih, hematoloških patologija, primarnih i sekundarnih imunodeficijencija. U ovom članku predlažemo da detaljnije razmotrimo što je ELISA test krvi, kao i koje indikacije postoje za njegovu provedbu.
Indikacije za imenovanje krvnog testa ELISA i princip njegovog djelovanja
Kao što smo već napomenuli, ELISA test krvi je laboratorijska istraživanja, koji otkriva antigene ili antitijela u uzorku krvi. Ova analiza se koristi za otkrivanje nivoa hormona, imunoloških kompleksa i imunoglobulina. Postoje sljedeće indikacije za isporuku ELISA analize:
- Dijagnoza alergije.
- Dijagnoza bolesti virusnog porijekla - Epstein-Barr virus, herpes, hepatitis, citomegalovirus.
- Dijagnoza spolno prenosivih infekcija - mikoplazma, ureaplazma, sifilis, trihomonas, klamidija.
- Definicija imunodeficijencije.
- Dijagnostika onkoloških patologija.
- Procjena efikasnosti terapije.
- Određivanje nivoa hormona.
- Preoperativno sveobuhvatan pregled.
Princip djelovanja enzimskog imunotesta zasniva se na testu krvi na prisustvo imunoglobulina (specifična proteinska antitijela). Imunoglobuline proizvodi imunološki sistem kada antigeni (strani mikroorganizmi) uđu u ljudsko tijelo. Ove imunološke molekule vežu se za različite infektivne agense i neutraliziraju ih. Važna razlikovna karakteristika koju poseduju imunoglobulini je njihova specifičnost. Zbog ovih karakteristika, oni mogu formirati kompleks antigen-antitijelo vezivanjem za specifični antigen. Tokom ELISA testa krvi, ovaj kompleks se određuje kvantitativno i kvalitativno.
Za ovu studiju često se koristi ljudska krv. Međutim, kao materijal za analizu možete uzeti sadržaj staklasto tijelo, amnionska tečnost, cerebrospinalna tečnost. Uzorak krvi se obično uzima iz pacijentove kubitalne vene. Preporučuje se davanje krvi na prazan želudac (od posljednjeg obroka mora proći najmanje 12 sati). Ako pacijent uzima lijekovi moraju se prijaviti ljekaru, jer neki od njih mogu utjecati na rezultat analize. Takođe, na pouzdanost rezultata testa utiče i upotreba droga i alkohola.
Dešifrovanje krvnog testa za ELISA
Forma ove analize obično ukazuje na negativan (-) ili pozitivan (+) rezultat izračunavanja svake klase imunoglobulina.
Predlažemo da razmotrimo tumačenje vjerovatnog dekodiranja krvnog testa za ELISA.
- IgG, IgA nisu otkriveni i rezultat IgM je negativan - potpuni oporavak.
- Rezultat IgM, IgA, IgG je negativan - nema imuniteta na infekciju.
- IgG rezultat, IgA pozitivan i negativan, kao i rezultat IgM pozitivan- prisustvo akutne infekcije.
- Pozitivan IgG rezultat i negativan IgA i IgM rezultat - imunitet nakon vakcinacije ili nakon infekcije.
- Pozitivan ili negativan IgG, IgA i negativan IgM rezultat je kronična infekcija.
- Rezultat IgG, IgM, IgA je pozitivan - pogoršanje kronične infektivne patologije.
U enzimskom imunoeseju, pored pojašnjenja klasa antitijela, u transkriptu su naznačeni i njihovi kvantitativni pokazatelji. Međutim, opširno objašnjenje za njih daje samo ljekar koji prisustvuje.
Prednosti i nedostaci ove studije
- Relativno niska cijena.
- Jednostavnost upotrebe.
- Mogućnost dijagnostike rana faza sumnja na bolest.
- Relativno visoka tačnost dobijenih podataka.
- Kratak vremenski period potreban za dobijanje rezultata studije.
- Sposobnost praćenja dinamike razvoja infektivnog procesa u organizmu.
- Visok nivo unifikacije, što omogućava provođenje masovnih istraživanja.
- Automatizacija svih faza istraživanja.
Nedostatak ELISA testa krvi je što može biti prilično rijetki slučajevi dati lažno pozitivne ili lažno negativne rezultate. Takođe, tokom studije, pored tehničkih grešaka, razlog lažni rezultati pacijent može imati reumatoidni faktor, prisustvo hronične bolesti(u kojoj se stvaraju antitijela), uzimanje određenih lijekova, metabolički poremećaji.
- Giardiasis.
- Ascariasis.
- cisticerkoza.
- Amebijaza.
- Trihineloza - studija se provodi više puta, 4-12 sedmica nakon infekcije, utvrđuje se maksimalni nivo antitijela.
- Teniasis.
- Opistorhijaza - vrši se diferencijalna dijagnoza između akutnog i kroničnog oblika bolesti.
- Toksoplazmoza.
- Fascioliasis - in akutna faza bolest je određena prisustvom antitela.
- Kožna ili visceralna lišmanijaza.
Prilikom korištenja materijala sa stranice, aktivna referenca je obavezna.
Informacije koje se nalaze na našoj web stranici ne smiju se koristiti za samodijagnozu i liječenje i ne mogu biti zamjena za savjetovanje s liječnikom. Upozoravamo na prisustvo kontraindikacija. Potrebna je konsultacija specijaliste.
Koje se krvne pretrage daju na sifilis: RW, RPHA, ELISA, VDRL, RPR, RIBT, dekodiranje rezultata testova
Sifilis je zarazna bolest uzrokovana spirohetom Treponema pallidum, sklona progresivnom kroničnom toku, sa jasnom periodizacijom kliničkih simptoma.
Preovlađivanje seksualnog prijenosa nad kontaktnim i transplacentalnim svrstava ovu bolest u niz spolno prenosivih bolesti (STD, SPI). Osim ovih metoda prijenosa infekcije, umjetni put (od latinskog "artificio" - umjetno stvoren) igra posebnu ulogu.
Tipičan je za medicinske ustanove, uglavnom se sprovodi u bolničkom okruženju. Do infekcije dolazi prilikom transfuzije krvi, raznih hirurške operacije, invazivne dijagnostičke metode.
Uprkos karantinu darovane krvi, problem otkrivanja sifilisa kod davalaca je različite faze bolest je i dalje prisutna.
Stoga dijagnostičke mjere za sifilis zahtijevaju standardizaciju, uvođenje novih osjetljivih i informativnih metoda identifikacije, kao i minimiziranje grešaka i pogrešnog tumačenja rezultata testova.
Klasifikacija laboratorijskih dijagnostičkih metoda
Dijagnoza sifilisa ima neke karakteristike i razlikuje se od dijagnoze drugih. bakterijske infekcije. Složena struktura i antigena svojstva blijede treponeme uzrokuju greške u interpretaciji rezultata seroloških testova.
Test krvi na sifilis nudi se 3 glavne grupe pacijenata:
- 1 Skrining i klinički pregled grupa stanovništva (uključujući trudnoću, registraciju u prenatalna ambulanta, prijem na rad i upis medicinske knjižice i sl.).
- 2 Skrining u rizičnim grupama (nezaštićeni seksualni odnos sa osobom zaraženom sifilisom, osobe nakon prisilnog seksualnog kontakta, zaražene HIV-om itd.).
- 3 Osobe sa simptomima ili se sumnja da imaju sifilitičnu infekciju.
Sve laboratorijske metode uslovno se deli na direktne i indirektne.
Direktne metode
- 1 Identifikacija Treponema pallidum u tamnom polju (mikroskopija tamnog polja).
- 2 Infekcija eksperimentalnih životinja (kultiviranje u laboratorijskim životinjama).
- 3 PCR (lančana reakcija polimeraze).
- 4 DNK sonda ili hibridizacija nukleinske kiseline.
Indirektne metode
Serološke reakcije su laboratorijske dijagnostičke metode zasnovane na detekciji antitijela (skraćeno AT) na antigene blijede treponeme (skraćeno AG). Oni su neophodni za potvrđivanje dijagnoze.
- 1 Netreponemski testovi:
- Wassermanova reakcija (RSK);
- Reakcija mikroprecipitacije (MR, RMP) i njeni analozi, koji su dati u nastavku;
- Brzi plazma reagin test (RPR, RPR);
- Test sa crvenim toluidinom i serumom (TRUST);
- Netreponemski test Laboratorije za proučavanje polno prenosivih bolesti - VDRL.
- 2 treponemska testa:
- R-cija imobilizacije Treponema pallidum - RIBT / RIT;
- R-cija imunofluorescencije - RIF, FTA (razblaživanje seruma RIF-10, RIF-200, RIF-abs);
- R-cija pasivne hemaglutinacije (RPHA, TRPGA, TPHA);
- ELISA (ELISA, EIA);
- Imunobloting.
Slika 1 - Algoritam serodijagnostike sifilisa
Histomorfološke metode
Ove metode se svode na utvrđivanje karakteristika histomorfologije sifilitičkih manifestacija. Pažnja se posvećuje suptilnostima strukture tvrdog šankra. Kako god, diferencijalna dijagnoza infekcija pomoću histologije je vrlo teška. Histomorfologija se koristi s drugim laboratorijskim i kliničkim testovima.
Mikroskopija tamnog polja Treponema pallidum
Ova metoda se temelji na direktnom otkrivanju blijede treponeme u ispitivanom materijalu pomoću mikroskopa i posebnih uređaja (najčešće iscjedak erozija i čireva, rjeđe likvora i drugih supstrata).
Uz pomoć skarifikacije, struganja, istiskivanja od erozija i ulceroznih defekata dobija se eksudat, a zatim se pripremljeni preparat ispituje pod mikroskopom.
Obično se blijede treponeme otkrivaju u preparatu dobivenom iz šankra, iz žarišta sekundarnog svježeg, sekundarnog rekurentnog sifilisa, kao i punktata limfnih čvorova, placente.
Zasnovana na fenomenu sjaja malih čestica u tamnom polju kada ih udari snop svjetlosti (Tyndallov fenomen), metoda vam savršeno omogućava razlikovanje uzročnika sifilisa od drugih treponema na osnovu morfoloških razlika i razlika u načinu bakterija se pomera.
Za mikroskopiju se koristi specijalni kondenzator tamnog polja odgovarajuće optičke rezolucije. Lijek se dobiva metodom zgnječenih kapi (kap materijala se nanosi na čisto, nemasno staklo i prekriva vrlo tankim pokrovnim stakalcem).
Ulje za potapanje kapa se na pokrovno staklo. Okretanjem cijevi i okretanjem uveličavajućeg sočiva podešava se željeno osvjetljenje.
U tamnom polju mikroskopa detektuju se krvna zrnca, epitelne ćelije i uzročnik sifilisa. Blijeda treponema izgleda kao spirala, vrlo tanka, zrači srebrnastom bojom, glatkim pokretima.
Slika 2 – Mikroskopija tamnog polja kao način za vizualizaciju blijede treponeme u materijalu koji se proučava. Izvor slike - CDC
Treponema pallidum se mora razlikovati od drugih treponema, uključujući Tr. refringens, koji se može naći u orofarinksu i genitalnoj sluznici. Ova bakterija pravi haotične pokrete, ima široke i asimetrične, prilično grube kovrče. Osim toga, Treponema pallidum se razlikuje od Tr. Microdentium, Tr. Buccalis i Tr. vincenti.
Vizualizacija bakterija u tamnom polju ponekad je dopunjena reakcijom fluorescencije. Za to se nativni materijal dodaju antitreponemska antitijela označena fluorescentnom bojom. Ovo formira kompleks nazvan antigen-antitijelo (skraćeno AG-AT), koji je predmet proučavanja pomoću fluorescentnog mikroskopa.
Metoda lančane reakcije polimeraze (PCR).
PCR, razvijen 1991. godine za otkrivanje molekula deoksiribonukleinske kiseline (DNK) treponema pallidum, vrlo je osjetljiv i specifičan, omogućava otkrivanje fragmenata DNK patogena.
Ova analiza se zasniva na kopiranju kratkih delova DNK spirohete palidum koji zadovoljava navedene parametre i koji je prisutan u uzorku. Sve se to radi u veštačkim uslovima (in vitro). Reakcija se odvija u uređaju - pojačalu, koji obezbeđuje periodizaciju temperaturnih ciklusa. Dolazi do hlađenja, a zatim zagrevanja epruveta sa greškom od 0,1˚S.
DNK šablon se zagrijava 2 minute na temperaturi od 92-98°C (maksimalna temperatura se koristi ako je polimeraza termostabilna). Kada se zagriju, lanci DNK se razilaze zbog raspada vodikovih veza između njih. U koraku žarenja, temperatura reakcije se snižava kako bi se prajmer vezao za jednolančani šablon.
Žarenje traje oko 30 sekundi, tokom kojih se sintetišu stotine nukleotida. Novosintetizirane molekule kopira polimeraza, zbog čega se specifični fragmenti deoksiribonukleinske kiseline višestruko povećavaju. Naknadno otkrivanje fragmenata provodi se elektroforezom u agar gelu.
PCR dijagnostika sifilisa je i dalje eksperimentalne prirode, ali je opravdana kada se otkrije kongenitalna infekcija, u teškim dijagnostičkim slučajevima ili sa minimalnim sadržajem blijede treponema u ispitivanom materijalu.
DNK hibridizacija
Hibridizacija DNK se izvodi in vitro i zasniva se na potpunom ili djelomičnom povezivanju dva jednolančana DNK molekula u jedan molekul. U slučaju potpunog podudaranja komplementarnih fragmenata, unija je laka. Ako je komplementarno poklapanje djelomično, tada se povezivanje lanaca DNK odvija sporo. Na osnovu vremena fuzije lanca može se procijeniti stepen komplementarnosti.
Kada se DNK zagrije u puferskom rastvoru, vodikove veze se prekidaju azotnim bazama koje su komplementarne, kao rezultat toga, lanci DNK se razilaze. Zatim se dobiva preparat od dvije denaturirane deoksiribonukleinske kiseline. Nakon hlađenja, jednolančane regije se obnavljaju. Formira se takozvani DNK hibrid.
Metoda omogućava procjenu i analizu brzine žarenja, uzimajući u obzir karakteristike (sličnosti i razlike) DNK između vrsta ili unutar vrste.
Upotreba DNK sonde sastoji se u hibridizaciji obilježenog DNK fragmenta sa specifičnim DNK regionom za identifikaciju komplementarnih nukleotidnih sekvenci. Grupa nezasićenih atoma (hromofora) ili radioaktivnih izotopa koristi se za označavanje sonde.
DNK sonda se koristi za heterogenu i homogenu detekciju nukleinskih kiselina. Uloga sonde je da odredi područja u kojima je došlo do fuzije mete i sonde. Detekcija u homogenom sistemu ima prednost što može pratiti hibridizaciju molekula DNK u realnom vremenu.
Suština metode se svodi na denaturaciju i renaturaciju DNK (ponovno ujedinjenje lanaca DNK). Proces renaturacije nukleinske kiseline i DNK sonde završava se formiranjem "hibrida".
Specifične sekvence nukleinske kiseline hibridiziraju se sa DNK sondom i tako se detektuju i omogućavaju procjenu količine DNK u test materijalu.
Infekcija laboratorijskih životinja
Visoka osjetljivost zečeva na Treponema pallidum (oko 99,9%) omogućava im da se koriste u dijagnostici sifilitičke infekcije.
Infekcija kunića se provodi u istraživačkim centrima i predstavlja "zlatni standard" za procjenu osjetljivosti drugih metoda.
Vratimo se treponemskim i netreponemskim testovima, jer se oni najčešće koriste. Razmotrite njihove prednosti i nedostatke, kao i greške u interpretaciji rezultata.
Netreponemski testovi
Ovo su testovi za utvrđivanje IgG antitela i IgM na standardizovani kardiolipin antigen. Njihov značajan nedostatak je njihova relativno niska specifičnost.
Niska cijena i lakoća implementacije omogućavaju klasificiranje ovih testova kao skrining dijagnostičkih testova neophodnih za postavljanje preliminarne dijagnoze i skrining među populacijom.
To su netreponemski testovi koji se daju prilikom upisa medicinske knjižice, prijave za posao, prijave u preporođajnu ambulantu.
- 1 Minimalna osjetljivost u fazi primarnog sifilisa - 70%;
- 2 Minimalna osjetljivost u stadijumu kasnog sifilisa - 30%;
- 3 Mogućnost lažno negativnih i lažno pozitivnih rezultata;
- 4 Složenost implementacije RSC-a.
- 1 Relativno niska cijena testne proizvodnje;
- 2 Dobijte brzi odgovor;
- 3 Mogućnost njihove primjene za skrining.
Dobivanje lažno pozitivnih ili slabo pozitivnih uzoraka moguće je u sljedećim slučajevima:
- 1 Kršenje tehnologije izvršenja, prilikom blokiranja AG-AT kompleksa.
- 2 Prisustvo pacijenta autoimune bolesti(reumatoidni artritis, reumatizam, skleroderma, sistemski eritematozni lupus, sarkoidoza, itd.).
- 3 Maligne neoplazme.
- 4 Virusne i bakterijske infekcije.
- 5 Endokrine bolesti (autoimuni tiroiditis, dijabetes melitus).
- 6 Trudnoća.
- 7 Konzumiranje alkohola.
- 8 Konzumiranje masne hrane.
- 9 starost.
Kao što vidite iz liste, razloga za netačan rezultat ima dovoljno. Stoga ga treba tretirati s velikim oprezom. Razmotrimo još dva uzorka uz RSC. Ovo je reakcija mikroprecipitacije i VDLR (njena modifikacija).
Reakcija fiksacije komplementa (RSK, Wasserman, RW)
Ovo je test zasnovan na sposobnosti komplementa da se veže za AG-AT komplekse. Dobijeni kompleks se identifikuje pomoću hemolitičkog sistema. Kardiolipin antigen značajno povećava osjetljivost uzorka.
Osetljiva je Colmerova reakcija, koja se sastoji u izvođenju pri različitim temperaturnim uslovima. Dakle, prva faza Colmerove reakcije teče na temperaturi od 20˚S pola sata, druga faza na temperaturi od 4-8˚S 20 sati. Za to vrijeme dolazi do vezivanja komplementa.
Prilikom izvođenja RSK-a moguće je dobiti oštro pozitivne rezultate. Razlog je vjerovatno veliki titar antitela u nerazblaženom serumu. U ovom slučaju, uzorci se stavljaju sa opadajućim dozama.
Da bi se razlikovali stadijumi sifilisa i procenila efikasnost antisifilitičkog tretmana, određuje se količina antitela u serumu.
Pozitivnost uzorka se procjenjuje pomoću ukrštanja; također, u Wasserman, Colmer i Cann reakcijama, indicirano je razrjeđivanje seruma.
Reakcija mikroprecipitacije
Budući da je složenost izvođenja navedenih pretraga velika, razvijena je ubrzana metoda za serodijagnostiku sifilisa, tzv. ekspresna metoda, reakcija mikroprecipitacije (skraćeno MR, RMP), za širinu obuhvata medicinskih pregleda različitih grupa stanovništva. .
Izvodi se s kardiolipinskim antigenom i ekscipijentima. Njegova prednost je uzimanje periferne krvi za istraživanje. Time se značajno ubrzava i sama tehnika i rad laboratorijskih asistenata.
Slika 2 - Reakcija mikroprecipitacije (šema)
MR zahtijeva plazmu ili inaktivirani serum pacijenta (sadrže antitijela). Zatim se plazma stavlja u označene jažice. Zatim se testnom materijalu doda kap kardiolipin antigena, promiješa se i promućka. Kao rezultat, pojavljuju se karakteristične ljuspice u serumu zaražene osobe, različitog intenziteta.
Ovo je test kvaliteta. Kvantifikacija koristi 10 razblaženja seruma postavljenih u 10 odgovarajuće označenih jažica. Kod kvalitativnog MR-a, odgovor je naznačen u obliku krstova (plusova) ili minusa, kod kvantitativnog MR-a je naznačen titar antitela (1:2, 1:4 i tako dalje).
Prisustvo pahuljica smatra se pozitivnim ili slabo pozitivnim odgovorom. Pojava flokulata je moguća i u odsustvu bolesti, pa se konačna procjena dobivenog rezultata provodi nakon kontrolne studije ili drugih reakcija (RIBT, RIF, ELISA, RPHA).
Metoda koju preporučuje Svjetska zdravstvena organizacija za postavljanje reakcije na antigen lipoidne prirode (AH) s pravom se smatra najboljom među ostalim standardnim netreponemskim testovima. Razvijen u SAD, Gruzija u laboratoriji za venerične bolesti (Veneral Diseases Research Laboratories).
Skraćenica institucije poslužila je kao naziv za uzorak - VDRL. VDRL je modifikacija MP-a. Serum bolesnika sa sifilisom se inaktivira i stavlja na staklo. Korišteni antigen se sastoji od kardiolipina, holesterola i lecitina u različitim procentima. Odgovor se registruje skoro odmah.
Izrazita flokulacija se javlja u prisustvu antitijela u serumu. Serum postaje reaktivan 4 sedmice nakon infekcije. Da bi se procijenila količina antitijela, serum se prethodno razrijedi eksponencijalno.
- 1 relativno visoka osjetljivost;
- 2 relativno visoka specifičnost;
- 3 jednostavnost implementacije;
- 4 niska cijena reagensa;
- 5 dobiti brzi odgovor.
Nedostatak VDRL-a je relativno visoka stopa lažno pozitivnih rezultata.
Njihovi uzroci su sve gore navedene bolesti.
Treponemski testovi se izvode sa specifičnim antigenima Treponema pallidum. Oni su neophodni i obavezni za osnivanje konačna dijagnoza. Ovo je reakcija imunofluorescencije (RIF), reakcija indirektne hemaglutinacije (IPHA), enzimski imunotest (ELISA) itd.
Nakon pozitivnog rezultata netreponemskog testa (RPR, MP, VDRL), uvijek treba uraditi treponemske testove (češće kombinacija - RPHA, ELISA, RIF).
Treponemske testove je teže izvesti od brzih testova i koštaju više novca.
Ova reakcija (skraćeno RIF) koristi se za dijagnosticiranje sifilisa, uključujući latentne oblike, i za ponovnu provjeru pozitivnih i lažno pozitivnih uzoraka.
RIF se zasniva na sjaju obeleženih antitela kada se kombinuje sa kompleksom antigen-antitelo pod kvarcnom lampom. Metoda se počela koristiti 60-ih godina i odlikovala se jednostavnošću implementacije i visokom specifičnošću (koja je malo inferiorna u odnosu na RIBT).
Ima nekoliko modifikacija: RIF-10, RIF-200 i RIF-abs.
Najosjetljiviji RIF u razrjeđivanju je 10 puta, a ostali su specifičniji. RIF se izvodi u dvije faze. Krvni serum pacijenta se dodaje u AG. Formira se AG-AT kompleks koji se istražuje u sljedećoj fazi. Kompleks obeležen fluorohromom se zatim identifikuje mikroskopski. Ako se ne uoči sjaj, to ukazuje na odsustvo specifičnih antitijela u krvnom serumu.
RIF-200 je najvredniji od svih razblaženja. Metoda je namijenjena dijagnostici razne forme sifilis, posebno latentni sifilis, i unakrsna provjera pozitivnih uzoraka.
Treponema pallidum reakcija imobilizacije (skraćeno RIBT, RIT) je jedan od složenih seroloških testova koji zahtijevaju značajan trud i financijske troškove. RIBT se sve manje koristi, ali njegova važnost ostaje u dijagnostici latentnog sifilisa.
Od velikog je značaja u prepoznavanju lažno pozitivnih rezultata kod trudnica i zasniva se na imobilizaciji bakterija u prisustvu imobilizina – kasnih antitijela.
Rezultat se procjenjuje na osnovu procenta (%) imobiliziranog treponema pomoću posebne tablice:
- 1 Od 0 do 20 - negativan test.
- 2 Od 21 do 50 - slabo pozitivan test.
- 3 Od 50 pozitivnih reakcija.
Lažno pozitivni rezultati su mogući i kod RIBT-a. Dakle, netačan je odgovor moguć kod infekcije tropskom trepanematozom, kao i kod tuberkuloze, ciroze jetre, sarkoidoze i senilnih pacijenata.
Ovaj test krvi na sifilis naziva se test pasivne hemaglutinacije (skraćeno krv za TPHA, TPHA).
Antigen za TPHA se priprema od eritrocita ovnova obloženih fragmentima bledih treponema (dobijenih od zaraženih zečeva (vidi sliku 4)). Koristi se za analizu deoksigenirana krv(plazma ili inaktivirani serum) pacijenta.
Kada se antigen doda u serum bolesnika sa sifilisom, formira se AG-AT kompleks koji dovodi do aglutinacije crvenih krvnih stanica. aglutinaciju subjektivno određuje laboratorijski asistent.
Slika 3 - Šema RPHA (reakcija pasivne hemaglutinacije)
Uzorak se ocjenjuje kao pozitivan kada se pojave aglutinate ujednačene ružičaste boje. Boja precipitata u crvenoj boji ukazuje na taloženje eritrocita. RPHA je vrlo osjetljiv i vrlo specifičan.
Reakcija mikrohemaglutinacije
To je pojednostavljena verzija RPGA. Razlikuje se od prethodno opisanog uzorka po tome što ima manje antigena, razblaživača i krvnog seruma za izvođenje reakcije. Uzorak se može procijeniti 4 sata nakon inkubacije seruma. Koristi se u skriningu i masovnim pregledima na sifilis.
Vezani imunosorbentni test
Enzimski imunosorbentni test (skraćeno ELISA) zasniva se na specifičnoj reakciji antigen-antitijelo. biološki materijal(krvni serum pacijenta, likvor) se unose u jažice, na čijoj se čvrstoj površini fiksiraju antigeni blijede treponeme. Ispitni materijal se inkubira, a zatim se ispiru antitela koja se nisu vezala za antigene (vidi sliku 5).
Identifikacija nastalog kompleksa se vrši u fazi fermentacije pomoću imunog seruma označenog enzimom. Tokom hemijske reakcije, enzim boji nastale komplekse. Intenzitet bojenja ovisi o količini specifičnih antitijela u krvi pacijenta i bilježi se spektrofotometrom.
Slika 4 - Šema ELISA (enzimski imunotest)
ELISA osjetljivost je veća od 95%. Metoda se koristi u automatizovanom režimu za proučavanje dekretiranih grupa stanovništva: donora, trudnica i drugih, radi pojašnjenja dijagnoze u slučaju pozitivnih i lažno pozitivnih netreponemskih testova.
Imunobloting
Imunobloting je vrlo osjetljiva metoda, modifikacija jednostavne ELISA. Reakcija se temelji na elektroforezi sa odvajanjem blijedih antigena treponema.
Odvojene imunodeterminante se prenose na nitrocelulozni papir i prikazuju u ELISA testu. Serum se zatim inkubira i nevezana antitijela se ispiru. Dobijeni materijal se tretira imunoglobulinima označenim enzimima (IgM ili IgG).
Klinička procjena rezultata laboratorijske dijagnostike sifilisa
U tabeli 1 ispod, imamo mogući rezultati analize i njihova interpretacija. Kao što možete vidjeti u tabeli, glavna vrijednost u dešifriranju je sveobuhvatna procjena testova.
Tabela 1 - Dešifrovanje rezultata seroloških reakcija (testovi krvi na sifilis). Kliknite na tabelu za pregled
Reaktivnost testova se također ocjenjuje "krstovima":
- 1 Maksimalni odgovor (jako pozitivan test) označen je sa 4 križa.
- 2 Pozitivan uzorak je označen sa 3 krsta.
- 3 Slabo pozitivnu reakciju označavaju dva križa.
- 4 Jedan križić označava sumnjiv i negativan rezultat.
- 5 Negativan odgovor je označen znakom minus.
Problem optimizacije laboratorijske dijagnoze sifilisa do danas nije izgubio na važnosti. Savremene dijagnostičke metode, uprkos želji naučnika da dijagnostiku dovedu do najveće moguće osetljivosti i specifičnosti, zahtevaju kontrolnu proveru i individualni pristup.
Karakteristika sifilitičke infekcije je fenomen serorezistencije, koji nije dobio naučno objašnjenje. Dijagnoza se postavlja nakon potpunog pregleda pacijenta epidemiološkim, kliničkim, laboratorijskim metodama.
Na pozadini ekonomskog i tehničkog razvoja medicine, napredak je i u razvoju novih kriterija za dijagnosticiranje sifilisa. Sve to će Vam omogućiti da brzo, uspješno i precizno liječite pacijente.
- 1 FEDERALNE KLINIČKE PREPORUKE ZA VOĐENJE PACIJENATA SA SIFILISOM. RUSKO DRUŠTVO DERMATOVEROLOGA I KOZMETOLOGA. Moskva 2013;
- 2 MINISTARSTVO ZDRAVLJA RUJSKE FEDERACIJE NAREDBA od 26. marta 2001. N 87 “O POBOLJŠANJU SEROLOŠKE DIJAGNOSTIKE SIFILISA”;
- 3 Sifilis. Pranatharthi Haran Chandrasekar, MBBS, MD profesor, šef infektivnih bolesti, Odsjek za internu medicinu, Medicinski fakultet Univerziteta Wayne State. Medsacape.com;
- Smjernice za liječenje spolno prenosivih bolesti (CDC).
Kada je propisana analiza, uradite ELISA test na sifilis. Metode laboratorijske dijagnostike. Rezultati analize - kako odrediti normu i odstupanja. Troškovi enzimskog imunoeseja.
U pravilu, stalno kada kontaktiraju kliniku, liječnici propisuju različite testove. To im omogućava da identifikuju infekcije i bolesti od kojih osoba pati. ELISA, ili takozvani enzimski imunoesej, odličan je način za procjenu imunološki sistem organizam, te identificirati infekciju i stadijum bolesti po prisustvu antitijela.
Dakle, kome je dodeljena ova analiza i šta je to enzimski imunotest? Ljekari propisuju ovu analizu ako osoba ima sljedeće bolesti:
- Osip na tijelu - alergijske reakcije.
- Virusi - herpes, citomegalavirus.
- Polno prenosive bolesti - sifilis, trichomonas.
- Patologija povezana s rakom.
- Neurosifilis.
Pored ovih bolesti, analiza se propisuje za određivanje nivoa hormona u krvi. Na osnovu rezultata ocjenjuje se kvalitet terapije. Šta je sifilis vjerovatno svaka osoba zna, ali ne predstavlja njegove razmjere i koliko zaraženih hoda pored nas.
Trenutno je sifilis najčešća bolest. Ovo je treponom koji pogađa ljudsko tijelo. I kao rezultat toga, svi su pogođeni. unutrašnje organe bolestan.
Ovo je veoma opasna infekcija, a često se dešava da se možda i ne pokaže duže vrijeme. Dakle, osoba može biti nosilac i distributer dugo vremena, a da ne zna da je bolesna.
Metoda laboratorijske dijagnostike
Medicina ne miruje, moderne analize su se značajno razlikovale od starih metoda proučavanja tijela. Iako su svoju ulogu obavljali savršeno, ponekad su na rezultate morali čekati sedmicama i mjesecima. To naravno nije bilo povoljno za zaraženu osobu. Kakva su očekivanja rezultata, prošla je bolesna osoba.
Klasične analize - otkrivanje sifilisa metodom Wasserman, metoda Kahn počele su gubiti svoje pozicije i zamijenjene su testovima kao što je ELISA.
Ovo je najviše savremena metoda otkrivanje infekcije kod ljudi. Rezultat se dešifruje pomoću računara. To vam omogućava da preciznije odredite pozitivan rezultat ili negativan test.
Pročitajte i povezano
Šta je spolno prenosiva bolest? Simptomi, liječenje
Tokom dekodiranja, potraga za antitijelima na specifične bolesti. A kao rezultat analize, bilo je moguće otkriti infekciju kada je rezultat bio pozitivan. Korištenje ELISA-e za otkrivanje sifilisa podrazumijeva korištenje tri klase imunoglobulina:
- G, M, A - za dijagnozu su najvažniji.
- Proizvedeni su u inficirana osoba striktno određenim redosledom.
- Brzo odredite stadij infekcije.
ELISA rezultati - normalna i pozitivna analiza
Ako govori o analizi ELISA za sifilis, onda je u ovom slučaju teško reći da postoji norma ili odstupanje. Rezultat je obično negativan ili pozitivan. Osim toga, postoje titri koji određuju količinu antitijela u krvi.
Postoje mnoge suptilnosti u dešifriranju analize, ako je pokazala pozitivan rezultat, analiza će se ipak morati ponoviti nekoliko puta kako bi se isključila metoda lažno pozitivne reakcije.
Kao što je već napisano, postoji mnogo suptilnosti prilikom dešifriranja analize, a rezultat može odrediti samo liječnik. Dajemo primjere u tabeli, čiji rezultati se mogu prikazati za enzimski imunotest:
Nemojte očajavati ako je analiza pokazala pozitivan rezultat. U pravilu se vrše dodatne analize i ispitivanja, Različiti putevi radi preciznije dijagnoze.
Troškovi enzimskog imunoeseja
U pravilu, cijena ove analize direktno ovisi o samoj analizi i identifikaciji određene infekcije. Određivanje markera infekcije razne vrste košta od 200 do 350 rubalja. I takva analiza se vrši u roku od dva dana.
ELISA je najpopularnija i najsavremenija metoda za dijagnosticiranje organizma. Metoda je pokazala svoju efikasnost u otkrivanju infekcije, te određivanju tačnog perioda infekcije.
S obzirom na politiku cijena, možemo reći da je analiza dostupna svakoj osobi sa bilo kojim budžetom. Omogućava ljekaru koji prisustvuje da dobije potpunu sliku o infekciji osobe. Pokazao se u slučaju i nije razočarao doktore. U isto vrijeme, nakon što je primio analizu, ljekar koji je prisustvovao je mogao promptno reagirati i propisati pravovremeno liječenje.
(link do 3. članka u ovoj datoteci), omogućavajući procjenu sposobnosti tijela da se odupre zarazne bolesti i pokazujući fazu bolesti, važno mjesto zauzima enzimski imunotest (ELISA). Provođenje ove studije omogućuje vam da sveobuhvatno procijenite aktivnost zaštitne funkcije krvi i identificirate stanje imunodeficijencije u zaraznim patologijama, kao i bolestima krvi, autoimunim procesima i hormonalnim problemima.
Kako je moguće obuhvatiti toliko ciljeva u jednoj analizi i koje su indikacije za njenu implementaciju? Pokušajmo to shvatiti.
Šta je ELISA test krvi?
Ovo je laboratorijski test koji vam omogućava da odredite prisutnost specifičnih antitijela (zaštitni faktori krvi proteinske prirode) na određene antigene (patogene agense). Među antitijelima od najveće važnosti su imunoglobulini, koji mogu postojati u obliku imunokompleksa.
Imunoglobulini nastaju kao rezultat složenih ljudskih neurohumoralnih reakcija koje nastaju kao odgovor na uvođenje stranih antigena. Svaka vrsta patogena proizvodi svoja specifična antitijela. Djeluju tako što "vezuju" antigen ili patološki mikroorganizam, formirajući kompleksno jedinjenje "antigen-antitijelo", nakon čega slijedi neutralizacija, enzimska liza, reakcije fagocitoze i izlučivanje iz tijela.
Bilješka:upravo prisustvom određenih kompleksa ELISA metoda određuje vrstu patogena ili štetne supstance prisutne u pacijentu.
Osnovne principe funkcioniranja ljudskog imuniteta možete naučiti gledajući ovaj video pregled:
Šta su imunoglobulini
Otkriveno je i proučavano 5 glavnih klasa imunoglobulina - IgA, IgM, IgG, IgD, IgE. uloga ostalih još nije u potpunosti razjašnjena i oni su u fazi naučnog istraživanja.
Bilješka:najvažniji u praktičnoj medicini su imunoglobulini klasa - A, M i G. Informativnost definicije zasniva se na različitim vremenskim intervalima njihovog pojavljivanja, maksimuma i nestanka.
Razmotrimo ovo pitanje detaljnije.
Glavni zadatak imunoglobulin A (IgA) je zaštitna funkcija sluzokože respiratornog trakta, gastrointestinalnog trakta i mokraćnog sistema. S akutnim početkom bolesti nemoguće ih je identificirati. Ovi zaštitni kompleksi se pojavljuju tek od 2. sedmice od početka bolesti, ponekad i kasnije. Najveći dio imunoglobulina A koncentriran je u mukoznim tkivima. Otprilike oko 80%. Preostala antitijela cirkuliraju u krvi. Glavna funkcija je neutralizacija i uništavanje mikroorganizama. Nakon povlačenja akutnih manifestacija bolesti, količina ovih imunoglobulina počinje opadati i potpuno nestaje do 8 sedmica od početka bolesti. Ako se IgA nađe u više od kasni datumi, onda to ukazuje na kronizaciju procesa.
Glavni i prvi markeri akutne faze razvoja patologije su imunoglobulini klase M (IgM). Nalaze se do 5. dana od pojave malaksalosti. Njihovo prisustvo u krvi možete utvrditi oko 6 sedmica. Tada počinju brzo da nestaju.
Preostali imunološki odgovor karakterizira prisustvo u krvi imunoglobulini G klase (IgG). Pojava ovih faktora u krvi otkriva se otprilike mjesec dana nakon pojave bolesti. U budućnosti, oni se mogu odrediti za mnogo mjeseci, godina, pa čak i cijeli život, nastupajući zaštitna funkcija od povratka (relapsa) bolesti, au nekim slučajevima i onemogućavanja sekundarnog razvoja patologije. Ako je količina imunoglobulina G ponovo počela da raste, onda se može posumnjati reinfekcija. Sličan zaključak se može izvući vođenjem dva ili tri uzorka uzeta u razmaku od 2 sedmice.
Imunoglobulin D (IgD) koji se nalazi na B-limfocitima, nalazi se u maloj koncentraciji u zdravi ljudi. Nakon 10 godina života dostiže svoje maksimalne vrijednosti. Količina imunoglobulina D se povećava tokom trudnoće, kod pacijenata sistemske bolesti vezivno tkivo, bolesti uzrokovane imunodeficijencijom.
Indikacije za imenovanje enzimskog imunoeseja
Određivanje antitijela na prisutnost u tijelu patogenih mikroba koji uzrokuju:
- trihomonijaza;
- ureaplazmoza i.
Dolazi do povećanja broja imunoglobulina i sa.
Dijagnostika se provodi radi otkrivanja:
- herpetične bolesti;
- grupe virusnih hepatitisa;
- Epstein-Barr virus;
- citomegalovirus.
Uz pomoć ELISA-e moguće je utvrditi prisustvo antitijela na 600 vrsta alergena, otkriti stanje imunodeficijencije, provesti sveobuhvatan pregled prije transplantacijskih operacija i provesti sveobuhvatnu analizu efikasnosti liječenja.
ELISA je dodatna metoda za otkrivanje ćelija raka.
Kako se izvodi ELISA test krvi?
Za enzimski imunosorbentni test, u većini slučajeva, koristi se krv pacijenata, ponekad se uzimaju staklasto tkivo, tečnost kičmenog kanala i plodna voda.
Krv se vuče kroz injekcijsku iglu u špric iz kubitalne vene. Studija se provodi na prazan želudac. Treba imati na umu da uzimanje određenih lijekova može utjecati na rezultat analize. Prije davanja krvi morate se suzdržati od pušenja, pijenja alkohola. Upotreba narkotičkih supstanci može poremetiti rezultate.
U slučaju negativnih vrijednosti imunoglobulina IgM, IgG, IgA, možemo govoriti o odsustvu bolesti ili njenoj početnoj fazi, a moguć je i rezultat s minusima uz potpuni oporavak nakon značajnog vremena.
Ako IgA i IgM nisu otkriveni, a IgG je pozitivan, onda je po svoj prilici riječ o formiranom imunitetu nakon zarazne bolesti, odnosno nakon vakcinacije.
U slučaju visokog titra IgM sa negativnim vrijednostima IgG, IgA, može se zaključiti da postoji akutna zarazna bolest.
Simultane pozitivne vrijednosti rezultata imunoglobulina - IgA, IgM, IgG karakteristične su za akutnu fazu recidiva postojeće kronične bolesti.
Za kroničnu infekciju koja je u fazi remisije procesa, ELISA pokazuje negativne vrijednosti imunoglobulina M (IgM), dok će rezultat imunoglobulina G (IgG) i A (IgA) biti pozitivan.
Prednosti metode enzimskog imunoeseja
Glavne prednosti ELISA metode su:
- niska cijena analize;
- dijagnostička specifičnost, tačnost;
- dinamička kontrola (ponovite analize za određivanje efikasnosti liječenja i stadijuma bolesti);
- mogućnost provođenja masovnih pregleda u žarištima infekcije;
- brzina dobivanja rezultata;
- relativna jednostavnost analize;
- mogućnost korištenja informacione tehnologije u obradi;
- sigurnost i bezbolnost za pacijenta.
Postoje li nedostaci ELISA analize krvi?
Glavna negativna točka studije je mogućnost dobivanja lažno negativnih i lažno pozitivnih podataka. Uzrok nesporazuma mogu biti tehnički nedostaci, uzimanje lijekova koji mogu iskriviti sliku.
ELISA se koristi za otkrivanje:
- (ascaris, pinworms);
- oštar i hronični oblik opisthorhijaza;
- trihineloza;
- prisustvo lamblije (kao dodatna analiza);
- oblici lajšmanijaze;
- amebijaza;
- sadržaj toksoplazme;
U zaključku treba napomenuti da je moderna imunologija stalno u fazi razvoja, u potrazi za novim metodama za dijagnosticiranje i liječenje bolesti.
Stepanenko Vladimir, hirurg
